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Universidad Tecnolgica de la Costa

Divisin en ciencias Agropecuarias


Agrobiotecnologia

Biotecnologa Bsica

Cultivo in vitro

Cultivo in vitro de plantas superiores


El cultivo en medio nutritivo, bajo condiciones estriles, de plantas, semillas, embriones, rganos, tejidos, clulas y protoplastos de plantas superiores
El trmino cultivo in vitro es un trmino muy genrico que se refiere ms bien a la metodologa usada que al propio objetivo de ese mtodo. En sentido estricto, in vitro quiere decir "dentro de vidrio", es decir, el cultivo de plantas o de alguna de sus partes (pero tambin de clulas y tejidos animales) dentro de recipientes de vidrio en condiciones de ambiente controlado. Existen otros trminos cuyo significado se solapa parcialmente con el significado de cultivo in vitro: Cultivo de tejidos vegetales: se refiere al cultivo in vitro de partes de la planta (tejidos o frecuentemente rganos) Micropropagacin: se usa para referirse a la utilizacin de las tcnicas de cultivo in vitro aplicadas a la propagacin vegetativa de plantas.

Cmara de flujo
La esterilidad de la zona de trabajo se consigue porque se hace circular a travs del interior de la cmara una corriente de aire que previamente ha sido microfiltrada para eliminar toda partcula extraa. Segn el grado de sofisticacin de la cmara, puede disponer de elementos accesorios como son: fuente de luz, lmpara de esterilizacin por U.V., pilotos indicadores de funcionamiento diversos, contador de horas de funcionamiento, indicador de presin interior. Existen dos tipos de cmaras de flujo laminar segn sea la forma en la que se hace circular el aire: cmaras de flujo horizontal y cmaras de flujo vertical. En las primeras el flujo se produce desde el fondo de la cmara hasta el frente, de forma que las partculas se mueven horizontalmente a la superficie de trabajo. En las segundas, el flujo se produce desde el techo hacia la superficie de trabajo de forma que las partculas se mueven perpendicularmente a ella.

Una cmara de cultivo es un receptculo diseado para permitir el control de algunas variables del ambiente fsico. Habitualmente se pueden controlar la temperatura, la iluminacin y el fotoperodo y en algunos casos, menos frecuentes, la humedad del aire y su composicin. Existen muchos modelos de cmaras de cultivo, en unos casos se trata de espacios reducidos, frecuentemente mviles, mientras que en otros casos son verdaderos recintos acondicionados para permitir el control del ambiente interior.

Cmaras de Cultivo

Control de la temperatura
La temperatura de la cmara de cultivo viene afectada por: la temperatura ambiente de la sala donde se site y el calor generado por las fuentes de luz de que dispone. El control de la temperatura a la que se desarrolla el cultivo in vitro se efecta mediante un sistema de refrigeracin-calefaccin controlado a travs de un termostato.
Para poder caracterizar adecuadamente el funcionamiento respecto de la temperatura de una cmara de cultivo conviene conocer: La homogeneidad de temperatura: es decir la variacin de la temperatura en diferentes zonas de la cmara. Se puede aumentar la homogeneidad haciendo circular el aire dentro de la cmara mediante un sistema de ventilacin La estabilidad de la temperatura: es decir, una medida de la variacin de la temperatura de la cmara de cultivo a lo largo del tiempo Todas las cmaras disponen de un programador que permite regular la temperatura a la que est la cmara en cada momento

Control lumnico
La luz es uno de los factores principales que determinan el desarrollo de los organismos auttrofos, en ello radica la importancia de controlar el factor luz en los cultivos in vitro. Los aspectos relacionados con la luz que son importantes en los cultivos in vitro son: La cantidad de luz: LA IRRADIACIN . La irradiancia puede ser expresada en funcin de la energa por unidad de superficie W/m2 La calidad de la luz: EL ESPECTRO Los tubos fluorescentes son las fuente de luz ms usada en las cmaras de cultivo. La alternancia de los ciclos de luz con los de oscuridad: EL FOTOPERODO. Algunos fenmenos propios del desarrollo de las plantas (germinacin, floracin, tuberizacin,...) pueden ser activados por el nmero de horas diarias de luz que recibe la planta. De forma anloga, el nmero de horas de luz que recibe el explanto cultivado in vitro puede afectar a su desarrollo. En general, el mejor fotoperiodo in vivo ser tambin el mejor fotoperiodo in vitro.

Biotecnologa Vegetal
Cultivo in vitro de clulas, tejidos y rganos micropropagacin mejoramiento de plantas produccin de compuestos de inters comercial produccin de metabolitos secundarios produccin de protenas produccin de polmeros biodegradables establecimiento de plantas transgnicas plantas resistentes a virus plantas con rutas metablicas modificadas plantas mejoradas en cuanto a composicin de protenas, aceites, etc. fitorremediacin remocin de xenobiticos remocin de metales pesados

Principales conceptos fisiolgicos aplicables a los cultivos in vitro

Existen tres conceptos bsicos que fundamentan el cultivo in vitro de clulas y tejidos vegetales:

- Totipotencialidad celular

- Desdiferenciacin / Rediferenciacin

- Balance de reguladores del crecimiento vegetal: hormonas vegetales

Fundamentos tericos y prcticos del cultivo de tejidos vegetales

La teora de la totipotencialidad celular, enunciada por Haberlandt a principios del siglo veinte, postula que toda clula vegetal individual es capaz de regenerar una planta entera a partir de un cultivo in vitro sin importar el grado de diferenciacin alcanzado. Para ello se requieren condiciones especficas referidas al medio del cultivo, relaciones hormonales, temperatura, fotoperodo, etc. La desdiferenciacin consiste en la transformacin y prdida de las caractersticas de especializacin de un tipo celular para dar lugar a clulas de tipo meristemtico. El siguiente paso involucrado en la regeneracin de una planta es la redifereciacin de las clulas previamente desdiferenciadas. Todo proceso de diferenciacin est regulado por el balance entre diferentes tipos de reguladores del crecimiento, fundamentalmente de auxinas y citocininas.

El material vegetal con el que se inicia un cultivo in vitro puede ser cualquier clula, tejido u rgano de la planta (explanto).

Tejidos somticos: de tallo, raz, hoja, meristemos Tejidos reproductores: anteras, polen, microesporas, vulos, semillas Las condiciones de cultivo pueden pretender la proliferacin desorganizada de las clulas del explanto hasta dar lugar a un callo o incluso a un cultivo de clulas cuando se separan stas del callo. Si se elimina la pared celular de las celulas se obtiene un cultivo de protoplastos.

Morfognesis: puede llevar a la regeneracin de la planta completa. La morfognesis se produce a partir del explanto inicial mediante la formacin de races y tallos en posicin normal o en posicin no normal (adventicias/os). Si la morfognesis se produce despus de la formacin de un callo, entonces se habla de morfognesis indirecta, mientras que si se produce directamente del explanto sin que este pase por una fase de callo, entonces se habla de morfognesis directa. Una situacin particular surge cuando en el explanto se producen unas estructuras bipolares que presentan las propiedades morfolgicas de los embriones zigticos. Estas estructuras se denominan embriones somticos. Segn que estos embriones somticos surjan directamente del explanto o bien de un callo se habla de embriognesis directa o indirecta, respectivamente.

Tcnicas del cultivo de clulas y tejidos vegetales

Micropropagacin vegetal Regeneracin de plantas (embriognesis y organognesis) Cultivo de meristemas Cultivo de suspensiones de clulas vegetales Cultivo de protoplastos Cultivo de anteras Cultivo de vulos y embriones

Medios de cultivo: composicin general

Compuestos inorgnicos Macronutrientes: NO4- , PO43- , K+, Ca2+, Mg2+, SO42Micronutrientes: Fe2+, Cu2+, Zn+, Mn2+, Mo2+, Co2+, ICarbohidratos Sacarosa, glucosa, mio-inositol Vitaminas Tiamina (B1) Piridoxina Acido nicotnico (C) Biotina Aminocidos Glicina

Reguladores del crecimiento Auxinas Citocininas Giberelinas Soporte inerte (medios semislidos) Agar (0,7 a 1%) Gelrite pH 5,6 5,8 Esterilizacin 1 atmsfera, 15 a 20 minutos en autoclave

Reguladores del crecimiento

Grupos bsicos de reguladores del crecimiento: - Auxinas - Citoquininas - Giberelinas - Acido abscsico - Etileno Generalidades: - Actan a bajas concentraciones - Interactan unos con otros (los resultados estn determinados por las concentraciones relativas entre las diferentes fitohormonas). - Los reguladores endgenos del crecimiento estn presentes en la planta durante todo su ciclo de vida pero su concentracin flucta. Su concentracin relativa vara en funcin del estado fisiolgico de la planta y en cada uno de los rganos de sta. - Estn involucrados en numerosos procesos fisiolgicos.

Auxinas: estos compuestos se emplean bsicamente como promotores de la proliferacin celular y la induccin de la morfognesis

OH N

Acido indol actico (AIA) (auxina endgena)

Las auxinas fueron descubiertas entre 1933 y 1935 a partir de bioensayos realizados para caracterizar el mensajero responsable de la elongacin y de la respuesta fototrpica del coleoptile de gramneas. - Alargamiento y divisin celular - Crecimiento de secciones de hojas, tallos y frutos - Formacin de races adventcias Se sintetizan en las yemas, hojas jvenes, frutos y en el embrin. La concentracin endgena en la planta vara entre 0,001 y 0,1 mg/Kg. Su transporte es polar Auxinas sintticas: - Acido indol butrico (IBA) - Acido naftalen actico (ANA) - 2,4-diclorofenoxiactico (2,4-D)

Citoquininas: en combinacin con las auxinas, determinan diferentes respuestas morfogenticas

Fueron descubiertas en 1955 estudiando sustancias promotoras de la divisin celular in vitro. Estn involucradas en variadas respuestas fisiolgicas: - Promocin de la divisin celular - Promocin de la organognesis (relacin auxinas/citoquininas) - Retardo de la senescencia - Sntesis de clorofila y desarrollo de cloroplastos Citoquininas endgenas: - Zeatina (Zea) - Isopenteniladenina (2iP) Citoquininas sintticas: - Kinetina (Kin) - Benziladenina (BAP) Se sintetizan en el embrin y las races; se encuentran en todos los tejidos. La concentracin endgena en plantas vara entre 0,1 y 500 g/Kg. Su transporte es no polar.

Estructura qumica de las principales citoquininas


CH3 H N CH2 CH C CH2OH

Zeatina

CH3 H N CH2 CH C CH3


Isopenteniladenina (IP)

H H N N C H N

6-bencilaminopurina

Las giberelinas se utilizan para favorecer el crecimiento y el alargamiento de los entrenudos de los brotes de novo

O Acido giberlico (GA3) HO H CH3 C O H H COOH CH3 OH

El cido giberlico (GA3) fue la primera giberelina identificada. En la actualidad se conocen alrededor de 50 diferentes giberelinas. Algunos efectos mediados por las giberelinas son:
- Promocin del crecimiento en plantas de genotipos enanos o plantas bianuales - Crecimiento de yemas latentes - Germinacin de semillas en dormicin - Floracin - Movilizacin de reservas en la semilla.

Se sintetizan en hojas jvenes, yemas y en el embrin. Su transporte no es polar.

Micropropagacin vegetal

Iniciacin
Eleccin y fitoacondicionamiento de la planta madre Eleccin del explanto inicial y de la formulacin del medio de cultivo Desinfeccin superficial de los explantos Establecimiento del cultivo in vitro

Tcnica alternativa para la multiplicacin clonal de especies, consiste en cultivar, in vitro, cualquier parte de una planta en un medio de cultivo artificial, previamente esterilizado, y bajo condiciones ambientales controladas. Bsicamente se trata de una multiplicacin masiva de individuos que a travs de su fragmentacin y posterior desarrollo, permitirn la formacin de plantas completas. Las plantas madres de las cuales se toman los primeros explantos (parte de la planta que se usa para la multiplicacin), deben ser sanas y poseer caractersticas varietales conformes con la variedad elegida. En poco tiempo se obtendr un elevado nmero de plantas sanas genticamente iguales a la planta madre.

Multiplicacin
Multiplicacin del material stock

Enraizamiento
Enraizamiento de los brotes obtenidos in vitro

Rusticacin
Pasaje de las plantas crecidas in vitro a las condiciones de maceta o a campo

FASE 0: PREPARACIN DE LA PLANTA MADRE


Para poder establecer el cultivo en condiciones de asepsia, se deben obtener explantos con un nivel nutricional y un grado de desarrollo adecuado. Para obtener estos explantos es recomendable mantener a las plantas madre un perodo de tiempo que puede oscilar entre unas semanas o varios meses, en un invernadero, en que se va a intentar cultivar la planta en condiciones sanitarias ptimas y con un control de la nutricin, del fotoperodo y de la irradiancia recibida

FASE I: ESTABLECIMIENTO DEL CULTIVO EN CONDICIONES DE ASEPSIA

Una vez escogida la planta madre, se extraern los fragmentos a partir de los cuales se obtendrn los explantos. Antes de extraer los explantos se har una desinfeccin de los fragmentos de planta madre para eliminar los contaminantes externos. Una vez desinfectado el material vegetal, se debe mantener en condiciones de asepsia. Ya en condiciones de asepsia (se trabajar en cabinas de flujo laminar) se extraern los explantos del material vegetal y se pondrn en cultivo en un medio de iniciacin dentro de un tubo de cultivo.

FASE II: MULTIPLICACIN DE LOS BROTES


Los nuevos brotes se deben subcultivar en un nuevo medio mediante divisiones y resiembras en tubos de cultivo u otros recipientes adecuados. Estas operaciones se realizan en la cmara de flujo laminar

FASE III: ELECCIN DE UN MEDIO DE ENRAIZAMIENTO DE LOS EXPLANTOS


Para enraizar los explantos se utilizan principalmente dos mtodos: ENRAIZAMIENTO IN VITRO Se transfieren los brotes obtenidos durante la fase de multiplicacin a un medio libre de reguladores de crecimiento o que solo contenga auxinas. Esta operacin se realiza en la cmara de flujo laminar y como la fuente de energa para enraizar est en el medio de cultivo no es necesario que tengan las hojas muy bien desarrolladas para realizar la fotosntesis.

ENRAIZAMIENTO EX VITRO Los explantos se deben transferir a un sustrato limpio, aunque no necesariamente estril, que puede ser una mezcla de turba con perlita o vermiculita. Con este mtodo es necesario que el medio de enraizamiento est libre de organismos patgenos y que los brotes tengan las hojas bien desarrolladas, ya que deben realizar fotosntesis para que la planta tenga una fuente de energa para enraizar y desarrollarse. Los explantos deben de plantarse en contenedores cubiertos por un plstico, para mantener la humedad relativa elevada, y hacerlos enraizar en el laboratorio, o ponerlos en 'multipots' dentro de un invernadero en un rea sombreada.

FASE IV: ACLIMATACIN DE LOS EXPLANTOS ENRAIZADOS


Tanto si los explantos fueron enraizados in vitro como ex vitro, estn poco adaptados a crecer en un invernadero, ya que estos explantos han enraizado y crecido en ambientes con una humedad relativa muy elevada y generalmente tienen estomas perezosos para responder al descenso de la humedad relativa, demasiado lentos para para evitar la desecacin del explanto. Por otra parte crecer en ambientes tan hmedos tambin suele implicar la falta de una cutcula crea bien desarrollada. Los explantos deben ser aclimatados a las condiciones de humedad del invernadero disminuyendo progresivamente la humedad relativa e incrementando progresivamente la intensidad de luz.

Embriognesis somtica
La embriognesis somtica, tambin denominada embriognesis asexual o adventicia, consiste en el desarrollo de embriones a partir de clulas que no son el producto de una fusin de gametos durante la fecundacin o, en otras palabras, es un proceso por el cual se produce una estructura bipolar (el embrin) a partir de una clula somtica. Este proceso se produce con cierta asiduidad en la naturaleza, ocurriendo de modo espontneo en ms de 60 familias de plantas, algunas tan importantes como las compuestas,crucferas, cucurbitceas, gramneas, rosceas, leguminosas y palm ceas. Es pues un proceso tan natural como la embriognesis cigtica, con casos tan conocidos como el de los ctricos, en los que ambos tipos de embriognesis, la somtica y la cigtica, ocurren casi simultneamente en el interior de la semilla.

Mediante cultivo in vitro, los primeros en obtener y desarrollar embriones somticos fueron Steward y Reinert en 1958 a partir de tejidos de zanahoria.1 A esta especie modelo para el estudio de la embriognesis somtica se han aadido hasta la fecha ms de 30 especies, algunas tan importantes como la alfalfa y varias leosas forestales, las cuales en la actualidadse propagan comercialmente mediante este mtodo. Se pueden obtener embriones somticos de muy diversas partes de la planta, as se pueden utilizar como explantos: pices radiculares y caulinares, hipoctilos, pecolos,pednculos, hojas jvenes y, en general, tejidos y rganos con caractersticas embrionarias, meristemticas o reproductivas (embriones e inflorescencias inmaduras, trozos deescutelo, nucela y endosperma, vulos, entre otros).

Yema
Para la parte del huevo, vase yema de huevo. Yema terminal de una ramilla de arce (Acer pseudoplatanus). En botnica, la yema es un rgano complejo de las plantas que se forma habitualmente en la axila de las hojas formado por unmeristemo apical, (clulas con capacidad de divisin), a modo de botn escamoso (catfilos) que darn lugar a hojas (foliferas) y flores (florferas). El color de las yemas sirve para identificar las especies: en Europa hay slo algunas especies de rboles con yemas de color verde.

Tipos de yemas
Las yemas pueden pueden ser clasificadas de la siguiente forma: por posicin:
terminal, cuando est ubicada en la punta de una ramilla; axilar, cuando est ubicada en la axila de una hoja (tambin denominadas laterales); adventicia, cuando ocurre en los dems lugares, por ejemplo en el tronco o en las races.

Clasificacin de yemas. por condicin:


accesorio, cuando una yema secundaria se forma aparte de la yema principal (axilar o terminal); inactiva o aletargada, cuando el crecimiento de la yema ha sido nulo durante un largo tiempo. Es posible que la yemas pasen de poco tiempo a aos inactivas; pseudoterminal, cuando una yema axilar reemplaza a una terminal (como sucede en la ramificacin simpodial). escamosa o recubierta, cuando escamas cubren y protegen las partes embrionarias; desnuda, cuando no est cubierta por escamas; vellosa, cuando est protegida por vellos. vegetativa, cuando slo contiene elementos vegetativos; reproductora, cuando contiene flor(es) embrionaria(s); mixta, si contiene hojas embrionarias y flores.

por morfologa:

por funcin:

Propagacin vegetativa a partir de yemas preexistentes

Proliferacin de yemas apicales o axilares


- Consiste en la multiplicacin de plantas a partir de las yemas axilares preexistentes. Representa la aceleracin in vitro del crecimiento natural de dichos meristemas. - La tasa de multiplicacin (t.m.) se calcula en base al nmero de brotes o vstagos obtenidos a partir de un explanto inicial, entre un repique y el sucesivo. Esta tasa puede variar entre 2 y 20 brotes por mes, dependiendo de la especie en cuestin, entre otras variables. - Por ejemplo, con una t.m. de 5/mes podran obtenerse 10.000.000 plantas en un solo ao, a partir de una nica yema inicial. - El cultivo de meristemas es un caso especial del uso de esta tcnica.

Existen dos posibles vas morfogenticas implicadas en la diferenciacin de novo de brotes y/o plantas completas

Posibles vas morfogenticas: - Organognesis - Embriognesis Diferencias entre las dos posibles vas:
- La organognesis es de origen pluricelular. Un grupo o cluster de clulas del explanto inicial se desdiferencia inicialmente para luego rediferenciarse dando lugar a un rgano vegetal. No se obtienen por esta va plantas completas. - La embriognesis se presupone de origen unicelular. Una clula del explanto se asla y constituye el punto de partida para la obtencin de un embrin somtico. Se diferencian embriones o estructuras bipolares que completan cada una de las etapas implicadas en la ontogenia de un embrin cigtico. El resultado es una planta completa.

Semillas artificiales
Se puede considerar como semilla artificial tanto a la semilla botnica cuyo embrin es obtenido in vitro, a partir del cultivo de tejidos; como tambin a los brotes originados por cultivo de meristemas, y que son utilizados en la propagacin comercial de plantas. El objetivo del desarrollo de semillas artificiales es producir plantas gentica y morfolgicamente tan similares como sea posible (clones) a la especie de la cual derivan.

La embriognesis de los embriones somticos comienza con una organizada divisin celular (histodiferenciacin), y pasan a travs de los mismos estados morfolgicos de desarrollo que el embrin cigtico: proembrin globular, trapezoidal, embrin cordiforme y torpedo. Una diferencia importante es que, mientras el embrin cigtico se nutre del tejido materno; el somtico recibe sus nutrientes directamente de un medio de cultivo. Por lo tanto, el embrin somtico al carecer de endosperma, presenta diferencias bioqumicas en relacin con las sustancias de reserva que acumula durante la etapa de maduracin (expansin celular). Por ejemplo, se acumulan menor cantidad de protenas de reserva, pero mayor cantidad de almidn. Adems, las estructuras que rodean al embrin cigtico le proveen de proteccin y controlan el intercambio gaseoso; mientras que el somtico debe ser encapsulado para facilitar su manipulacin y almacenamiento. Al mismo tiempo deben ser incorporados nutrientes, reguladores de crecimiento y fungicidas.

Se han obtenido embriones somticos en especies como: la alfalfa (Medicago sativa), soja (Glycine max), apio (Apium graveolens), pasto ovillo (Dactylis glomerata) y en las gimnospermas en especies de Picea. En el caso de cultivo de meristemas, cuyo inculo cultivado in vitro sufre cambios morfogenticos que evolucionan hacia una organognesis, se diferencia un brote con races adventicias, como en el caso del ajo (Allium sativum), la papa (Solanum tuberosum) y frutilla (Fragaria chiloensis).

Embriognesis: Obtencin de semillas artificiales


Semillas sintticas de orqudea obtenidas por encapsulacin en alginato

Sistemas de micropropagacin vegetal Proliferacin de tejidos desdiferenciados

Resulta posible regenerar brotes o yemas a partir de tejidos vegetales desdiferenciados in vitro

Consideraciones generales:
- Callo: masa de clulas desdiferenciadas obtenidas a partir de un explanto cultivado in vitro (disco de hoja, meristema, clulas en suspensin, etc.) - Es posible regenerar brotes o vstagos a partir de estos callos. - Las plantas diferenciadas pueden no ser uniformes, debido al posible desarrollo de variantes somaclonales. Esto debe tenerse en cuenta, especialmente cuando se trabaja en propagacin clonal a gran escala.

Sistemas de propagacin vegetativa in vitro

Propagacin vegetativa in vitro Regeneracin directa e indirecta

Sistemas de micropropagacin vegetal Cultivo de meristemas

Los meristemas son grupos de clulas indiferenciadas que retienen la capacidad de dividirse durante todo el ciclo de vida de una planta

Los meristemas determinan el crecimiento de la planta y dan origen a sus diferentes rganos

Posibilitan la micropropagacin de diferentes especies


vegetales. Constituyen el explanto ideal para liberar de patgenos in vitro a plantas infectadas por virus, hongos y/o bacterias. Son ampliamente utilizados como explantos para la criopreservacin y conservacin de germoplasma.

El cultivo de meristemas facilita la eliminacin de patgenos

- El domo meristemtico no est vascularizado (muchos patgenos se translocan por los tejidos de conduccin).

- El nmero de partculas virales es menor en los meristemas que en otros tejidos (White, 1934).

- La velocidad de divisin celular a nivel del meristema es mayor que la velocidad de replicacin de un virus.

- Las primeras plantas saneadas a partir del cultivo de meristemas fueron obtenidas por Morel y Martin entre 1952 y 1957 a partir de cultivos de papa y Dahlia.

Alcances de la micropropagacin vegetal

Propagacin vegetativa rpida y a gran escala Uniformidad seleccionada del material clonado Multiplicacin de plantas recalcitrantes a las tcnicas convencionales Reduccin en el tiempo de multiplicacin y en el espacio requerido para tal fin Mayor control sobre la sanidad del material propagado Introduccin rpida de nuevos cultivares Conservacin de germoplasma Facilidades para el intercambio internacional de material vegetal

Sistemas de transferencia gentica en plantas

Sistemas de transformacin gentica en plantas

Sistemas de transferencia de ADN basados en vectores biolgicos


- Sistemas basados en Agrobacterium tumefaciens
y Agrobacterium rhizogenes. - Sistemas basados en virus vegetales.

Sistemas de transferencia directa de ADN


- Transferencia por biobalstica. - Transferencia mediada por cationes divalentes y/o electroporacin - Transferencia por microinyeccin.

Potencial econmico de los metabolitos secundarios

Cultivo de tejidos y metabolismo secundario

Concepto general

El metabolismo secundario regula muchas de las relaciones de la planta con el medio circundante

La produccin de metabolitos secundarios est estrechamente relacionada con el proceso de desarrollo de la planta.
- Generalmente no est asociada al crecimiento. - Depende de condiciones determinadas de control hormonal. - Es paralela al desarrollo de tejidos especializados y rganos (races, tallos, hojas y glndulas). - La biosntesis y acumulacin suele estar fuertemente compartimentalizada a nivel intracelular, celular, de tejidos y de rganos.

Los metabolitos secundarios se producen ante situaciones de estrs o enfermedad.


- Factores biticos - Factores abiticos

Las plantas como fuente de metabolitos secundarios de inters comercial

- Insecticidas - Saborizantes - Colorantes

- Fragancias - Antimicrobianos - Enzimas

- Medicinas - Herbicidas - Proteasas

Potencial
- 75 % de las nuevas estructuras qumicas descubiertas provienen de las plantas. - Slo se tiene buen conocimiento de 5.000 de las 250.000-300.000 especies vegetales que se creen existentes en el planeta. - 25 % de los medicamentos de las industrias farmacuticas son de origen vegetal. - 75 % de la poblacin mundial utiliza la medicina tradicional que consiste principalmente en el uso de extractos provenientes de plantas.

Algunas de las medicinas ms importantes o sus precursores derivados de plantas y sus ventas en el 2002
Nombre Tipo Origen Uso teraputico Alcaloides: ventas proyectadas para el 2002: 4045 millones US$ Hiosciamina, Alcaloides del tropano Solanaceas Anticolinrgicos escopolamina Camptotecina Alcaloide indlico Camptotheca Antineoplsico acuminata Capsaicina Alcaloide fenilalquilamino Capsicum spp. Analgsico local Codena, morfina Alcaloide opiceo Papaver somniferum Analgsico Colchicina Alcaloide isoquinolinico Colchicum autumnale Antigota Galantamina Alcaloide isoquinolinico Leucojum aestivum Inhibidor coliesterasa Pilocarpina Alcaloide imidazlico Pilocarpus jaborandi Colinrgico Nicotina Alcaloide pirrolidnico Nicotiana spp. Terapia antitabaco Quinina Alcaloide quinolnico Cinchona spp. Antimalrico Quinidina Alcaloide quinolnico Cinchona spp. Cardiotnico Reserpina Alcaloide indlico Rauwfolia serpentina Antihipertensivo, psicotrpico Vinblastina, Alcaloide indlico Catharanthus roseus Antineoplsico vincristina Yohimbina Alcaloide indlico Apocynaceae, Afrodisaco Rubiaceae Terpenos y esteroides: ventas proyectadas para el 2002: 12400 millones US$ Artemisinina Lactona sesquiterpnica Artemisia annua Antimalrico Diosgenina, Esteroides Dioscorea spp. Hormonas esteroidales Taxol Diterpenos Taxus brevifolia Glicsidos: ventas proyectadas para el 2002: 9230 millones US$ Digoxina, digitoxina Glicsidos esteroidales Digitalis spp. Cardiotnico Sennsidos A y B Antracenos Cassia angustifolia Laxante Otros: ventas proyectadas para el 2002: 5014 millones US$ Ipecac Mezcla de alcaloides de Cephaelis Emtico ipecacuana ipecacuanha Podophyllotoxina Lignanos Podophyllum peltatum Antineoplsico

Produccin de metabolitos secundarios por cultivo in vitro de clulas y rganos vegetales: por qu?

- Independizarse de factores externos tales como: cambios de temperatura, sequas, plagas, variabilidad de la produccin, factores polticos y sociales, etc. - Evitar la extincin de especies vegetales. - Disponer de condiciones controladas en el proceso de produccin y extraccin. - Posibilitar el mejoramiento vegetal en tiempos mas cortos. - Hacer viable la produccin de compuestos complejos con uno o ms C quirales en forma ms econmica respecto de la sntesis qumica - Posibilitar la obtencin de nuevos compuestos no presentes en la planta madre. - Establecer procesos de biotransformacin slo realizables por enzimas provenientes de plantas.