PRCTICA :RECONOCIMIENTO DE PROTENAS

MATERIALES

Tubos de ensayo Gradilla Mechero Vasos de precipitados Pipetas

Solucin de HCl concentrado Alcohol etlico Solucin de SO4Cu al 1% NaOH al 20% Clara de huevo o leche Solucin de albmina al1-2%

1. COAGULACIN DE LAS PROTENAS FUNDAMENTO Las protenas debido al gran tamao de sus molculas forman con el agua soluciones coloidales que pueden precipitar formndose cogulos al ser calentadas a temperaturas superiores a 70C o al ser tratadas con soluciones salinas, cidos, alcohol, etc. La coagulacin de las protenas es un proceso irreversible y se debe a su desnaturalizacin por los agentes indicados que al actuar sobre la protena la desordenan por destruccin de sus estructuras secundaria y terciaria. PROCEDIMIENTO 1. Colocar en tres tubos de ensayo una pequea cantidad de clara de huevo (puede diluirse en un poco de agua para obtener una mezcla espesa) o 2-3ml de leche. 2. Calentar uno de los tubos al bao Mara, aadir a otro 2-3ml de HCl concentrado y al tercero 2 o 3ml de alcohol etlico. 3. Observar los resultados.

2. REACCIN BIURET FUNDAMENTO Entre las reacciones coloreadas especficas de las protenas, que sirven por tanto para su identificacin, destaca la reaccin del Biuret. Esta reaccin la producen los pptidos y las protenas, pero no los aminocidos ya que se debe a la presencia del enlace peptdico CO-NH que se destruye al liberarse los aminocidos. El reactivo del Biuret lleva sulfato de Cobre(II) y sosa, y el Cu, en un medio fuertemente alcalino, se coordina con los enlaces peptdicos formando un complejo de color violeta (Biuret) cuya intensidad de color depende de la concentracin de protenas.

PROCEDIMIENTO 1. Colocar en un tubo de ensayo 3ml de solucin de albmina al 1-2%. 2. Aadir 4-5 gotas de solucin de SO4Cu al 1%. 3. Aadir 3ml de solucin de NaOH al 20%. 4. Agitar para que se mezcle bien.

5. Observar los resultados.

CUESTIONES 1. Cmo se manifiesta la desnaturalizacin de la clara de huevo? 2. Cmo podramos saber que una sustancia desconocida es una protena? 3. Qu coloracin da la reaccin del Biuret? 4. Una protena coagulada podra dar la reaccin del Biuret?