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Guía: Realización de Frotis Sanguíneo y Tinción de Láminas

ESCUELA SALUD

GUIA REALIZACION DE FROTIS SANGUINEO Y TINCION DE LÁMINAS

DIRIGIDO A ALUMNOS DE:
Técnico Superior de Laboratorio Clínico y Banco de Sangre

PRE-REQUISITO:
Laboratorio Clínico I (LCS 2100) .

Autores: BQ Cecilia López Reyes EU. Eliana Escudero DuocUC

OBJETIVOS Al finalizar el taller el alumno será capaz de:  Realizar frotis sanguíneos  Realizar las tinciones hematológicas corrientes  Manipular con seguridad material contaminado REALIZADO POR Tecnólogo Médico. La importancia de un buen extendido y su correcta tinción son fundamentales a la hora de la observación al microscopio. cuando hay normalidad en todos los elementos. Biólogo. Eliana Escudero DuocUC . DURACIÓN 90 minutos NUMERO DE ALUMNOS POR DOCENTE Máximo 10 alumnos Autores: BQ Cecilia López Reyes EU. y en algunos casos es esta observación la que entrega al Clínico la información que requiere para realizar su diagnóstico. Químico Farmacéutico. En este último sistema. se obtienen los datos gráficamente desde el equipo y es opcional el uso del frotis ( lectura total .Guía: Realización de Frotis Sanguíneo y Tinción de Láminas INTRODUCCIÓN El frotis sanguíneo es realizado en forma rutinaria en todo hemograma. ya sea que se realice en forma manual o automatizada. Esto dependerá del laboratorio y de la experiencia del profesional. Bioquímico. ya que un frotis mal hecho entrega muy poca información acerca de la morfología celular. parcial o nada).

En este último caso. las características de las células sanguíneas. al microscopio. Eliana Escudero DuocUC . esto dependerá de cada laboratorio. trastornos genéticos de la forma de los eritrocitos. Observación microscópica de un frotis ya teñido 1. se obtienen los datos gráficamente y es opcional verificarlo. cuando hay normalidad en todos los elementos sanguíneos. deficiencias de hierro. posibles deficiencias de vitamina B12. Este preparado entrega valiosa información en casos como las leucemias. ya sea en forma manual o automatizado.Guía: Realización de Frotis Sanguíneo y Tinción de Láminas MARCO TEÓRICO Frotis sanguíneo: es la extensión de sangre realizada sobre un portaobjeto y a partir de la cual se observarán. Usos: Es un análisis rutinario que acompaña a todo hemograma. Observación microscópica de un frotis teñido 2 Autores: BQ Cecilia López Reyes EU.

Guía: Realización de Frotis Sanguíneo y Tinción de Láminas Una leucemia o leucopenia acentuada. se reconoce fácilmente en estudio panorámico. cuando el tamaño de los hematíes es variable y poiquilocitosis cuando hay variaciones en su forma. las extensiones deben ser delgadas. Autores: BQ Cecilia López Reyes EU. bien extendidas y bien coloreadas. ya que si es menor a dos horas la calidad de un frotis se conserva. La tecnica será revisada en detalle en el taller. En algunos laboratorios prefieren que éste sea hecho por personal capacitado y lo realizan al recibir la muestra. En laboratorios de países desarrollados y sólo en algunos laboratorios de Chile existen equipos automatizados que realizan los frotis y esto implica disminuir el riesgo de la manipulación y aumentar las medidas de bioseguridad. Se dice que hay anisocitosis. Esto estará relacionado con el tiempo de traslado del hemograma al laboratorio. pero si es mayor puede empezar a adulterarse el estado de las células. Eliana Escudero DuocUC . Para esto. Foto 3 Realización Frotis sanguíneo Habitualmente éste se realiza al momento de tomar el hemograma al paciente.

Autores: BQ Cecilia López Reyes EU.2 con 12. ( lo ideal es una gota sin mezcla de anticoagulante) 2.Guía: Realización de Frotis Sanguíneo y Tinción de Láminas INSUMOS Y EQUIPOS REQUERIDOS  Portaobjetos (10 por alumno)  Tinciones para hematología.5 mL de Giemsa)  Cubetas para tinción. El inicio del frotis se denomina cabeza y la parte final del frotis se denomina cola. Con un cubreobjetos (tomarlo lateralmente entre las yemas de los dedos) deslizarlo sobre toda la superficie del porta de manera que se pueda obtener una fina película de sangre. 1 set por alumno (solución May-Grunwall en solución alcohólica. Depositar una gota de sangre en la parte central de un portaobjetos muy limpio (libre de pelusas y grasa). con la zona donde está la muestra mirando hacia arriba. dejarla sobre una rejilla o toalla de papel. ( observe la foto 3) 4.2 con 3 mL de solución MayGrunwall. Con la lanceta estéril realizar una punción en un pulgar o utilizar una gota de sangre del tubo de hemograma. 1 por alumno  Pizetas con agua destilada  Toalla de papel  Guantes  Cubreobjetos 1 caja  Tubos con muestras de sangre con EDTA DESCRIPCION DEL PROCEDIMIENTO Técnica para la realización de un frotis: 1. Eliana Escudero DuocUC . 1 set de tres cubetas por cada alumno (o recipientes plásticos de 15 x 15 x15 cm). tampón fosfato pH 7. Esperar a que se seque la lámina.  Carros de tinción (para poner portaobjetos en las cubetas de tinción). 3. tampón fosfato pH 7.

3. Pasados los tres días filtrar la solución y guardar.Guía: Realización de Frotis Sanguíneo y Tinción de Láminas Preparación de tinciones (modificadas por TM Ruth Córdova. Pasadas las 24 horas filtrar la solución y guardar. Limpiar los frotis por el reverso. 6.  2º cubeta: 300 mL de tampón fosfato pH 7. Eliana Escudero DuocUC . Tinción de Giemsa: Pesar 3. para esto mantener tapado mientras no se utilice (contiene May-Grunwall en solución alcohólica). Dejar por 1 minuto. Sacar el carro y ponerlo sobre papel absorbente. Desechar las otras dos soluciones.  3º cubeta: 300 mL de tampón fosfato pH 7. Tinción May-Grunwall: Para preparar 1000 ml de solución. Proteger las soluciones de la evaporación. sacar la solución del baño y agregar 300 ml de metanol.2 con 3 mL de solución MayGrunwall. guardar la primera solución en un frasco. Procedimiento de Tinción: 1. Poner los frotis. pesar 1.5 mL de Giemsa. Preparación de las cubetas de tinción: En las cubetas de tinción realizar el siguiente procedimiento:  1º cubeta: poner solución May-Grunwall suficiente para cubrir el nivel de los frotis. 5. con papel suave. Poner este carro en la 1º cubeta por 4 minutos. 7. Autores: BQ Cecilia López Reyes EU. Hematóloga Laboratorio. 8.8 gramos de Giemsa y agregar 200 ml de glicerina.3 gramos de May Grunwald y enrasar en matraz aforado a 1000 ml con metanol. Vida Integra) (sólo informativo.2 con 12. en el carro de tinción. antes estilar el colorante de la primera cubeta. Sacar el carro de la tinción y lavar con agua corriente por 1 minuto. Trasladar los frotis a una bandeja para su secado. no se realiza el procedimiento) 1. Mezclar y llevar a baño María a 56º C por una hora. Transcurrido este tiempo. 2. Agitar y dejar a 37º C por 3 días. Dejar reposar la solución por 24 horas. 2. Al finalizar el proceso. Pasar el carro de tinción a la 2º cubeta. 4. Poner en la 3º cubeta por 12 minutos. La preparación está lista para la observación microscópica. Dejar sobre papel absorbente. con la preparación seca.

htm (visita 10/02/2005) http://mavortis. Actividad 4: Cada alumno realiza la técnica de tinción de a lo menos 5 frotis.es/gueb/%20practicas/sangre/elige.uv.Guía: Realización de Frotis Sanguíneo y Tinción de Láminas ACTIVIDAD PARA EL ALUMNO Actividad 1: El docente explica y muestra realizar frotis.html (visita 10/02/2005) METODOLOGÍA DE EVALUACIÓN El taller se evalúa a través de una pauta de competencias logradas de acuerdo a los objetivos planteados: Autores: BQ Cecilia López Reyes EU.joseacortes. Actividad 2: El docente realiza una simulación de la tinción de un frotis explicando en detalle la técnica.com/index. en detalle los pasos del procedimiento para BIBLIOGRAFÍA http://www. hasta tener seguridad y un resultado adecuado. Eliana Escudero DuocUC . Actividad 3: Cada alumno realiza la tecnica de realización de frotis. de los realizados en la actividad anterior.

............Nota......Demuestra interes preguntando y/ o repitiendo las técnicas hasta lograr resultado frotis tinción C: competente MC: medianamente competente NC: no competente C MC NC Autores: BQ Cecilia López Reyes EU...Guía: Realización de Frotis Sanguíneo y Tinción de Láminas Nombre del alumno:......... Realiza técnica de tinción de frotis adecuadamente 6........... cumpliendo los pasos en orden 3........lavado de manos ............ Trabaja en orden y silencio 4....Respeta técnicas de asepsia y antisepsia ........................elimina lo corto punzante según norma 2 Realiza la técnica para frotis.......... Muestra habilidad manual con los materiales de laboratorio 5.... Realización de frotis sanguíneo y tinción de laminas 1......uso de guantes ...... Fecha:..... Eliana Escudero DuocUC .....

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