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Tipos de Tinción

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Tipos de Tinción

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Tinción Simple: utiliza un solo colorante.

Tinción de Gram: Utiliza varios colorantes (cristal violeta 1m, Yodo 1m, lavado con alcohol, Safranina 30 seg) Tinción de Gram:

Dividida en gram positivo y gram negativo, en el caso de los gram (+) la muestra fue sarcina, puesto que una tonalidad violeta fijada en su estructura determina la presencia de la misma puesto que fijó en su estructura el cristal violeta. Y en el gran (-) utilizamos salmonella identificada por la presencia de muchas estructura un poco triangulares de color rojo.

En la muestra de la práctica anterior 3 eran gran positivo por su coloración morada.

Tinción de gram A pesar de que fue desarrollada en el siglo XIX la tinción de gram es la más utilizada en el diagnóstico microbiológico. De hecho la información que ofrece relativa a la composición de la pared bacteriana es la base de todas las taxonomías en este reino. Se trata de una tinción diferencial que distingue entre bacterias con pared gruesa (gram positivas) y bacterias con pared fina y membrana externa (gram negativas). La mayoría de las bacterias presentan una de estas dos morfologías generales.

En resumen las bacterias gram positivas quedan teñidas de violeta y las gram negativas de rojo. acentuando la penetración del colorante primario. . Esta particularidad las hace resistentes a la decoloración con ácido y alcohol que no se produce en casi ningún otro tipo bacteriano. Después el lugol actúa como mordiente. Tras su aplicación todos los microorganismos se tiñen de violeta. tiñe de rojo las bacterias decoloradas. es decir las de pared fina. Por último el colorante secundario o de contraste. La pared de las micobacterias no está basada en peptidoglicano como las bacterias gram positivas y gram negativas. sino en ácidos micólicos. Tinción de Ziehl-Neelsen También es una tinción diferencial. una mezcla de alcohol y acetona que elimina el violeta excepto en las bacterias con pared gruesa.La tinción de gram utiliza violeta de genciana como colorante primario. las micobacterias. la safranina. Se denomina tinción ácido-alcohol resistente y es específica para una serie de bacterias con estructura de pared particular. El tercer paso consiste en la aplicación del decolorante.

El colorante primario es la fucsina que tiñe toda la preparación de rojo brillante. Por último el azul de metileno tiñe de azul el resto de la preparación. La presencia de bacilos rojos sobre fondo azul constituye un diagnóstico casi definitivo de tuberculosis. Esta tinción es útil en la detección de bacterias del género Micobacterium en muestras de esputo. Microscopio de campo oscuro Mediante un condensador especial prácticamente opaco consigue que los microorganismos se observen brillantes sobre fondo oscuro. Microscopio de fluorescencia . La solución decolorante elimina el colorante primario excepto el los bacilos ácido alcohol resistentes. Como mordiente se utiliza flameado de la preparación con el colorante. (BAAR).La tinción de Ziehl-Neelsen utiliza tres reactivos. Es el único tipo de microscopia óptica que permite ver flagelos en preparaciones sin teñir.

Es un microscopio adaptado para la emisión de luz en longitudes de onda fuera del espectro visible (ultravioleta y luz roja). Las tinciones más utilizadas son las siguientes: . Cuando se depositan sobre los microorganismos y se aplica sobre ellos luz ultravioleta estos se observan brillantes en el microscopio de fluorescencia. Son los denominados fluorocromos. Las tinciones fluorescentes son muy útiles en microbiología clínica. También se utilizan en muchos otros campos de la ciencia médica como la inmunología o la genética. Las tinciones fluorescentes utilizan compuestos que reflejan luz visible cuando son irradiados con luz ultravioleta.

Microscopio de fluorescencia: la muestra se tiñe con una sustancia fluorescente que absorbe la energía de las ondas cortas de la luz (azul) y emite la luz de longitudes de ondas más largas (verde).35 . Microscopio de campo oscuro: usa un microscopio óptico equipado con un condensador y objetivo especial que iluminan los microorganismos en la muestra frente a un fondo oscuro.6.7.7.5 | Orina | | 6. Microscopio de contraste de fases: es un microscopio óptico modificado que permite contrastar sustancias de diferente grosor o densidad.5 .45 | Sangre | .4 | Saliva humana | | 7. Mediante un condensador y un objetivo especial se controla la iluminación de tal manera que vaya en diferentes rutas a través de las distintas partes de una célula. Con este método. Microscopio de campo claro: usa como fuente de luz directa bien una bombilla bien la luz solar. mientras que las partes de la célula que tienen una densidad cercana al H2O (citoplasma) aparecen oscuras.5 . Si el anticuerpo fluorescente se une al microorganismo. pH en el cuerpo humano y la salud | 2 | Jugo gástrico || | 5. Se utiliza en inmunofluorescencia. Ya que los microorganismos son transparentes es difícil distinguirlos con este tipo de microscopía y es por lo que se suelen teñir. El resultado es una imagen con diferentes grados de brillo y oscuridad. Esta técnica se usa en clínica.MICROSCOPIA OPTICA Además del microscopio de campo claro existen otros microscopios ópticos como son el de campo oscuro. el material denso aparece brillante. fluorescencia y contraste de fases. este microorganismo emite fluorescencia y se puede identificar. técnica en la cual una sustancia fluorescente se une a un anticuerpo específico de ciertos microorganismos. Se utiliza para visualizar estructuras celulares sin necesidad de usar colorantes o matar microorganismos. Este método se utiliza para visualizar microorganismos vivos sin teñir.

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