Tipos de Tinción

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Tinción Simple: utiliza un solo colorante.

Tinción de Gram: Utiliza varios colorantes (cristal violeta 1m, Yodo 1m, lavado con alcohol, Safranina 30 seg) Tinción de Gram:

Dividida en gram positivo y gram negativo, en el caso de los gram (+) la muestra fue sarcina, puesto que una tonalidad violeta fijada en su estructura determina la presencia de la misma puesto que fijó en su estructura el cristal violeta. Y en el gran (-) utilizamos salmonella identificada por la presencia de muchas estructura un poco triangulares de color rojo.

En la muestra de la práctica anterior 3 eran gran positivo por su coloración morada.

Tinción de gram A pesar de que fue desarrollada en el siglo XIX la tinción de gram es la más utilizada en el diagnóstico microbiológico. De hecho la información que ofrece relativa a la composición de la pared bacteriana es la base de todas las taxonomías en este reino. Se trata de una tinción diferencial que distingue entre bacterias con pared gruesa (gram positivas) y bacterias con pared fina y membrana externa (gram negativas). La mayoría de las bacterias presentan una de estas dos morfologías generales.

. Se denomina tinción ácido-alcohol resistente y es específica para una serie de bacterias con estructura de pared particular. La pared de las micobacterias no está basada en peptidoglicano como las bacterias gram positivas y gram negativas. Después el lugol actúa como mordiente. acentuando la penetración del colorante primario. Tras su aplicación todos los microorganismos se tiñen de violeta.La tinción de gram utiliza violeta de genciana como colorante primario. Tinción de Ziehl-Neelsen También es una tinción diferencial. una mezcla de alcohol y acetona que elimina el violeta excepto en las bacterias con pared gruesa. la safranina. es decir las de pared fina. El tercer paso consiste en la aplicación del decolorante. Esta particularidad las hace resistentes a la decoloración con ácido y alcohol que no se produce en casi ningún otro tipo bacteriano. Por último el colorante secundario o de contraste. las micobacterias. sino en ácidos micólicos. tiñe de rojo las bacterias decoloradas. En resumen las bacterias gram positivas quedan teñidas de violeta y las gram negativas de rojo.

Microscopio de campo oscuro Mediante un condensador especial prácticamente opaco consigue que los microorganismos se observen brillantes sobre fondo oscuro. Por último el azul de metileno tiñe de azul el resto de la preparación. Microscopio de fluorescencia . Esta tinción es útil en la detección de bacterias del género Micobacterium en muestras de esputo. Como mordiente se utiliza flameado de la preparación con el colorante. La solución decolorante elimina el colorante primario excepto el los bacilos ácido alcohol resistentes. (BAAR).La tinción de Ziehl-Neelsen utiliza tres reactivos. Es el único tipo de microscopia óptica que permite ver flagelos en preparaciones sin teñir. El colorante primario es la fucsina que tiñe toda la preparación de rojo brillante. La presencia de bacilos rojos sobre fondo azul constituye un diagnóstico casi definitivo de tuberculosis.

Las tinciones más utilizadas son las siguientes: .Es un microscopio adaptado para la emisión de luz en longitudes de onda fuera del espectro visible (ultravioleta y luz roja). También se utilizan en muchos otros campos de la ciencia médica como la inmunología o la genética. Cuando se depositan sobre los microorganismos y se aplica sobre ellos luz ultravioleta estos se observan brillantes en el microscopio de fluorescencia. Son los denominados fluorocromos. Las tinciones fluorescentes utilizan compuestos que reflejan luz visible cuando son irradiados con luz ultravioleta. Las tinciones fluorescentes son muy útiles en microbiología clínica.

Microscopio de campo claro: usa como fuente de luz directa bien una bombilla bien la luz solar. Se utiliza para visualizar estructuras celulares sin necesidad de usar colorantes o matar microorganismos. Se utiliza en inmunofluorescencia. fluorescencia y contraste de fases. el material denso aparece brillante. técnica en la cual una sustancia fluorescente se une a un anticuerpo específico de ciertos microorganismos. Ya que los microorganismos son transparentes es difícil distinguirlos con este tipo de microscopía y es por lo que se suelen teñir. Microscopio de fluorescencia: la muestra se tiñe con una sustancia fluorescente que absorbe la energía de las ondas cortas de la luz (azul) y emite la luz de longitudes de ondas más largas (verde). mientras que las partes de la célula que tienen una densidad cercana al H2O (citoplasma) aparecen oscuras. El resultado es una imagen con diferentes grados de brillo y oscuridad.4 | Saliva humana | | 7.7. este microorganismo emite fluorescencia y se puede identificar.45 | Sangre | . Mediante un condensador y un objetivo especial se controla la iluminación de tal manera que vaya en diferentes rutas a través de las distintas partes de una célula.35 . Esta técnica se usa en clínica.5 | Orina | | 6.5 . Si el anticuerpo fluorescente se une al microorganismo.7. pH en el cuerpo humano y la salud | 2 | Jugo gástrico || | 5.6. Este método se utiliza para visualizar microorganismos vivos sin teñir. Microscopio de contraste de fases: es un microscopio óptico modificado que permite contrastar sustancias de diferente grosor o densidad. Con este método.5 .MICROSCOPIA OPTICA Además del microscopio de campo claro existen otros microscopios ópticos como son el de campo oscuro. Microscopio de campo oscuro: usa un microscopio óptico equipado con un condensador y objetivo especial que iluminan los microorganismos en la muestra frente a un fondo oscuro.