PROBLEMAS DE CINTICA ENZIMTICA

1. cCual sera la constante de velocidad de una reaccin de primer orden cuya t

1f2
es de
0,3 segundos? cQu intervalo de tiempo debera transcurrir para que desaparezca el
95 del reactivo?


2. La enzima ureasa cataliza la hidrlisis de la urea a amoniaco y a CO
2
. A 295, la
reaccin sin catalizar, tiene una energia de activacin de aproximadamente 125
kJfmol, mientras que en presencia de ureasa la energia de activacin se reduce a unos
+6 kJfmol. cEn qu factor incrementa la ureasa la velocidad de la reaccin?


3. cQu relacin numrica existe entre Km y [S| cuando una reaccin catalizada
enzimaticamente alcanza el 80 de la vmax?


+. 100 g de una enzima a 25C descomponen en 10 minutos el 1 de un sustato 0,1
N. La misma cantidad de enzima, en un minuto, descompone el 5 el sustrato 10
-3
N.
Calcular la Km, vmax y actividad especifica de la enzima.


5. Una enzima fue ensayada con una concentracin inicial de sustrato de 2 x 10
-5
N. En
6 minutos, la mitad del sustrato habia reaccionado. La Km para el sustrato es 5 x 10
-3
.
Calcular la k (constante cintica de primer orden), la vmax y la concentracin de
producto obtenido en 15 minutos.


6. Una enzima con una Km de 2,6 10
-3
N se ensay con una concentracin inicial de
sustrato de 0,3 N. La velocidad observada fue de 5,9 x 10
-5
N min
-1
. Si la
concentracin inicial de sustrato fuera 2 x 10
-5
N, ccual sera la concentracin de
producto tras 5 y 10 minutos?


7. La aspartato transaminasa cataliza la reaccin:
glutamato + oxalacetato -cetoglutarato + aspartato
El fosfato de piridoxal (PP) actua como coenzima en el proceso catalitico. Calcular la
Km para el complejo apoenzima-coenzima a partir de los siguientes datos obtenidos al
variar la concentracin de PP, mientras que las condiciones de glutamato y oxalacetato
se mantuvieron constantes:

Glutamato que
desaparece (mgfmin) 0.17 0.27 0.+3 0.65 0.73 0.78 0.79 0.81

PP Anadido (N) 0.30 0.50 1.0 2.0 3.0 +.0 5.0 10.0

8. La penicilina es hidrolizada y con ello inactivada por la penicilasa, una enzima
presente en algunas bacterias resistentes a la penicilina. El peso de este enzima en
Staphylococcus aureus es de 29.6 kDa. La cantidad de penicilina hidrolizada en un
minuto en una disolucin de 10 ml que contiene 10
-9
g de penicilasa purificada se midi
como funcin de la concentracin de penicilina. Suponiendo que la concentracin de
penicilina no cambia apreciablemente durante el ensayo, representar 1fv frente a 1f[S|
a partir de los siguientes datos:

[Penicilina| moles hidrolizadosfmin
0.1 x 10
-5
N 0.11 x 10
-9

0.3 x 10
-5
N 0.25 x 10
-9

0.5 x 10
-5
N 0.3+ x 10
-9

1 x 10
-5
N 0.+5 x 10
-9

3 x 10
-5
N 0.58 x 10
-9

5 x 10
-5
N 0.61 x 10
-9


cSigue la penicilasa una cintica de Nichaellis Nenten? Si es asi ccual es el valor de
Km?; ccual es el valor de vmax?; ccual es el numero de recambio de la penicilasa bajo
estas condiciones experimentales? (Hay que suponer un centro activo por molcula de
enzima).


9. El salicilato inhibe la accin catalitica de la glutamato deshidrogenasa. Determinar el
tipo de inhibicin mediante el analisis grafico de los siguientes datos. Suponer que la
concentracin de salicilato se mantiene constante y es de +0 mN. Calcular tambin la
Km para el sustrato y la Ki (constante de disociacin para el complejo enzima-
inhibidor).

[S| mN 1,5 2,0 3,0 +,0 8,0 16,0
mg Pfmin (sin salicilato) 0,21 0,25 0,28 0,33 0,++ 0,+0
mg Pfmin (con salicilato) 0,08 0,10 0,12 0,13 0,16 0,18


10. A partir de los siguientes datos de una reaccin enzimatica, determinar el tipo de
inhibicin, la Km del sustrato, y la Ki para el complejo enzima-inhibidor.

[S| mN 2.0 3.0 +.0 10.0 15.0
g Pfh (sin inhib.) 139 179 213 313 370
g Pfh (con inhib. 6mN) 88 121 1+9 257 313


11. Un microorganismo marino contiene una enzima que hidroliza la glucosa-6-sulfato.
El ensayo de deteccin se basa en la velocidad de formacin de glucosa. La enzima en
un extracto libre de clulas tiene una Km de 6,7 x 10
-+
N y una vmax de 300 nN min
-1
.
La galactosa-6-sulfato es un inhibidor competitivo. A una concentracin de glucosa-6-
fosfato 2 x 10
-5
N y galactosa-6-sultato 10
-5
N, la velocidad inicial es 1,5 nN min
-1
.
Calcular la Ki para la galactosa-6-sulfato.


12. cCual es el grado de inhibicin producido por un inhibidor competitivo cuando [S|
= Km y [!| = Ki?

Soluciones:


1. k = 2,31 s
-1
; t = 1,3s.
2. 1,1 x 10
1+

3. [S|fKm = +
4. Km = 1,020 x 10
-3
N; vmax = 1,01 x 10
-+
N min
-1
; a.e. = 1010,2 u.a.esp.
5. k = 0,1155 min
-1
; vmax = 5,775 10
-+
N min
-1
; [P| = 1,6+6 10
-5
N.
6. P(5min) = 2,2 10
-6
N; P(10min) = +,1 10
-6
N.
7. Km = 1,61 N
S. Km = 5,15 10
-6
min
-1
; vmax = 6,76 10
-10
molfmin; num. rec = 200 min
-1

9. !nh no competitiva; Km = 2,65 mN (sin !), Km = 2,65 mN (con !); vmax =
0,58 mgfmin (sin !), vmax = 0,22 mgfmin (con!); Ki = 2+,+ mN.
10. !nh. competitiva; Km = 5,13 mN; Ki = 7,5 mN.
11. Ki = 2,02 10
-6
N.
12. Grado inh. = 33