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I.

NTRODUCCIN

El conocimiento sobre los parmetros de extraccin nos permite optimizar la obtencin de colorantes de diverso origen. La caracterizacin de los colorantes se va ms hacia el conocimiento de las propiedades fsico- qumicas de estos compuestos, independientemente de la cantidad que se obtenga a partir del uso de una tecnologa apropiada. La caracterizacin de colorantes es una de las etapas importantes en el reconocimiento de aquellas caractersticas que debe cumplir un colorante de calidad. Por ello, la presente prctica tiene por finalidad ayudar al estudiante a reconocer las tcnicas ms adecuadas aplicadas a la verificacin de tales caractersticas. La cromatografa es usada para separar mezclas de sustancias en sus respectivos componentes. Todas las formas de cromatografa trabajan bajo el mismo principio. Hacer una capa fina con el papel cromatografito.

Color violeta azul verde amarillo naranja rojo

Longitud de onda ~ 380-450 nm ~ 450-495 nm ~ 495-570 nm ~ 570590 nm ~ 590620 nm ~ 620750 nm

II. OBJETIVOS

Identificar los colorantes por medio de espectrometra y cromatografa

III. MATERIALES

Espectrofotmetro Balanza analtica Vaso de precipitado Fiola Capilar de vidrio Placa cromatografica Regla Muestras de colorantes (bixina, carmn de cochinilla)

IV. PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL

Espectrometra Pesar 1mg de colorante carmn y bixina en una fiola de 100ml y enrasar con agua y etanol respectivamente, agitar asta homogenizar. Luego se hace otra dilucin de la misma dilucin de 5ml en 100ml de agua en caso de carmn y de la bixina una dilucin de 10ml en 100ml de alcohol. La muestra disuelta y sin burbujas de aire se pasa a una cubeta al espectrofotmetro para realizar la medicin de longitud de onda dependiendo del color a identificar. Se realiza tambin una medicin en blanco

Cromatografa Se preparan placas cromatografas utilizando como silicagel con una capa de espesor (0.25mm). Luego colocar las soluciones de colorante concentrado con una capilar de manera que el punto medio de la mancha este a 1.5cm del borde inferior y lateral. El eluyente (acetato de etilo/metanol/amoniaco25% agua destilada,60+18+5+12v/v) se pone en el vaso precipitado unos 30 min antes de iniciar la separacion hasta una altura de 0.5cm. Luego se coloca la placa en el vaso de precipitado y se deja que el eluyente avance por capilaridad hacia arriba atreves de la placa el recorrido optimo es de 10 cm se saca la placa se marca el frente del eluyente y se seca la placa. Para identificar cada mancha se determina el valor del factor de retencin (Rf) que es el cociente entre el recorrido de la sustancia y el del eluyente

V. RESULTADOS

a. mtodo del espectrofotmetro


1. Obtencin de espectros visibles para la Bixna:
Cuadro 01: longitud de onda vs absorbancia

Longitud de onda (nm) 650 645 640 635 630 625 620 615 610 605 600 595 590 585 580 575 570 565 560 555 550 545 540 535

Absorbancia (A) 0 0,033 0,032 0,031 0,032 0,035 0,038 0,033 0,031 0,032 0,034 0,033 0,036 0,04 0,046 0,047 0,04 0,042 0,04 0,04 0,034 0,036 0,03 0,026

530 525 520 515 510 505 500 495 490 485 480 475 470 465 460 456 455 454 450 445 440 435 430 425 420 415 410

0,016 0,001 0,041 0,046 0,138 0,197 0,241 0,259 0,257 0,253 0,259 0 0,311 0,309 0,315 0,308 0,295 0,262 0,241 0,221 0,21 0,196 0,168 0,137 0,114 0,094 0,072

grafica long. de onda vs absorbancia


0.4 0.35 0.3 0.25 0.2 0.15 0.1 0.05 0 -0.05 0 200 400 600 800 Linear (Absorbancia (A)) y = -0.001x + 0.6658 R = 0.46 Absorbancia (A)

2. Obtencin de espectros visibles para el cido Carmnico:


Cuadro.2 longitud de onda vs absorbancia de la cochinilla

longitud de onda(nm) 510 511 512 513 514 515 516 517 518 519 520

absorbancia 0,022 0,023 0,021 0,024 0,023 0,028 0,024 0,023 0,022 0,024 0,024

long. de onda vs absorbancia


0.03 0.025 0.02 0.015 0.01 0.005 0 505 510 515 520 525 Linear (absorbancia) y = 0.0001x - 0.0515 R = 0.0711 absorbancia

b. mtodo de cromatografa

Dnde: Rf = Factor de retencin Is = Recorrido de la sustancia Il = Recorrido del eluyente

1. Cromatografa para la Bixna: Eluyente = OH (alcohol) Is = 7.45 cm Il = 7.6cm

2. Cromatografa para el cido carmnico: Eluyente = OH (alcohol 96) Tiempo = 20 min Is =8.75 cm Il = 9.2cm

VI. DISCUCIONES

Segn http://www.unedcervera.com dice: En un rango de 450 a 500 nm de longitud de onda se presenta la mxima absorbancia de la bixna, colorante del achiote. En la prctica: La mayor absorbancia se da en un rango de longitud de onda de 460 nm, entre el valor obtenido y el valor terico podemos decir que: Para el valor prctico es 460 nm perteneciendo el color de azul (color absorbido) y naranja (color observado); y para el valor terico 450 a 500 nm pertenecera a un color azul o verde azulado (color absorbido) y con un color naranja o rojo (color observado), no habiendo diferencia alguna entre el valor terico y el valor prctico, pues el valor de la absorbancia prctica se encuentra dentro del rango terico.

Segn la tabla la mxima absorbancia de color violeta (observado) y verde amarillento (color absorbido) es de 520-550. En la prctica la mxima absorbancia se dio en 515 lo cual est fuera del rango esto puede implicar el lugar de procedencia de la cochinilla, el clima y por lo tanto varia su composicin del colorante.

Segn http://www.unedcervera.com dice: El valor del factor de retencin ideal en el mtodo de cromatografa es 0.5. En la prctica el factor de retencin de la bixna y del cido carmnico es 0.98 y 0.95 respectivamente, este alejamiento de resultados puede influir varios factores como el lugar de procedencia de los colorantes, el clima ,la poca de cosecha y por ende puede variar su composicin.

VII. CONCLUSIONES: Se ha llegado a identificar el colorante por espectrofotometra la mxima absorcin en bixina (460nm) y carmn (515nm) cromatografa obtenindose 0.98 y0.95 respectivamente.

VII. BIBLIOGRAFIA http://mazinger.sisib.uchile.cl/repositorio/ap/ciencias_quimicas_y_farmaceuticas /apquim-an-instr-7/c19a.html http://www.unedcervera.com/c3900038/quimica_ingenieria/cromatografia.html http://es.wikipedia.org/wiki/Cromatograf%C3%ADa_en_papel FAO/OMS expert Comite of Food Additives (1987). Caramel colours, en Toxicological Evaluation of Certain Food Aditives and Contaminants, 20, 99163. FAO/OMS Expert Commitee on Food Additives (1987). Curcumin and turmeric oleorresin, en Toxicological Evaluation of Certain Food Additives and Contaminants, 21, 73-79.

IX. CUESTIONARIO 1. Haga un listado de los colorantes ms empleados en la agroindustria indicando el color nombre comercial y su origen . E-100 Curcumina. Es el colorante de la crcuma, especia obtenida del rizoma de la planta del mismo nombre cultivada en la India. En tecnologa de alimentos se utiliza, adems del colorante parcialmente purificado, la especia completa y la oleorresina; en estos casos su efecto es tambin el de aromatizante. La especia es un componente fundamental del curry, al que confiere su color amarillo intenso caracterstico. Se utiliza tambin como colorante de mostazas, en preparados para sopas y caldos y en algunos productos crnicos. E-101 Riboblavina La riboflavina es una vitamina del grupo B, concretamente la denominada B2. Es la substancia que da color amarillo al suero de la leche, alimento que es la principal fuente de aporte, junto con el hgado. Industrialmente la riboflavina se obtiene por sntesisqumica o por mtodos biotecnolgicos. E-120, Cochinilla, cido carmnico El cido carmnico, una substancia qumica compleja, se encuentra presente en las hembras con cras de ciertos insectos de la familiaCoccidae , parsitos de algunas especies de cactus. Confiere a los alimentos a los que se aade un color rojo muy agradable, utilizndose en conservas vegetales y mermeladas (hasta 100 mg/kg), helados, productos crnicos y lcteos, como el yogur y el queso fresco (20 mg/Kg de producto)y bebidas, tanto alcohlicas como no alcohlicas. No se conocen efectos adversos para la salud producidos por este colorante.(Francis, 1987)

E-140 Clorofilas E-141 Complejos cpricos de clorofilas y clorofilinas Las clorofilas son los pigmentos responsables del color verde de las hojas de los vegetales y de los frutos inmaduros. El inters por la clorofila en tecnologa alimentaria no estriba tanto en su uso como aditivo sino en evitar que se degrade durante el procesado y almacenamiento la que est presente en forma natural en los alimentos de origen vegetal

E.150 Caramelo El caramelo es un material colorante de composicin compleja y qumicamente no bien definido, obtenido por calentamiento de un azcar comestible (sacarosa y otros) bien solo o bien mezclado con determinadas substancias qumicas. e-160 carotenoides E-160 a alfa, beta y gamma caroteno E-160 b bixina, norbixina (rocou, annato) E-160 c capsantina, capsorrubina E-160 d licopeno E-160 e beta-apo-8'-carotenal E-160 f Ester etlico del cido beta-apo-8'-carotenoico Los carotenoides y las xantofilas (E-161) son un amplio grupo de pigmentos vegetales y animales, del que forman parte ms de 450 sustancias diferentes, descubrindose otras nuevas con cierta frecuencia. Se ha calculado que la naturaleza fabrica cada ao alrededor de 100 millones de toneladas, distribuidas especialmente en las algas y en las partes verdes de los vegetales superiores. Alrededor del 10% de los diferentes carotenoides conocidos tiene actividad como vitamina A en mayor o menor extensin. Alrededor del 10% de los diferentes carotenoides conocidos tiene mayor o menor actividad como vitamina A. La bixina y la norbixina se obtienen de extractos de la planta conocida como bija, roccou o annato (Bixaorellana). Son compuestos algo diferentes qumicamente entre ellos, siendo la bixina soluble en las grasas e insoluble en agua y la norbixina a la inversa. Se han utilziado desde hace muchos aos para colorear productos lcteos, y su color amarillo puede aclararse por calentamiento, lo que facilita la obtencin del tono adecuado. La capsantina es el colorante tpico del pimiento rojo y del pimentn, siendo Espaa el principal productor mundial. Sus aplicaciones en la fabricacin de embutidos son de

sobra conocidas. El licopeno es el colorante rojo del tomate y los carotenos estn distribuidos muy ampliamente entre los vegetales, especialmente el beta-caroteno, que es tambin el colorante natural de la mantequilla. XANTOFILAS E-161 aFlavoxantina E-161 b Lutena E-161 c Criptoxantina E-161 d Rubixantina E-161 e Violoxantina E-161 fRodoxantina E-161 gCantaxantina Las xantofilas son derivados oxigenados de los carotenoides, usualmente sin ninguna actividad como vitamina A. La criptoxantina es una excepcin, ya que tiene una actividad como vitamina A algo superior a la mitad que la del beta-caroteno. Abundan en los vegetales, siendo responsables de sus coloraciones amarillas y anaranjadas, aunque muchas veces stas estn enmascaradas por el color verde de la clorofila. Tambin se encuentran las xantofilas en el reino animal, como pigmentos de la yema del huevo (lutena) o de la carne de salmn y concha de crustceos (cantaxantina). Esta ltima, cuando se encuentra en los crustceos, tiene a veces colores azulados o verdes al estar unida a una protena. El calentamiento rompe la unin, lo que explica el cambio de color que experimentan algunos crustceos al cocerlos. La cantaxantina utilizada como aditivo alimentario se obtiene usualmente por sntesis qumica. E-162 Rojo de remolacha, betanina, betalana Este colorante consiste en el extracto acuoso de la raz de la remolacha roja (Beta vulgaris ). Como tal extracto, es una mezcla muy compleja de la que an no se conocen todos sus componentes. A veces se deja fermentar el zumo de la remolacha para eliminar el azcar presente, pero tambin se utiliza sin ms modificacin, simplemente desecado. E-163 Antocianos Son un grupo amplio de substancias naturales, bastante complejas, formadas por un azcar unido a la estructura qumica directamente responsable del color. Son las substancias responsables de los colores rojos, azulados o violetas de la mayora de las frutas y flores. Usualmente cada vegetal tiene de 4 a 6 distintos, pero algunos tienen prcticamente uno solo (la zarzamora, por ejemplo) o hasta 15. No existe una relacin directa entre el parentesco filogentico de dos plantas y sus antocianas.

2. Haga un listado de colorantes de mxima absorbancia Violeta - 4.200 Angstrom Ail 4.200 4.400 Azul 4.400 4.800 Verde 4.800 5.700 Amarillo 5.700 5.900 Naranja 5.900 6.100 Rojo 6.100 -7.800

naturales indicando las longitudes de onda

X.-ANEXOS:

Longitud de onda de mxima absorban cia

Color absorbido

Color observado

380-420 Violeta

Amarillo verdoso Naranja Rojo Purpura Violeta Azul violceo Azul Verde azulado

420-440 Azul violceo Amarillo 440-470 Azul 470-500 Verde azulado Verde amarillento

500-520 Verde 520-550

550-580 Amarillo 580-620 Naranja 620-680 Rojo

680-780 Purpura Verde FUENTE:http://mazinger.sisib.uchile.cl/r epositorio/ap/ciencias_quimicas_y_far maceuticas/apquim-an-instr7/c19a.html.

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