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3.- Oxidacin del isocitrato a -cetoglutarato y CO. En este paso la isocitrato deshidrogenasa cataliza a la descarboxilacin oxidativa del isocitrato dando lugar a la formacin de -cetoglutarato. El Mn del sitio activo interacciona con el grupo carbonilo del intermediario oxalosuccionato, que se forma sin dejar el sitio de unin hasta que la descarboxilacin lo convierte en -cetoglutarato.
5.- La enzima que cataliza esta reaccin reversible se conoce como succinil-CoA sintetasa, indica la participacin de un nuclesido trifosfato en la reaccin
6.- Oxidacin del succinato a fumarato: El succionato formado a partir del succinil-CoA es oxidado a fumarato por la flavoprotena succinato deshidrogenasa
7.- Hidratacin del fumarato a malato: La hidratacin reversible del fumarato a Lmalato est catalizada por la fumarasa formalmente fumarato hidratasa.
Reaccin 8: Malato deshidrogenasa (De L-malato a oxalacetato) La ltima reaccin del ciclo de Krebs consiste en la oxidacin del malato a oxalacetato. La reaccin, catalizada por la malato deshidrogenasa, utiliza otra molcula de NAD+ como aceptor de hidrgeno, produciendo NADH. La energa libre de Gibbs asociada con esta ltima reaccin es decididamente positiva, a diferencia de las otras del ciclo. La actividad de la enzima es remolcada por el consumo de oxalacetato por parte de la citrato sintasa, y de NADH por parte de la cadena de transporte de electrones.