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micropropagación de orquideas

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TENDENCIAS ACTUALES ASERCA DE LA MICROPROPAGACION IN VITRO EN ORQUIDEAS. Chrystian Jareth Saavedra Santos. Biotecnología Vegetal.

Licenciatura de Ingeniero Biotecnologo. Universidad Autónoma de Chiapas. Campus IV. c.j.s.s_8@hotmail.com Palabras clave: Medio MS, micropropagación, se llaman epífitas (SCO, 1965). Por otro lado, aquellas orquídeas que se desarrollan a nivel de suelo, en este caso el pseudobulbo se ha modificado y las raíces cumplen la función de almacenamiento, estas orquídeas se llaman terrestres. Existen otras que se llaman litófitas las cuales crecen sobre rocas (SCO, 1965). A partir del tipo de crecimiento que presente una orquídea se clasifican en monopodial y simpodial; las primeras crecen de manera erguida cuyo tallo no se ramifica, al cual se insertan las hojas y no presentan pseudobulbos; las segundas presentan un rizoma que crece de forma horizontal, del cual surgen pseudobulbos con crecimiento vertical y a medida que crece el rizoma surgen nuevos pseudobulbos que dan origen a otra planta y por último, las orquídeas que crecen a lo largo y hacia arriba sosteniéndose de un tutor, tal crecimiento es trepador, probablemente se puede considerar un cuarto caso y es el rastrero tal crecimiento se da a nivel del suelo (SCO, 1965). Descripción morfológica de las orquídeas Las orquídeas se consideran como la familia más evolucionada dentro del reino vegetal, ya que presentan una gran complejidad y especialización en su morfología floral y en sus tipos de polinización. Asimismo existen dentro de la familia muy diversas formas de vida y desde el punto de vista ecológico muchos de sus integrantes son componentes importantes en diversos tipos de vegetación (Espejo, 2002). La característica principal de las raíces de orquídeas es que presentan alrededor de la raíz auténtica una capa de tejido esponjoso llamado velamen, que se desarrolla en las especies terrestres, epífitas o litófilas (Gil, 2007).

Introducción. México cuenta con una gran variedad de orquídeas. Las especies de esta familia, en extremo hermosas, extrañas y frágiles, se caracterizan por una difícil domesticación, resultado del fuerte arraigo hacia sus entornos. Las Orquidáceas son indicadoras del equilibrio entre el desarrollo de la civilización y el respeto a la naturaleza, pues la alteración de un nicho ecológico suele significar, desde la pérdida de una gran cantidad de estas plantas, hasta la desaparición de especies endémicas (Sarmiento, 2000). Las orquídeas constituyen un punto importante dentro de la realeza en el mundo de las plantas ornamentales. Se trata de una de las especies más mimadas y ocupan las primeras posiciones entre todas las plantas con flores por su valor en la producción de flor de corte, alcanzando un precio muy alto en el mercado internacional (Winkelmann et al., 2006). Cuando la utilidad de un recurso biótico es regida por sus características biológicas y por el entorno cultural, es importante emprender estrategias para su conservación; en particular, si son endémicos de nuestro país, ello requiere cuidado especial al ser estos organismos sometidos a colectas intensivas de individuos silvestres y a la perturbación del hábitat (Santos et al., 2006). Hábitat de desarrollo y tipo de crecimiento De acuerdo al lugar de desarrollo de una orquídea se determina su hábitat. Por tanto, aquellas orquídeas que se desarrollan únicamente sobre ramas y troncos de los árboles sin penetrarlos (sólo cumpliendo la función de soporte) y cuyo alimento lo obtienen del aire, agua de lluvia y desechos de la corteza del árbol,

tipo bulbo. en el interior se encuentran las estructuras reproductivas de la orquídea (antera y pistilo) que se han unido en una estructura cerosa llamada columna o ginandrio (Gil. verticales o pseudobulbos. en forma de roseta y solitarias variando en número (Gil. Las orquídeas monopoidales poseen un tallo con un eje que continua ininterrumpidamente su crecimiento terminal y produce hojas a medida que crece. 2004). 1965). El labelo. 2007) Las orquídeas presentan dos tipos de tallo: monopodial y simpodial. . ello se debe principalmente a su clima y hábitos característicos en su medio natural (SCO. 1965).Las raíces son de color gris a blanco. se distinguen dos tipos de ejes: un rizoma rastrero u horizontal que a intervalos tiene callos carnosos. 2004). 1993). claviforme y fusiforme (Gil. el cual presenta modificaciones en color y forma. aunque las hay en una variadísima gama de formas. Dentro de la flor los granos de polen se aglutinan en pequeños paquetes llamados polinias. Varían mucho en tamaño y consistencia. Pese a la gran variedad de flores en la familia. sésiles o pediceladas. 1993). hojas y flores (Soto. En las orquídeas simpodiales. paralelinerves. raíces aéreas (Gil. después de la producción de cierto número de 4 hojas. Por su colocación pueden ser alterna helicoidal. en las axilas de las hojas. Las modificaciones y tipos de raíces que pueden presentarse en las orquídeas son: fibrosas. 2007). ya que es el encargado de atraer a los agentes polinizadores (Gil. alargadas y generalmente persistentes. 2007) La orquídea tiene como regla general un aspecto herbáceo. 1965). todas tienen su diagrama floral idéntico consistente en: un labelo. 2007). una yema vegetativa comienza a crecer en la base del pseudobulbo formando nuevamente un rizoma postrado. La flor de orquídea es un tipo especial de flor irregular que tiene simetría bilateral (zigomorfa). Los pseudobulbos pueden tener formas muy variables de acuerdo a su género y/o especie siendo las más comunes: globoso. carnosas sin rizoma. de mayor tamaño y vistosidad. ovoide. con pseudobulbo. 2004). Cortando la flor en cualquier otro plano resultaría en dos trozos irregulares (Larson. opuestas y en algunos casos sólo presentan una hoja verdadera. mientras que en condiciones de laboratorio tienen que ser germinadas asépticamente con abastecimiento de todas las sustancias químicas para su nutrición contenidas en un medio de germinación (Larson. se desarrollan en forma periódica las flores (Soto. esto es tres pétalos y dos pétalos laterales. lo cual cumple con la función de realizar parte de la fotosíntesis de la planta. éste es un pétalo modificado. insertadas a lo largo del pseudobulbo. Las hojas de las orquídeas son las que más carácter herbáceo presenta de todas las plantas. cilíndrico y segmentado. 2007). Se puede cortar solamente en un plano y se dividirá en dos mitades iguales. con hojas y flores terminales. Las flores de orquídea producen copiosas cantidades de semillas. Como no contienen endospermo. por tanto el número de éstos y su disposición dentro de la flor pueden ser utilizados para la identificación de la misma. pudiendo ser simples. presentando un ápice meristemático que absorbe la humedad y las pequeñas cantidades de nutrimentos que la planta necesita. Estas son hermafroditas. no pueden germinar en estado silvestre sin ayuda de algún hongo. oblongo. el número de polinias depende de la especie . tres sépalos. mientras que Laelia tiene ocho (Larson. Las hojas pueden ser terminales. Este ápice tiene una coloración verde. o termina con la producción de inflorescencias. dichas semillas carecen de endospermo y con frecuencia se les llama semillas desnudas. Después de la floración. Cattleya tiene cuatro. órganos sexuales fusionados formando una columna y ovario ínfero (SCO. tuberosas. es decir. por ejemplo. Los tallos verticales de las orquídeas simpodiales tienen crecimiento determinado. Una sola vaina puede contener entre 500 000 y un millón de semillas diminutas. carnosas con rizoma. Las flores de las orquídeas tienen una alta variabilidad puesto que han evolucionado en función de facilitar la fecundación. se detiene abruptamente el crecimiento. Como todas las monocotiledóneas las nervaduras en la hoja se distribuyen paralelas entre sí a lo largo de ella (SCO.

2007). En el Cuadro 2 se dan algunos ejemplos por géneros de intervalos de intensidad luminosa. En ambos casos se retrasa el crecimiento y se reduce o evita la floración.). elípticas. se debe regular adecuadamente humedad.5 a 5 cm de diámetro y de 0.5 hasta casi 15 cm de largo dependiendo del género y la especie (Sheehan. del mismo tipo de la vainilla (Vanilla spp. Las orquídeas. impidiendo el desarrollo y anulando la floración. La cantidad de luz que los diferentes géneros de orquídeas pueden tolerar. Demasiada luz decolora el verde de las hojas tornándolas amarillentas y dificultando su crecimiento. En el Cuadro 1 se presentan las temperaturas óptimas para algunos tipos de orquídeas. por lo contrario la poca luz da a las hojas un tono verde obscuro. cuando ésta sube demasiado. De acuerdo con los conocedores. sin lesionarse. 1994). sin lesionar la planta. cilíndricas o piriformes. por lo que es muy importante el constante movimiento del aire dentro del invernadero. La cantidad correcta de luz produce una coloración verde lechuga generando una superficie brillosa. La humedad relativa debe ser de 70%. la humedad ambiental para el cultivo de orquídeas debe aumentarse en la estación estival y disminuirse en la invernal. como consecuencia de la falta de humedad en el ambiente o por las altas temperaturas. es observando sus características. 2004). Comúnmente las cápsulas son de formas ovoides. dependiendo. anchas y finas necesita más sombra. Requerimientos climáticos El cultivo de las orquídeas se desarrolla en gran variedad de climas y condiciones ambientales. pueden medir de 0. como antes se dijo.El fruto de las orquídeas es una cápsula cuadro 1 dehiscente aunque en algunos casos puede ser una vaina. siendo importante considerar la etapa de crecimiento de la planta (Murguía. intermedio y cálido. en términos generales. Una orquídea requiere la máxima cantidad de luz. 2004). puede ocurrir mayor concentración de sales en las partes donde se realiza la fotosíntesis y quedar disminuida esta función (Salisbury y Ross. Por regla general. en los brotes nuevos y la planta florece regularmente (Gil. El cultivo de las orquídeas en invernadero. se pueden dividir en tres categorías: de clima frío. luminosidad y temperatura. se favorece el desarrollo de enfermedades fungosas en las flores. varía grandemente. la cual es necesaria para que ésta crezca y se desarrolle bien. una manera de saber cuánta luz darle a nuestras plantas. Diversos son los factores a considerar en la conservación de las orquídeas y sin duda la determinación de parámetros de intensidad luminosa es un elemento considerar dependiendo el género. 2007). ya que estas variaciones se presentan en la naturaleza (Gil. . si tiene hojas duras y carnosas necesita más luz y si sus hojas son blandas. que se logra mediante ventiladores . Las diferentes especies de orquídeas tienen requerimientos climáticos distintos y lo mejor para lograr éxito en su cultivo es el estudio perseverante de las necesidades en particular (FUNPROVER. de necesidades particulares de cultivo. Las orquídeas requieren temperaturas diurnas de 13 a 32 °C y temperaturas nocturnas de 10 a 21 °C. 1994). Cuando la transpiración es intensa. 2004). según donde crecen en su estado natural (Murguía.

C. mendellii. libres. lueddmanniana. cubiertos por brácteas papiráceas basales caducas. skinneri. . Dentro de este grupo se puede encontrar entre otros a C. verdes al inicio formando un velamen de varias capas. el cual en 1818 recibió unos musgos y líquenes provenientes de Brasil que venían envueltos en unas hojas de lo que hoy se conoce como Cattleya labiata. Epidendrum. En el mundo se encuentran cerca de 65 especies diferentes (Kuan y González. maxima (Horich. Son plantas perennes con rizoma corto cubierto por brácteas apergaminadas y caducas. C.Las orquídeas son de lento crecimiento y con periodos largos de descanso. obtusas. generalmente con pocas flores. Las cattleyas son originarias de las alturas medias de América Central y Sur América. 1986). ocurriendo un máximo de dos floraciones al año. C. Las hojas pueden ser lanceoladas o elípticas. Las especies más representativas de este tipo son C. racemosa. 1980). los cuales constituyen una defensa contra la sequía periódica. grandes y llamativas. bicolor y C. muy diferentes al tipo labiata(Horich. que se mantienen por 1 a 4 semanas. 1980). una de las cuales es la Subtribu Laeliinae. que incluye el género Cattleya y a sus parientes (Brassavola. cilíndricos o fusiformes. 1993). Los híbridos entre estos dos grupos han producido flores donde se combinan las mejores características de ambas (Kuan y González. El requerimiento de luz de éstas cattleyas es mayor que el de la bifoliadas (Kuan y González. percivaliana. que tienen una sola hoja que sale del ápice del seudobulbo. El otro grupo es el de las bifoliadas. C. sobre todo aquellas que viven sobre los árboles. El género Cattleya La Familia Orchidaceae se divide en seis Subfamilias. C.. C. esta es terminal. sésiles y con venación conduplicada. C. schroederae. C. lisas.mossaie. Los sépalos son iguales. tiene flores pequeñas (en racimos de veinte o más flores) pero frecuentemente de más intenso y variado color que las unifoliadas. 2007). Los pétalos son semejantes a los sépalos aunque generalmente más anchos. C luteola. porque tienen dos y algunas veces tres hojas. C. 1993) Las especies de este género se han dividido en dos grupos: las cattleyas labiatas o unifoliadas (generalmente de Sur América). En el caso de cattleyas con inflorescencia. Ecología y descripción La mayoría de este grupo crecen como epífitas en el lindero de los bosques o en la copa de los árboles. siendo la primera cattleya en descubrirse (Horich. Las cattleyas bifoliadas (Centroamérica). Las raíces son cilíndricas. 1980). además de tener mejor textura. sus flores son grandes y de pétalos anchos y vistosos. lawranceana. además las orquídeas tienen la dificultad para captar agua y nutrientes . Encyclia. Sophronitis. subtendida por una bráctea espatácea. grisáceo o blanco verdoso en la madurez Los seudobulbos son redondeados. 1995) El nombre del género Cattleya se dio en honor al botánico y horticultor inglés William Cattley. estas plantas tienen bajos requerimientos nutrimentales y su fertilización es relativamente sencilla (Gil. 1993). Laelia. resupinadas. Normalmente producen dos o tres flores. C. y una de las más importantes es la Epidendroideae ya que es la más evolucionada (derivada) y además comprende al 90% de las especies de las orquídeas americanas. Las flores poseen un ovario pedicelado y cilíndrico. El señor Cattley cultivó las hojas hasta obtener floración. trianaei. patentes o ligeramente reflexos. etc) (García. donde reciben luz fuerte pero indirecta (Kuan y González. warnerii. Dentro de Epidendroideae existen varias tribus y subtribus. por ello. (Rodríguez et al. C. 1993). warscewiczii. dowiana. Rhyncholaelia. Schomburgkia. coriáceas o carnosas. gaskelliana.

es decir una porción de planta (tejido. elíptico-ovados. 1980). esto es deseable para el establecimiento de métodos in vitro para la rápida y larga escala de propagación (Pedroza y Mican. crecimiento y conservación de especies de orquídeas y de híbridos (Yoneo. 2008). 1991). propagación. 2006). Los resultados han sido logrados con una gran variedad de orquídeas. entonces cada especie y género requiere una diferente composición de medio y condiciones de cultivo para su crecimiento (Hahn y Paek. Los lóbulos laterales envuelven la columna. las cattleyas necesitan luz abundante pero no directa entre 2000 y 3000 pies bujía. en otras son continuos. La columna es fuerte. En los siguientes años. de forma moderna comienza en 1949. La luz acelera el proceso de crecimiento de la planta para que esta luego florezca bien (Horich. simple o trilobulado. En algunas especies los lóbulos laterales y el medio son totalmente diferentes. La antera es terminal. El estigma es entero (Rodríguez et al.El labelo es sésil. 1996). 2001).células o parte de una masa callosa) tomada para el cultivo in vitro. ligeramente arqueada. libre o ligeramente adnato a la base de la columna. operculada de dos celdas. paralelos y ligeramente comprimidos. con un nuevo (cultivo de tejidos o in vitro) simple y práctico método de propagación vegetativa (clonal) de Phalaenopsis (orquídea) que fue desarrollado en la Universidad de Cornell (Arditti. formulado para la germinación asimbiótica de semillas de orquídeas por Lewis Knudson. Los polinios son 4. Desde que Knudson desarrolló un método de cultivo in vitro asimbiótico para la germinación de semillas de orquídeas. micropropagación o cultivo in vitro es una técnica de cultivo artificial que permite producir organismos similares a partir de un explante . con caudículas prominentes. El medio nutritivo utilizado para este cultivo fue el Knudson C (KC). 1898) y la primera obtención de callo (tejido vegetal que se divide activamente en el cultivo de tejidos) (Rechinger. En cuanto a requerimientos comerciales y conservación de especies en peligro de extinción. céreos. 1996). 1986). 1893). cada una de ellas divididas por unsepto longitudinal. REPRODUCCIÓN in vitro Antecedentes de la reproducción in vitro de orquídeas La micropropagación de orquídeas. dando origen al desarrollo del primer caldo o medio nutritivo (González. este último es considerado actualmente una autoridad en procedimientos y componentes del medio estéril para un gran número de cultivos hortícolas. terminada en tres dientes. Murashige. 2008). incumbente. Profesor de Fisiología de Plantas de la Universidad de Cornell (Arditti. Para florecer bien. estudios sobre polaridad de las plantas (Vochting. el cultivo de tejido (in vitro) tuvo un papel importante y significativo en el cultivo. . Esta técnica nació hace cerca de 150 años cuando Saks y Knop (en 1860 y 1861) observaron que los principales nutrientes de las plantas superiores eran sustancias inorgánicas y no orgánicas como se creía desde la época de los griegos. cilíndrica o subclaviforme. la mayoría focalizado en una nutrición inorgánica y con el uso de reguladores de crecimiento. en 1902 el fisiólogo y botánico alemán Haberland propone por primera vez el cultivo de células vegetales in vitro desarrollando más adelante la teoría de “totipotencialida” razón por la cual se le considera el padre del cultivo de tejidos (González. Más tarde. órgano. Skoog y T. La solución Knudson C todavía se utiliza para la germinación de semillas de orquídeas y en la micropropagación de algunas orquídeas. Los pioneros en el trabajo de micropropagación fueron F. propiciaron que muchos fisiólogos vegetales iniciaran estudios de lo que se llamaría posteriormente “totipotencialidad”. bajo condiciones controladas. Reproducción in vitro El cultivo de tejidos. Las técnicas de cultivo in vitro tienen que ser exitosamente adaptada para la propagación masiva de plantas de orquídeas.

Incremento acelerado del número de plantas derivadas por genotipo b. de la relación simbiótica con un hongo. 1977) encontró que era útil destacar la secuencia de eventos asociados con la multiplicación de plantas mediante las técnicas de cultivo aséptico. es posible sustituir la acción del hongo por un medio nutritivo. Etapa III. Las plantas que vienen de un mismo meristemo. cualquiera que sea su especialización. entre ellas se puede citar: a. A esta notable capacidad de la célula vegetal. En este caso los brotes o meristemos se forman in vitro (brotes adventicios o de novo)  a partir de un embrión somático formado a partir de tejido somático (embriogénesis somática) (Abdelnour y Vincent. La introducción de un método de germinación de semillas por Knudson (1946) y el cultivo de un fragmento de vástago por Morel (1960) ha ayudado en el desarrollo de métodos para la propagación de orquídeas (Sheelavantmath. posee un núcleo que es capaz de reproducir las características de la planta de la cual proviene. . el riesgo de tener “variantes” fenotípícas o genéticas es bajo. Posibilidad de multiplicar grandes cantidades de plantas en una superficie reducida.e. Posibilidad de multiplicar rápidamente una variedad de la cual sólo existan pocos individuos (Villalobos y Thorpe. 1994). 2007). Ha esta germinación se denomina asimbiótica (Gil. multiplicación de brotes o multiplicación de plantas. 2000). La obtención de una planta entera puede ocurrir a través de 3 vías diferentes:  a partir de brotes. la germinación y el subsiguiente desarrollo de la planta. 1991b). a partir de un brote o meristemo iniciado dentro de un callo o directamente sobre el explante inicial. Iniciación o establecimiento (se establece el cultivo inicial o primario) Etapa II. con menos restricciones aduaneras. tiene como objetivo producir una planta autotrófica que pueda sobrevivir en las condiciones del transplante al suelo (Krikorian. primordio. La micropropagación presenta importantes ventajas sobre los métodos tradicionales de propagación. el cultivo in vitro debe toda su Extensión. meristemo y embriones pre-existentes en el “explante” utilizado. Reducción del tiempo de multiplicación c. o estaca son llamadas “clones” (Krikorian. Murashige (1974. Etapa inicial.Toda célula vegetal viva. Debido a que la micropropagación se refiere a un fenómeno de reproducción asexual. dependen en la naturaleza. Micropropagación de orquídeas Reproducción a partir de semillas  Debido a que las semillas de orquídeas son muy pequeñas y contienen poca o nula reserva alimenticia. ápice. pueden considerarse otras dos etapas como parte integral del procedimiento: Etapa IV: Transferencia final a la etapa de medio ambiente Etapa 0. a bajos costos y en un tiempo económicamente costeable. Mayor control sobre la sanidad del material que se propaga . d. 1991). sin embargo. que comprende la selección de la planta madre y la selección de una modalidad de pretratamiento para volver funcional la estrategia que se adopte (Krikorian. Sin embargo eso puede suceder cuando no se domina el proceso in vitro. de la siguiente manera: Etapa I. f. Corresponde al enraizamiento o etapa de pretransplante. 1991b). Además de las anteriores. 1991b). Facilidad para transportar el material in vitro de un país a otro.

De hecho. En la reproducción a partir de meristemos se extraen células meristemáticas de la yema de crecimiento de la planta bajo condiciones ambientales estériles. demostraron la aplicación del cultivo de tejidos como una rápida propagación clonal de orquídeas. produce una masa indiferenciada. La germinación de la semilla en el medio de cultivo. ya que el proceso de división puede repetirse a medida que crecen los fragmentos. meses o incluso años. la acción del hongo consiste en la degradación de dicha capa. consiste del cubo del brote adherido al nudo. por partición esquejes o meristemos (que es como se producen la mayoría de las plantas que están en el mercado). 2006). 2007). como es el caso de un hongo específico. dependiendo de la especie (Gil. mientras las epífitas necesitan un medio más rico en sales (Gil. Los explantes por raíces consisten de 3 a 5 mm de extensión de raíz (Yoneo. ya que la capa de la cápsula es gruesa. 1991. Las semillas requieren establecer relaciones simbióticas con microorganismos. Estos meristemos clonados se desarrollan en un medio nutritivo y dichos individuos presentan características idénticas a la de sus progenitores (Gil. su posterior multiplicación y transferencia final de las nuevas plantas. El explante de yemas apicales incluye el meristemo apical con 3 a 4 nudos con la presencia de hojas jóvenes. el protocormo continuará su crecimiento por semanas. hojas y raíces. Zettler et al. esta tecnología fue exitosamente aplicada a la producción comercial de plantas de orquídeas seleccionadas. 1991) Los explantes son exitosos a partir de fragmentos vegetativos. Son diversos los medios nutritivos usados para la germinación de semillas y desarrollo de varios géneros y especies de orquídeas. (2006) la propagación de orquídeas se puede realizar por la germinación de semillas de forma asimbiótica o bien por la multiplicación convencional vegetativa. llamada protocormo. De acuerdo a Wagner et al. . metodologías in vitro de propagación pueden ser necesarios. 2007). donde el cultivo de semillas es una razonable estrategia de propagación masiva de un muestreo no destructivo de explante (Krikorian. inflorescencias jóvenes. 2000). También las micorrizas proveen a las plantas jóvenes de azúcares y nutrimentos que necesitan en su desarrollo hasta ser autosuficientes (McKendrick. Reproducción asexual Se pueden reproducir las orquídeas por vía vegetativa.. En todos estos casos estamos obteniendo clones idénticos a la planta madre. Brotes axilares como explantes.En el caso de orquídeas raras o las que están en peligro de extinción. 1991). Grandes cantidades de plantas. establecimiento de nuevos híbridos y la multiplicación y preservación del germoplasma son algunos beneficios que derivan de la aplicación de esta tecnología (Yoneo. Las orquídeas terrestres requieren un medio pobre en sales. La germinación in vitro de semillas permite un gran número de plántulas para se producidas en un pequeño lapso de tiempo. 2007). se realiza tomando una parte de la planta a reproducir mediante un instrumento de cortar y sembrando en un medio adecuado. bajo condiciones óptimas. Este método es utilizado para clonar variedades destacadas por su interés botánico y calidad y floración. Sobre la preferencia del origen del explante es terminal o axilar de las yemas de la acción vegetativa de los brotes de las plantas superiores. conocido como Rhizoctonia. 2001). sin que altere las células interiores y permite la germinación. tal técnica presenta varias ventajas: permite multiplicar a voluntad los ejemplares de una orquídea. o sea. diversos métodos han sido reportados para la micropropagación de orquídeas (Pedroza y Mican. La reproducción asexual o vegetativa se efectúa sin transferencia de material genético. Desde Morel y Wimber. hasta alcanzar el desarrollo de raíces y hojas.

citocininas: 2. durante la preparación del medio. que generalmente se agrega en forma de quelato (Fe–EDTA) a una concentración de 20 a El uso de giberelinas es recurrente. sin embargo. del orden factor crítico. I y Na sobre el acerca de qué tipo de medio elegir.10 mM L-1.isopenteniladenina (2iP) y la NO3. se ser una decisión arbitraria (Vidalie. En el caso de otros ácido giberélico 3 (AG3). Productos naturales complejos que a concentraciones bajas (0. que son sintéticas. los iones K+. es el caso de la vitamina B1. ácido glutámico y tirosina. éstos se agregan en forma de una mezcla compleja a la que se le Los componentes del medio de cultivo se conoce como caseína hidrolizada. se concentraciones más usadas de los reguladores sabe que el hierro es esencial para el crecimiento de crecimiento descritos es de 0. las necesidades suelen cubrirse con esta variación. Se deben usar los isómeros L. algunos tejidos son sensibles frecuente. 1976).aminopurina). Ca2+ y Mg2+. concentraciones de 2 a 3%. durante el vitaminas y aminoácidos dentro del cultivo de proceso el pH frecuentemente disminuye.00003 a 0. se ha demostrado 4. dependiendo de que se encuentren desconoce o se sabe muy poco acerca de la en un medio sólido o en uno líquido. NO3-.01 a 10 mg L -1. pero no parece ser esencial.03 mM L -1. Los tejidos cultivados tienen necesidades específicas con respecto a los siguientes iones: En los medios de cultivo se utilizan cuatro K+. sin tejidos es importante. la decisión influencia del Cu. El metabolismo de los tejidos se puede modificar Siguiendo en la línea de micronutrimentos. se por completo. se utiliza en forma micronutrimentos. que es esencial. no tiene que crecimiento de los tejidos. somáticos (Vidalie. Sales minerales mezclados. pero sólo el 40 mg L -1.02 a para activar el crecimiento de los embriones 0. tisular. La En lo que respecta a los micronutrimentos. las necesidades de vitaminas se cubren con el uso de vitaminas del grupo B. zinc. presente en concentraciones de 0.mg L -1. en el caso del mioinositol se encuentra presente en concentraciones de 10 a 100 mg L-1. se sabe muy poco sobre los efectos de azúcares. y la N6 importante en el crecimiento de los tejidos benciladenina (BA o BAP) y la cinetina (6 (Vidalie. glutamina. El en bajas concentraciones (Vidalie.y NH4+ son los que ejercen influencia zeatina. 1976).1 a 10 Medios de cultivo El medio de cultivo es el que le confiere al material vegetal los nutrimentos necesarios para su desarrollo. con respecto a los embargo.01 mg L-1). Sustancias orgánicas Los tejidos muestran necesidades específicas en 3. 2. Con respecto a los requerimientos de aminoácidos. . ajusta a valores comprendidos entre 5. solos o 1. influyen de manera sensible en el crecimiento de los tejidos vegetales.5 y 5. se adiciona en el medio de cultivo al ácido bórico (H3BO3). se define por sus propiedades químicas y física (Vidalie. 1976). 1976).8 El uso de sustancias orgánicas como azúcares. su función es mejorar el crecimiento. ácido aspártico. Mo. caso de la cinetina resulta ser menos eficiente si se le compara con las otras tres citocininas. pero se puede clasifican en cuatro categorías: adicionar asparagina. En la práctica el pH inicial se de 0.con frecuencia se añade fósforo furfuril. Co. NH4+. que son naturales. al manganeso y al para estimular el crecimiento de los meristemos. los isómeros D son ineficaces. 1976). estos elementos se introducen al medio de inducir el alargamiento de los tallos o incluso cultivo en concentraciones del orden de 0. Reguladores de crecimiento lo que se refiere a los reguladores del crecimiento o fitohormonas. arginina. agregan al medio de cultivo como medida de El pH del medio también se considera como un precaución en concentraciones bajas.

1980.Aunque en muchos casos la composición mineral de Murashige y Skoog (1962) da Bibliografia: resultados satisfactorios. se debe considerar que no siempre es la mejor opción. 2002. Gil I. High La propagación in vitro de material vegetal photosynthetic flux and high CO2 aporta resultados en la conservación de especies. El medio MS es de orquídeas en vías de extinción. Espejo. muy rico en sales totales y a menudo se le puede Cartago.. que diversos son los factores que photosynthesis of four kinds of orchid intervienen en el éxito en la propagación y es plantlets in vitro. han tomado mayor auge.49: 37-40. Cultivo de tejidos: Relacionar la conservación de las especies con la una herramienta para el acción del ser humano. 2001. 2008. sin embargo hasta el momento para muchas especies vegetales.Contacto Nuclear. Costa Rica. 5. S. López.. México. Pp 9-11. and Paek. lo conveniente es 1. S. En: Orquídeas: su cultivo en Costa Rica.A. J. Hahn E.. seleccionar una composición en función del Rescate. pp: 4-13. E. conciencia y actuar. 1997. Bastida A. Instituto diluir a la mitad. Orquídeas de Estado de Morelos. Impresora Delta.. y Sánchez S. 2003). Ithaca: Comstock alternativa para su rescate y conservación no publishing associates 2:244-370. diversas pueden ser las ININ. es evidente a partir de la literatura air exchanges promote growth and citada. Las Cattleyas en Costa Rica.. Abdelnour. concentration under increased number of No obstante. endémicas. T. Vicerrectoría Las técnicas biotecnológicas. Flores G. se Universidad Autónoma Chapingo. Pp 4-10. L. García. las cuales corresponden al 40% del total registrado en nuestro país. Orchid biology: Reviews y/o en peligro de extinción. implica una actividad de fitomejoramiento. evidente que los resultados obtenidos dependen Developmental Biology Plant. Ed. A. opciones en el acto de conservar las especies endémicas de nuestro país. September–October. L. J. Orchid seed germination satisfacen las diversas demandas de estos and seedling culture: A manual. J. A.42. En el caso de las orquídeas.. que como vía and perspectives. C. y geográfica de nuestro país. 3. A. logran satisfacer las demandas de conservación y propagación (Rosales et al. . diversos climas. en gran medida de la especie con que se trabaja. los sistemas de propagación tradicional no 2. Pp: 31. V. calcula que existen 400 especies o subespecies México. establecimiento. R. Herbario AMOConclusión: UAM Iztapalapa. 2007. 6. y Muñoz. González. por la Asociación Costarricense de Orquideología. F. al igual que existen especies endémicas Arditti. 1982. C. Y. así como su compleja Navarro E. San José. multiplicación conocimiento de la fisiología de la especie con y conservación in vitro de germoplasma respecto a la nutrición mineral. Reproducción y orografía e historia biogeográfica y presencia de manejo de orquídeas mexicanas. Diversas son las especies de flora y fauna que convergen en México. In: cultivos. Society for In vitro Biology pp: 37:678–682. en la actualidad de Investigación y Extensión. (Ed. 7. Horich. J. Costa Rica. producto de la ubicación 4. Arditti. K. Tecnológico de Costa Rica. J.). In vitro Cellular and.

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