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3.coloraciones especiales

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COLORACIONES ESPECIALES

F-Dsh-A

.

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agente bacteriano y problemas patológicos .

. (tipo de agentes infecciosos).Verde metilo pironina Brown Brenn Mucicarmin Zielh Nielsen plata metenamina PAS Giemsa Waysson Griedley Glenn Warthin Starry Perls o azul de Berlín…  Estructuras específicas en los tejidos. la forma de agrupación y forma.

otros usos para el dx histológico de la membrana basal en biopsia renal. VERDE METILO PIRONINA PLATA METENAMINA BROWN BRENN Rutina en algunos laboratorios : sospecha etiología infecciosa .COLORANTES ? PLATA METENAMINA: hongos .

.GRAM : detecta gérmenes y/o bacterias gram+ y gram.: diferenciar El uso y difusión de esta técnica ha sido recomendada como método rápido y fácil en la detección de bacteriemia en pacientes críticos.

.Las bacterias Gram positivas. (Lactobacillus acidophilus) retienen el tinte y se colorean de azul.

(glucógenos). mucopolisacáridos neutros. entre otros. los hongos.PAS: CHO. Perls o azul de Berlín: Fe ZIELH NIELSEN: BK Giemsa : gram+ . mucoproteínas.

Se puede usar para evidenciar HP en el moco superficial de la mucosa gástrica. incluyendo células cebadas.  . Hematopatología: elementos hematolinfoides.

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VERDE METILO PIRONINA FENICADA: gram -. . color rojo vivo y los núcleos verde azuloso. LEVADITIS(espiroquetas): en sus componentes el nitrato de plata que identifica bacterias color oscuro.

GRIDLEY: hongos y Endoameba histolítica. . MUCICARMIN DE MAYER: mucoproteínas y Criptococcus y se usa en centros especializados y en infecciones.

. Cohen utilizó una nueva técnica .WARTHIN STARRY Y WAYSSON : biopsias gástricas (HP) Carnoy's. -costosa. inmunohistoquímica. +rápida. completa en pocos minutos. las que se comparan con las muestras histológicas fijadas en formol al 10 % y coloreadas con H/E(…mayor sensibilidad ). fácil de realizar e interpretar y con una sensibilidad a métodos de coloración convencional: PAS Hematoxilina azul de metileno tiñe microorganismos de azul brillante.

Parásitos TINCIÓN DE IDENTIFICACIÓN Rosado Azul Rojo Rojo Rojo Rojo Bacterias grampositivas Bacterias gramnegativas Bacterias gramnegativas Gramnegativas Bacilos Verde metilo Glenn Zielh Nielsen .TÉCNICA HISTOLÓGICA PAS Brown Brenn AGENTE INFECCIOSO Hongos.

rojo congo .Relación de órganos muestreados según técnicas empleadas ÓRGANOS Pulmón Cerebro Hígado Riñón Piel TÉCNICAS EMPLEADAS PAS.PAS. BK Plata Plata. H/E. PAS y tricrómica H/E.PAS H/E. H/E. Perls.

.

el PCR. . lo que demuestra una alta sensibilidad en el diagnóstico de micobacteria.BK Otros autores utilizan para los bacilos ácidos resistente.

Ac. Clorhídrico 20%: HCl = 20 ml H2O destilada = 80 ml

Sol. de ferrocianuro de K 10% Ferrocianuro de K = 10 g H2O destilada = 100 ml Sol diaria

Solución de rojo núcleo

-Desparafinar e hidratar. - Sol. Diaria de HCl – ferrocianuro de K (30min) - Enjuagar las laminas con H2O d. -Solución de rojo núcleo durante 5 min -Lavar en H2O c. (2min) -Deshidratar, aclarar y montar.

H.P.

MARRON

Fondo = amarillo parduzco

Sol .5 ml . Tampón 50 ml Solución 1: .5 g -Sol. Acuosa de nitrato de plata 2 % a 60ºC.hidroquinona 0.H2O destilada 200 ml Solución de nitrato de Ag: -Nitrato de Ag 0.Solución tampón: -Acetato sodico 1. = 3 ml Solución de trabajo: sol 1 + sol 2 .ac.tampón 10 ml Solución 2: Sol. acetico 2.64g .3 g .

Tampón . aclarar y montar. Tampón -Deshidratar.P.Sol.-Desparafinar e hidratar. Tampón. . H. OSCUROS Fondo = amarillo parduzco . -Sol de trabajo 3 min. -Enjuagar en agua c.nitrato de Ag 1 % x 30 – 60 min -Lavar en sol.Lavar en sol. .

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ROJO CONGO .

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H2O destilada 100 ml SOLUCION DE PERMANGANATO ACIDO DE POTASIO: -sol acuosa de permanganato de K 0.5 % 47. X 1 min.SOLUCIONES: SOLUCION DE ROJO CONGO: -Sol.5 ml SOLUCION ACUOSA DE ACIDO OXALICO 1 %: PROCEDIMIENTO: -Desparafinar e hidratar. x 15 min. Acuosa de ac.H. lavar en H2O destilada. -Ac oxálico 1 % hasta blanquear.sol. -Tratar con permanganato acido de potasio x 30 seg.5 ml . . x 2min. De rojo Congo 1 g . De carbonato de litio x 15 seg. -Deshidratar . . aclarar y montar. lavar H2O c. -Rojo congo 30 min -Sol. Sulfúrico 3 % 2. -H2O c. .lavar en H2O destilada.

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polarizada (verde manzana) .

Colorea los hidratos de carbonos. mucopolisacáridos neutros. . (glucógenos). los hongos. mucoproteínas. entre otros.

Solución de HCl 1 N 10 ml 3. Fucsina básica 0.5 g 2.35 ml . peryódico 0.5 g 4. + 3.H2O destilada 100 ml Reactivo de Schiff: 1. + 5 .Disulfito de Na 0. Dejarlo hasta sgte.5 g -H2O destilada 100 ml .Carbón activado 0. Periyódico 0.Solución de HCl 1 N: -HCl concentrado 8.25 g Disolver 1 en 2 en 4 caliente hasta ebullición. Enfriar. agitarlo… Solución acuosa de ac. Día en frasco hermético y oscuro… adquirió color amarillento. agitarlo x 20 min.5 % -Cristales de ac.H2O destilada 100 ml 5.

-Deshidratar . .Aclarar y montar RESULTADO: Las sustancias PAS positivas color rojo.PROCEDIMIENTO: -Desparafinar e hidratar las secciones. Peryódico 10min -Lavar H2O destilada -Reactivo de Schiff 5-7min -Lavar c/ H2O destilada 3-5min -H x 2 min -Lavar en H2O c. núcleo azul. -Ac.

RIIÑON = GLUCOGENO .

.Se utiliza también para demostración de producción de mucina por las células tumorales de una neoplasia epitelial.

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. X200). (PAS.El borde en cepillo de los túbulos proximales tiene afinidad por los reactivos usados en la coloración de PAS (flechas).

GLOMERULO NEFRITIS .

tiñe de forma específica las membranas basales glomerulares. . tubulares y de la cápsula de Bowman.

membrana basal . Dentro de las sustancias positivas tenemos: .glándulas mucosas .glucógeno .

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las fibras reticulares. también evidencia. aunque en menor intensidad. . TRICRÓMICA DE MASSON: Fibras de colágeno tipo I que forman fibras gruesas o haces. citoplasma y las fibras de colágeno. diseñados para dar resistencia. Se emplean colorantes para diferenciar los núcleos.

pícrico (75ml) -formaldehido comercial 25ml -Ac. Acético glacial -H2O destilada 100ml -H2O destilada 100ml .5g Solución de acido acético 1%: -Ac.Solución de Bouin: -Sol. -HCl concentrado 1 ml -SOL. acuosa de fucsina ac. 1% 10 ml Solución acido Fosfotúngtico 5 % -Ac. Acetico glacial 1 ml -Ac. Acuosa saturada de ac. FERRICA: Solución B de HEMATOX. Fosfotúngtico 5g -H2O destilada 100ml Solución de azul de anilina: -Azul anilina 2. B = 1/1 VOL -H (1g) -alcohol absoluto 100 ml Solución FUCSINA ACIDA: -sol. acuosa de escarlata Biebrich 1% 90 ml -sol. Acetico 2 ml -Ac. FERRICA: -cloruro férrico 29% (4ml) -agua destilada 95 ml Solución TRABAJO de HEMATOX. Acético glacial 5ml Solución A de HEMATOX. A + SOL.

Sol. 10min. xilol 2 cambios bálsamo . de fucsina ac. y H2O destilada H2O acética 1% 3-5 min OH 95% y absoluto 2cambios. H. X 15 min H2O destilada enjuague Solución acido Fosfotúngtico 5 % Sol. - - - - PROCEDIMIENTO: Desparafinar e hidratar hasta agua c. De anilina 5 a 10 min. Fijador de Bouin x 1h Lavar hasta desaparecer color amarillo. Fe x 10 min y lavar agua c.

QUERATINA.CITOPLASMA. FIBRAS MUSCULARES= ROJO .-NUCLEOS= OSCUROS .FIBRAS COLAGENAS Y MOCO= AZUL (ANILINA) .

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Estos "trombos" son positivos para inmunoglobulinas (IgG e IgM). Las técnicas de tricrómico también definen nítidamente las zonas de glomeruloesclerosis.Señalan trombos hialinos intracapilares. por ende. X600). (Tricrómico de Masson. la esclerosis intersticial con mayor resalte de la atrofia tubular. el depósito de colágeno periglomerular y. .

Glomerulonefritis membranoproliferativa .

destacar la cantidad y distribución de la fibrosis y demostración de nódulos en la cirrosis .

.

H2O destilada 100 ml -Desparafinar e hidratar. .HCl 2 ml Solución de H/E: .1 vol.E X 15 seg -Lavar en H2O C.+ 1 vol.Solución acuosa de ferrocianuro de K 2%: .ferrocianuro de k 2 g Solución acuosa de HCl 2%: .H2O destilada 100 ml . -Deshidratar. Azul . . x 20 seg. x 1 min . Ferricianuro de K x 1min .lavar c/ H2O c. aclarar y montar. x 2 min -H x 2 min -Lavar en H2O c. De HCl x 15-20 min hasta tomar colorac.

OBJETIVO: . El Fe demostrable por este método se hala bajo forma de hemosiderina.  RESULTADOS: Los depósitos de Fe se observan de color azul turquesa.Demostración de hierro trivalente. núcleos de color morado y citoplasma rosado. .

.

sales de Fe = azul Núcleos.Hemosiderina. citoplasma = rosa a rojo .

.

Para hemosiderina: (Perls) especialmente útil en patología hepática para la demostración de cúmulos de Fe en los hepatocitos en distintas situaciones o en casos extremos de hemosiderosis (ejemplo en la enfermedad genética hemocromatosis). .

 . medula ósea y células de Kupffer del hígado. Normalmente se halla en bazo. (presencia de Fe trivalente). La hemosiderina es una forma parcialmente desnaturalizada de ferritina que se aglomera con facilidad y reconoce en el examen microscópico como unos gránulos azulinos en el citoplasma = debido a la reacción de Perls.

.

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GRACIAS POR SU ATENCION .

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