Instituto Tecnolgico de Tijuana

Departamento de Qumica y Bioqumica Ingeniera Qumica

Taller de Investigacin II

Extraccin de quitosano a partir de la cscara de camarn

Integrantes:

Ortiz Vargas Karla Soraya Mndez Reyes Diana Asyadeth Zambrano Estrada Libia Zulema

Asesor: Vicente Siqueiros

Tijuana, B.C., septiembre de 2012

MARCO TERICO Los crustceos son un extenso subfilo de artrpodos, con ms de 67.000 especies. Incluyen varios grupos de animales como las langostas, los camarones, los cangrejos, los langostinos y los percebes. Los crustceos son fundamentalmente acuticos y habitan en todas las profundidades, en sus diferentes especies son criaturas relativamente abundantes en los cuerpos de agua dulce o salada en todo el mundo, lo cual los convierte en un importante recurso pesquero y alimenticio. Prcticamente cada pas posee recetas y formas particulares para preparar y consumir estos crustceos. Si existe algn punto en comn, es que para consumirlos se procede a su cocimiento y que es comn que se elimine la cabeza, la coraza corporal, las aletas anteriores y posteriores, todas ellas partes ricas en quitina. La industrializacin y comercializacin en general, de todos los crustceos es una importante fuente de recursos pero, al mismo tiempo, se crea un enorme problema en medio ambiente ya que se topa con los caparazones de los crustceos, desechados por las fbricas tras la extraccin de la parte comestible, se acumulan en enormes basurales que constituyen un serio residuo contaminante, y esto representa un negativo impacto ambiental. Las investigaciones realizadas demuestran que estos residuos albergan un polmero natural denominado quitina esta sustancia tiene aproximadamente 200 usos en la industria ya sea medicinal, farmacutica, alimenticia, agrcola, tratamiento de efluentes, entre otras. El aprovechamiento de estos desechos constituye una oportunidad de desarrollo industrial, y a la vez, una solucin inteligente para el problema ambiental que los mismos generan. (Caprile, 2005)

La quitina es uno de los componentes principales de las paredes celulares de los hongos, del resistente exoesqueleto de los artrpodos (arcnidos, crustceos e insectos) y algunos rganos de otros animales. La primera persona que consigui describir correctamente su estructura qumica fue Albert Hofmann. La quitina es un polisacrido compuesto de unidades de Nacetilglucosamina (exactamente, N-acetil-D-glucos-2-amina) vea la figura 1. stas estn unidas entre s con enlaces -1,4, de la misma forma que las unidades de glucosa componen la celulosa.

Figura 1. Unidad repetitiva de la quitina

Por su amplia distribucin en la naturaleza la quitina es el segundo polisacrido en abundancia, despus de la celulosa. Este compuesto natural ha despertado un gran inters en los investigadores debido a que anualmente se obtienen en el mundo grandes volmenes (120000 toneladas) de quitina de los residuos de mariscos que tienen de un 14-35% de quitina asociado con protenas y adems por el problema medio ambiental dado por su lenta degradacin. El resultado de estas investigaciones ha sido satisfactorio por el aprovechamiento de la quitina y la quitosano en la aplicacin de las industrias farmacutica, alimenticia, cosmtica, entre otras. (Soro, 2007)

La quitina microcristalina producida por hidrlisis controlada de cido puede ser conveniente para el uso como estabilizante y espesante en alimentos. La viscosidad y la estabilidad de la emulsin de la quitina microcristalina es de 10 a 20 veces mayor que la de la celulosa cristalina lo que lo hace conveniente para los usos en mayonesa, mantequilla de cacahuete y otros alimentos tipo emulsin, esto es mencionado como una de las aplicaciones mayormente usadas. La quitina puede ser personalizada fcilmente para microorganismos individuales con el propsito de estimular su crecimiento mediante combinacin con nutrientes especficos, sales, vitaminas, enzimas, emulsionantes, aceleradores, retenedores de humedad, u otras sustancias que estimulan el crecimiento o el metabolismo reconocido que potencian selectivamente ciertos microbios nativos y/o no nativos en el ambiente contaminado. Del mismo modo, este compuesto tambin puede combinar con sustancias que inhiben competidores o predadores conocidos del microbio benfico para incrementar eficazmente la colonizacin de las poblaciones microbianas presentes naturalmente o aadidas artificialmente al sitio contaminado. La quitina tambin puede ser personalizada para su vida eficaz en el suelo. La quitina que se ha purificado e hidrolizado es considerada como un compuesto altamente bio-activo. En esta realizacin, estimula en gran medida el crecimiento microbiano y actividad enzimtica y es altamente eficaz como una superficie colonizadora de microorganismos, sin embargo, se degrada ms rpidamente en el suelo que la quitina menos hidrolizada. La quitina hidrolizada se puede producir mediante diversos

procedimientos enzimticos, qumicos, mecnicos, o energa de microondas entre otros. Sustancialmente la quitina no degradada y sus derivados son ms benficos en ciertas circunstancias. (Hernndez, 2004)

La funcionalidad residual a largo plazo para los microorganismos en quitina, se requiere para lograr algunas degradaciones de remedio biolgico complejas. La quitina se puede utilizar para atrapar los microbios en un microambiente que proporciona una superficie adecuada para colonizacin, inmovilizacin, humedad, nutriente, proteccin fsica de ciertos contaminantes, y proteccin bioqumica contra algunos microbios predadores. Estas funciones sirven para potenciar el comportamiento global del de los microbios en el ecosistema. La quitina puede o no puede estar modificada por los microorganismos especficos que se estn introduciendo. La quitina as como tambin sus derivados se pueden aadir al

ambiente como agente quelante para ciertos materiales contaminantes, particularmente metales pesados txicos, compuestos halogenuros y fenoles entre otros. En este caso, la quitina atrapa y se une a los metales, sirve como bio-pelcula artificial temporal para aquellos microbios que degradan tales elementos, bien nativos o introducidos ambientalmente. La eficacia de un bio-catalizador microbiano y vehculo usado de esta manera se incrementa en gran medida mediante su atraccin para (Martnez, 2009) La quitina o sus derivados tambin pueden servir como una absorcin o sustrato de absorcin mediante el cual el contaminante es arrastrado a los microorganismos que colonizan la quitina por tanto simplificando su funcin de bsqueda de comida, tambin sirven como un sustrato de carbohidratos para la produccin microbiana de exopolisacridos. La regulacin de esta funcin es muy importante en condiciones ambientales encontradas. El quitosano es el derivado de la quitina, por su parte, el quitosano es tambin un polisacrido que se encuentra en estado natural en las paredes celulares de algunos hongos; sin embargo, su principal fuente de produccin es su atraccin final de ambos contaminantes y microbio en el mismo microambiente.

la hidrlisis de la quitina en medio alcalina, usualmente hidrxido de sodio o de potasio, a altas temperaturas, vea figura 2. La produccin industrial de quitina y quitosano se realiza, por lo general, a partir de exoesqueletos de cangrejo y camarn, desechados de las industrias pesqueras. El principio activo se ha encontrado en los caparazones de los crustceos, tales como langostas, cangrejos y gambas, as como en otros organismos con exoesqueleto. Dado su bajo ndice de toxicidad y su abundancia en el medio ambiente, no es de esperar que dae al organismo ni a los animales de compaa, siempre que se emplee de acuerdo con las indicaciones establecidas.

Figura 2. Quitosano

La desacetilacin completa de la quitina produce un material totalmente soluble en medio cido conocido como quitano; sin embargo, cuando la desacetilacin del material de partida es incompleta se crea una mezcla de cadenas que tienen distintas proporciones de unidades (1-4)-2-acetamido-2desoxi-D-glucosa y (1-4)-2-amino-2-desoxi-D-glucosa, cuya relacin depende de las condiciones de reaccin y que, obviamente, genera materiales con distintas propiedades denominados quitosanos.

La diferencia en las propiedades de estos materiales puede llegar a ser notable. Las estructuras qumicas del quitano y el quitosano, vea la figura 3.

Figura 3. Quitano y quitosano

Dado la presencia de grupos aminas en la cadena polimrica ha hecho del quitosano uno de los materiales ms verstiles que se estudian desde hace ya algn tiempo, el gran nmero de trabajos que existen sobre el quitosano tiene una clasificacin por rea sobre las aplicaciones que se le han ido dando por la posibilidad de realizar una amplia variedad de modificaciones, tales como la reacciones de anclaje de enzimas, reacciones de injerto, obtencin de pelculas entrecruzadas, entre otras cosas, de las cuales se obtienen materiales con propiedades adecuadas para aplicaciones inmediatas y futuras y a continuacin se mencionan algunas de ellas, aunque la lista no pretende ser exhaustiva. (Soro, 2007) Entre las aplicaciones se encuentra la qumica analtica, en ella se realizan aplicaciones cromatogrficas, intercambiadores de iones, absorcin de iones de metales pesados y absorcin de cidos, fabricacin de electrodos especficos para metales, entre otras cosas. Otra de sus tantas aplicaciones es la biomedicina que consiste en la elaboracin de membrana de hemodilisis, suturas biodegradables, sustituyentes artificiales de la piel, agente cicatrizante en quemaduras,

sistemas liberadores de frmacos, liberacin de insulina, transporte de agentes anti-cancergenos, tratamiento de tumores (leucemia), control del virus del SIDA, entre otros. La agricultura y ganadera tienen como aplicacin el recubrimiento de semillas para su conservacin durante el almacenamiento, sistemas liberadores de fertilizantes, aditivo para alimento de animales, en formulacin de pesticidas, por mencionar algunas. En cosmticos se aplica en espumas de afeitar, cremas para la piel y el cuerpo. En el rea de dietticos los adelgazantes (existe una amplia variedad de productos comerciales que ofrecen el polmero como atrapador de grasas en el estmago), son una de sus aplicaciones. Otra rea es la de industria del papel, textil, alimentaria (soporte para inmovilizacin de enzimas en la produccin de maltosa, espesante en alimentos, agente de oxidacin controlada, agente preservante) en donde tiene cabida ms aplicaciones para el quitosano. Por ltimo y no menos importante estn las aplicaciones en el tratamiento de agua, se llega a utilizar el quitosano como agente floculante, agente coagulante, tratamientos de flotacin para la remocin de aceite de pescado en agua, agentes filtrantes para piscinas y spas, remocin de metales, remocin de surfactantes, por mencionar algunas aplicaciones. (Lrez, 2003)

METODOLOGA Los residuos de las cascaras de los crustceos estn compuestos por protenas de un 20 a 40%, sales de calcio y magnesio, mayormente carbonato y fosfato de un 30 a 60%, quitina de un 20 a 30% y lpidos de 0 a 14%, y esto es variando las proporciones con la especie y la estacin. (Pinillo, 1999) Por lo tanto, el aislamiento de la quitina de los bio-desechos de crustceos, implica 3 operaciones bsicas: a) Eliminacin del residual proteico. b) Eliminacin de la materia inorgnica. c) Eliminacin de pigmentos lipdicos (carotinoides). Los procesos qumicos convencionales se llevan a cabo con operaciones que incluyen lo que es la eliminacin de protenas y eliminacin de sales minerales por tratamiento con cido pero el paso de la desmineralizacin puede tambin preceder el paso de desproteinizacin. La decoloracin es conducida por un tpico tratamiento de blanqueado para destruir los pigmentos carotinoides. Es esencial un cuidadoso control sobre estas tres operaciones para alcanzar una alta pureza y caractersticas fsico qumicas uniformes de la quitina. Tambin las condiciones de proceso pueden ser adaptadas para obtener caractersticas especficas de la quitina de acuerdo con la finalidad propuesta. Recientemente los procesos enzimticos y biotecnolgicos han sido implantados tambin en los procesos de aislamiento de quitina. En las regiones tropicales, donde ms residuos de crustceos son generados, hay una carencia de tecnologa ambiental disponible para la extraccin de la quitina, protenas y pigmentos a nivel industrial.

La fermentacin bacteriana ha sido sugerida como una alternativa tecnolgica para el pre-tratamiento de desechos de camarones, teniendo la ventaja de permitir la recuperacin de menos enzimas y protenas desnaturalizadas en la quitina, as como pigmentos. El principal criterio para distinguir la quitosano de la quitina, es la solubilidad en soluciones cidas diluidas obtenidas cuando la fraccin residual de acetil es baja. Para obtener un producto soluble, este debe tener un grado de desacetilacin entre 80 y 85% o mayor, y la quitosano se conoce como un producto que tiene generalmente entre un 70 y un 85% de desacetilacin. Para la obtencin del quitosano por va qumica existen varios mtodos, se har mencin de varios considerados viables para la obtencin del quitosano como ya se mencion anteriormente. (Caprile, 2005)

Mtodo experimental La cscara del camarn (o de cualquier crustceo) ser lavada para eliminar cualquier residuo e impureza que pueda contener el exoesqueleto de camarn. Se dispondr del exoesqueleto de camarn (o cualquier crustceo) para ser secada, para que su consistencia tenga la apariencia de polvo fino y no de masa. Luego de secado se moler el exoesqueleto de camarn (o cualquier crustceo) para volverla un polvo. Se proceder a su despigmentacin para esto se utiliza xileno con el objetivo de decolorar el exoesqueleto de camarn, cuyo color original es rosa plido. Posteriormente se procede a decantar el producto y despus se deja secar a 50C. Se continua con su desproteinizacin este paso a seguir consiste en tratar el producto utilizando NaOH 6 M durante 3h de agitacin constante a

65C y se obtendr una masa desprotenizada y la protena, cuyo aspecto es gelatinoso y espumante. Una vez terminado este paso sigue la su descalcificacin el producto que se obtuvo anteriormente se trata con HCl 6 M a temperatura ambiente en un matraz con agitacin constante. Una vez terminado esto, se filtrar una vez ms y se realizan lavados con agua destilada caliente para eliminar el exceso de base. Este producto obtenido finalmente es la quitina. Posteriormente se realiza su desacetilacin ya que es el proceso por el cual la quitina es convertida en quitosano, consiste en eliminar las unidades acetilo de la quitina. Para ello se emplea el NaOH al 70% a 105C y despus se purifica filtrando y lavando con agua destilada. El producto obtenido finalmente es el quitosano. (Soro, 2007)

PRESUPUESTO De acuerdo a las necesidades de este proyecto se procedi a cotizar todos los materiales que se utilizarn en el proyecto de investigacin de ttulo extraccin de quitosano a partir de la cscara de camarn. En este proyecto de investigacin se cotiz el costo de los reactivos y materia prima, siendo estos: NaOH, HCl y agua destilada, adems de la cscara de camarn. Los reactivos que se cotizaron para el proyecto de investigacin fueron tomados en cuenta con la cantidad de 1 litro en soluciones y 1 libra en peso en reactivos, a continuacin se presenta una tabla en base a la relacin de costo de cada reactivo y materia prima, como se muestra en la tabla 1. Material NaOH (hidrxido de sodio) HCl (cido clorhdrico) Agua destilada Cscara de camarn Transporte Cantidad 1 lb 1L 1L Costo ($) 126.29 258 58.56 100 Total: $442.85

Tabla 1. Presupuesto en base a la relacin de costos de material

Total: cuatrocientos cuarenta y dos pesos con ochenta y cinco centavos MNX, de acuerdo a las necesidades y a todo lo planeado de este proyecto de investigacin. NOTA: Tres de los materiales mencionados en la tabla y equipo de laboratorio ser proporcionado por el Instituto Tecnolgico de Tijuana en un 47 %.

CRONOGRAMA
AGO SEP
SEMANA
4 5 6 7 8 9

OCT
SEMANA
10 11 12 13

NOV
SEMANA
14 15 16 17

DIC
SEMANA
18 19 20

ACTIVIDADES
Obtencin de materiales. Proceso Experimental (trabajo de laboratorio). Anlisis de los datos obtenidos del proceso experimental. Clculos realizados en base a datos obtenidos. Resultados. Interpretacin de resultados. Conclusiones. Reporte Final.

SEMANA
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