Journal of Animal Production (JAP) Vol. 10 (2) Mei 2008

ANIMAL PRODUCTION, Mei 2008, hlm.67-72 ISSN 1411 2027 Terakreditasi No.
56/DIKTI/Kep/2005
Vol. 10 No.2
Reproductive Performance and Preweaning Mortality of Peranakan Etawah Goat under a Production System of Goat Farming Group in Gumelar Banyumas
(Penampilan Reproduksi dan Kematian Prasapih Kambing Peranakan Etawah pada Sistim Produksi Kelompok Tani Ternak Kambing di Gumelar Banyumas)
Akhmad Sodiq* dan Anjar Taruna Ari Sudewo
Fakultas Peternakan Universitas Jenderal Soedirman, Purwokerto
ABSTRAK: Program pengembangan dan perbaikan sistim produksi peternakan dapat diawali dengan penilaian terhadap potensi suatu bangsa ternak melalui serangkaian proses pencatatan, evaluasi on-farm, dan monitoring. Tujuan kajian ini adalah (1) mengetahui penampilan reproduksi dan kematian cempe prasapih Kambing Peranakan Etawah pada sistim produksi di kelompok tani ternak kambing Gumelar Banyumas, dan (2) mengetahui faktor-faktor non-genetik yang berpengaruh terhadap penampilan reproduksi dan kematian cempe prasapih. Digunakan kompilasi data penampilan reproduksi dan kematian cempe prasapih hasil penelitian lapang melibatkan 562 cempe dan 344 ekor induk kambing. Uji Chi-Square dan prosedur General Linear Model (GLM) diterapkan untuk menguji faktor-fator non-genetik (jenis kelamin, tipe kelahiran, paritas) yang berpengaruh terhadap jumlah anak sekelahiran, kematian cempe prasapih, dan jarak beranak. Hasil penelitian menunjukkan rataan kematian cempe prasapih sebesar 5,9%. Kematian cempe prasapih betina (6,3%) nyata lebih tinggi daripada jantan (5,4%). Kejadian kematian cempe prasapih paling sering dijumpai pada kelahiran kembar tiga (16,7%), sedangkan pada kelahiran kembar dua dan tunggal masing-masing sebesar 5,6% dan 2,9%. Kematian cempe prasapih dipengaruhi oleh paritas induk, dan kecenderungan menurun dengan peningkatan paritas. Rataan jumlah anak sekelahiran sebesar 1,64 ekor, dan dipengaruhi sangat nyata oleh paritas induk. Induk pada paritas 1, 2, 3, 4, 5, 6, dan 7 menghasilkan jumlah anak sekelahiran berturut-turut 1,45; 1,71; 1,73; 1.95; 1,76; 1,83; dan 2,13 ekor. Rataan jarak beranak 285 hari dan nyata dipengaruhi oleh faktor paritas induk dan tipe kelahiran. Jarak beranak nyata lebih pendek dengan peningkatan paritas induk (1-7) berturutturut adalah 319, 271, 261, 234, 236, 230, dan 228 hari. Jarak beranak nyata dipengaruhi oleh tipe kelahiran, pada kelahiran tunggal rataan jarak beranak (308 hari) nyata lebih pendek dibandingkan pada kelahiran kembar dua (272 hari) dan kembar tiga (245 hari). Kata Kunci: Kambing Peranakan Etawah, jumlah anak sekelahiran, mortalitas cempe prasapih, jarak beranak, sistem produksi peternakan
Introduction
Kidding frequency and litter size are important components of an efficient kid production system. Kids of Peranakan Etawah in the Banyumas regions of Indonesian are traditionally marketed at a live kids ages ranging from 4 - 12 months. Consequently, in the Peranakan Etawah goats production system, the productivity of does is relatively more important than the growth potential of individual kids. Peranakan Etawah goats are descended originally from crossings between the Kacang with Etawah (Jamnapari) goats. They have a larger body frame, long hanging ears, a convex face and larger horns.
*Contact Person: akhmad_sodiq@yahoo.com
The role of goats in the traditional areas has been recognized. Besides producing animal products, they also provide manure to maintain soil fertility. Peranakan Etawah goat production is frequently associated with crop production, mainly because of its buffer function for crop failure and crop surpluses. Peranakan Etawah goats also play an important role in religious festivities, mainly in Idul Adha celebration. In the Peranakan Etawah Goat Farming Group of Gumelar Banyumas, goats are kept as a dual purposes for producing meat and milk. Production traits among individuals and flocks of Peranakan Etawah goats are affected not only by genetic factors, but also by non-genetic factors such as sex, age, production year, age of does, type of birth, herd management, physiological status and nutrition. A number of report on the genetic and environmental factors for goat productivity (Zhang et al., 2008; Oishi
67
72
ANIMAL PRODUCTION, Vol. 10, No. 2, 2008 : 67 - 72
et al., 2008; Bagnicka et al., 2007; Shrestha and Fahmy, 2007; Muir, 2006; Hailu et al., 2006; Lassoued et al., 2006; Song et al., 2006; Akingbade et al., 2004; Gnes et al., 2002; Ahmadu and Lovelace, 2002; Urdaneta et al., 2000; Greyling, 2000; Awemu et al., 1999). The assessment of production potential of a breeds is the first phase of an improvement research and development program (Steinbach, 1987). It requires recording and on-farm evaluations and monitoring (Holst, 1999). Data on individual reproductive and productive performances of Peranakan Etawah goats have been merged in a data base and provided the basis for estimating flock performance. This article reports on litter size, kid mortality and kidding interval of Peranakan Etawah goat under management of Goat Farming Group in Gumelar Banyumas. The data also provided results on the effects of parity and type of birth on reproductive performance, and the effects of sex, birth type, and parity on pre-weaning mortality.
by cut and carry feeding system. Goats are feed by leguminous such as Gliricidia maculata (gliricidia), Calliandra callothyrsus meissn (kaliandra), Leucaena glauca (lamtoro), and also some shrubs and leaves (banana, cassava, jackfruit, and other trees). Goats mostly was fed a supplementary concentrate and biocomplete feed. Goats were provided with permanent stilted housing. Natural mating system was applied by provided superior bucks in order to improve the flock productivity in term of a high quality of Peranakan Etawah Goat (Grade A).
Data Collection and Analysis

The following data were recorded, flock size and identification of does, reproduction data (litter size at birth and interval between kiddings) and preweaning mortality. Least squares procedure by the General Linear Model (GLM) procedure was used to analyze data on mortality and reproductive performance (SPSS, Inc. 1999a,b). The environmental factors assessed were: sex (male, female); parity (1-7); type of birth (singles, twins, triplets). Where significant differences were observed among three or more means, the Multiple Range test devised by Duncan test was applied. The association between the effects of various factors and preweaning mortality were analyzed using the Chi-squares analysis.
Research Methods
General
The study was conducted at the Peranakan Etawah Goat Farming Group in Gumelar, Banyumas, Central Java, Indonesia. The altitude of Gumelar region is 420 m above sea level with the annual rainfall average 2867 mm. The temperature, as it is a tropical country, stays within a constant range, differing only a few degrees between the hot and cool months: 23-31C. Forage availability follows the distribution of rainfall with abundant in rainy season. By-products of agriculture and agro-industry are also available in surrounding areas.
Results and Discussion

Preweaning Mortality
The result of the Chi-square test on preweaning mortality rate is presented in Table 1. This value is much lower than the 8% reported for Peranakan Etawah goats under a production system of village breeding centre in Purworejo (Sodiq, 2004), and 12% for village production system (Anggraeni et al., 1995). The effect of sex of young was found important, consistent with the works of Ebozoje and Ngere (1995) who reported higher death rates in females than males. Birth weight of female kid tend to lower than male kid. Awemu et al. (1999) reported that mortality generally increase as the birth weight of kids decreased. This is in agreement with the observations Mtenga et al. (1994) that animals with low birth weights have lower energy reserves and are therefore less able to withstand harsh environmental conditions. Kid mortality was higher (P<0.001) in triplet litters than in twins or single kiddings. In general, this finding agrees with results reported in the literature Awemu et al. (1999), Ameh et al. (2002), and Mtenga et al. (1994). Kid mortality increased in multiple births
Animals and Production System

Peranakan Etawah in the flocks of Goat Farming Group in Gumelar Banyumas is characterized by larger body frame, long hanging ears, a convex face and larger horns. Averages height at withers and ears length are 86 8.03 cm and 31.7 2.7 cm (buck), and 77 4,60 cm and 29.07 03 cm (doe), respectively. The dominan coat-colour are white (88,02%), brown (6,69%), and black (5,29%). The average flock size was 12 goats, ranges from 6 to 35 goats. The main reason of raising Peranakan Etawah goat is mainly a dual purpose for producing meat and milk. Peranakan Etawah goats play an important socioeconomic role in Gumelar areas and women who are among the most resource farmers. Management of Peranakan Etawah goats was intensive
Reproductive Performance and Preweaning Mortality (Sodiq dan Sudewo)
71
of Peranakan Etawah goats by a tendency in a linear relationship. Kids from multiple births are often weak at birth as a result of physiological starvation in the uterus and lower energy reserves (Curtis, 1969). The survival rate of such kids is usually low, especially if their dams are not producing enough milk. Hailu et al. (2006) revealed that survival of single (70%) and twin (70%) born kids were high compared to survival rate of triplets (43%).
Table 1. Preweaning mortality rate of kids by sex, type of birth, and parity of doe
Sources Overall Sex Male Female 2. = 5.05, P < 0.001 Type of birth Single Double Triplet 2. = 5.07, P<0.001 Parity 1 2 3 4 5 6 7 2. = 5.03, P<0.001 Number of born (%) 562 (100) 260 (46.30) 302 (53.70) Viability to weaning Survival (%) Died (%) 529 (94.10) 33 (5.90) 246 (94.60) 283 (93.70) 14 (5.40) 19 (6.30)
Amsar et al., 1992), which ranged from 1.92 to 1.95 kids. Values of this finding are close to those obtained by Astuti et al. (1984), Adiati et al. (1998) and Setiadi et al. (1999), which ranged from 1.65 to 1.82. Litter size of Peranakan Etawah does was affected by does age (parity), multiple birth rate increase with increasing parity (Tabel 2). Litter size of Peranakan Etawah does differed (P<0.01) among does parity. Does born as multiples had a higher litter size than single contemporaries (Devendra and McLeroy, 1982; Sodiq and Haryanto, 2007). Lower prolificacy of primiparous does may be associated with an underdeveloped state of the reproductive features required for successive litter bearing compared with those of multiparous does that have reached physiological maturity. This study (Table 2) revealed that the peak litter size of Peranakan Etawah doe was generally achieved between 3 and 8 years of age (2nd 7th parities).
138 (24.70) 388 (68.90) 36 ( 6.40)
134 (97.10) 365 (94.10) 30 (83.30)
4 (2.90) 23 (5.90) 6(16.70)
Kidding Interval
The least squares mean for kidding interval of Peranakan Etawah doe was 285 days (Table 2). This value is much shorter than the 303 days reported for the Peranakan Etawah goat under a production system of village breeding centre in Purworejo (Sodiq, 2004). This condition attribute that the main purposes of keeping goat in the Goat Farmer Group of Gumelar Banyumas are producing milk and kids. Generally, the shortest interval generally occurs in traditional systems where uncontrolled breeding is the norm. Parity of Peranakan Etawah does significantly (P<0.01) affected the interval between kiddings which generally decreased with parity in consonance with the report of Wilson and Light (1986) that females at earlier parities take longer than older ones to return to reproductive status. A number of studies have reported that old does tended to have lower kidding intervals than the younger (Sodiq, 2004; Das, 1993; Odubote, 2000). This is probably due to the reproductive physiology function being more active in old does compared to lower activity in younger does. Awemu et al. (1999) reported that parity of does had significant effects on kidding interval, and as parity increased, kidding interval decreased. The interval between first and second kidding was longer (319) than those observed between later parities (ranged between 228 and 271 days, Table 2). The longer kidding interval of Peranakan Etawah does could be due to their larger litters, as suggested by Christopher (2001), Akusu and Ajala (2000), by
215 (38.30) 170 (30.20) 81 (14.40) 42 (7.50) 26 (4.60) 11 (2.00) 17 (3.00)
200 (93.00) 159 (93.50) 76 (93.80) 40 (95.20) 26 (0) 11 (0) 17 (0)
15 (7.00) 11 (6.50) 5 (6.20) 2 (4.80) 0 (0) 0 (0) 0 (0)
Kid mortality of Peranakan Etawah does in first parity does was higher (P< 0.001) than that observed in adult does. These results agree with those of Sodiq et al. (2004) working on Kacang and Peranakan Etawah goats revealed that survival rate till weaning increased with the advance in parity up to the 4th parity and then slightly decreased. This may be attributed to the physiological maturity of older Peranakan Etawah does and their ability to provide enough milk for the kids. This finding, also in line Awemu et al. (2002) working with Red Sokoto goats found an increasing kid mortality across parities.
Reproductive Traits Litter Sizes at Birth

Average litter sizes at birth was 1.64 kids (Table 2) lower than values recorded for most other Indonesian goat breeds such as Kacang, Jawarandu and local breed (Sodiq, 2004; Sodiq and Haryanto, 2007;
72
Table 2. Least squares means (LSM) and standard error (SE) for litter size at birth and kidding interval Variable Overall Parity Parity 1 Parity 2 Parity 3 Parity 4 Parity 5 Parity 6 Parity 7 Type of birth Single Twin Triplet
a,b,c
Litter size at weaning (head) n 344 151 93 49 22 15 6 8 LSM 1.64 ** 1.45a 1.71a 1.73a 1.95 b 1.76ab 1.83ab 2.13b SE 0.03 0.04 0.05 0.08 0.14 0.15 0.17 0.13 n 344 151 93 49 22 15 6 8 138 194 12
Kidding interval (days) LSM 285 ** 319a 271b 261b 234c 236c 230c 228c ** 308a 272b 245c SE 2.59 2.03 4.09 5.32 3.76 6.46 9.99 5.45 4.10 3.04 6.23
Means in the same column with different superscripts are significantly different (P<0.05) * P<0.05, ** P<0.01
Greyling (2000), and ztrk and Akta (1996). Result of Ricordeau et al. (1990) found that milk yield of ewes lambing twins ranges from 1.7 to 1.8 kg and increases to 2.3 2.5 kg for those lambing triplets. A high milk production could lead to a negative energy balance in the ewe. The magnitude of energy deficiency seems to affect these processes of follicular growth and development leading to the first ovulation (Nett, 1987). The gestation length of does with multiple births tend to have a shorter (1 to 2 days) difference between twins and triplets (Christopher, 2001). Gestation length decreased as the litter size of the doe increased (Amoah et al. 1996). Ndlovu and Simela (1996) reported that due to the slow growth rates and long kidding intervals the flock productivity in terms of weaned live kid weight (kg) per doe per year was
production, provided that proper management is employed. Research and development efforts can significantly improve production from goats can simultaneously enhance the livelihood of the goat farmer group.
Acknowledgement
The authors wish to acknowledge the Peranakan Etawah goat farmer group of Gumelar Banyumas involved for their help and cooperation in the realization of this study. Appreciation is extended to the Bank Indonesia Purwokerto for facilitating program in term of enlarging economic scale of the goat farmer group.
References
Adiati, U., D. Yulistiani, R.S.G. Sianturi, Hastono and I.G.M. Budiarsana. 1998. Effect of the feeding improvement on reproduction performance of Peranakan Etawah goat. Proceedings of the National Meeting on Livestock and Veterinary, Bogor, Desember 1-2, 1998. Ahmadu, B. and C.E.A. Lovelace, 2002. Production characteristics of local Zambian goats under semiarid conditions. Small Ruminant Research 45(2): 179-183. Akingbade, A.A., I.V. Nsahlai and C.D. Morris, 2004. Reproductive performance, colostrum and milk constituents of mimosine-adapted South African Nguni goats on Leucaena leucocephala-grass or
Conclusions
In animal production systems such as in the Peranakan Etawah goat farmer group, the value of goat breed increases in relation to its adaptation, capacity to make socioeconomic contributions, and potential for increasing productivity. Average litter size at birth, preweaning mortality, and kidding interval were 1.640.03 kids; 5.9%; and 2852.59 days, respectively. The study has revealed that the non-genetic factors exerted significant influences on reproductive performance and preweaning mortality of Peranakan Etawah goat. There is a considerable potential for increased Peranakan Etawah goat
Reproductive Performance and Preweaning Mortality (Sodiq dan Sudewo)
71
natural pastures. Small Ruminant Research 52(3): 253-260. Akusu, M.O. and O.O. Ajala, 2000. Reproductive performance of West African Dwarf goats in the humid tropical environment of Ibadan. Israel Veterinary Medical Association 55(2): 1-6. Ameh, J.A., G.O. Egwu and A.N. Tijjani, 2002. Mortality in Sahelian goats in Nigeria. Preventive Veterinary Medicine 44: 107-111. Amsar, Soedjadi, A. Priyono and A. Setyaningrum, 1992. Growth and preweaning survivability of goats in Cilacap. Research Report. University of Jenderal Soedirman. Purwokerto. Pp.42. Anggraeni, D., R.S.G. Sianturi, E. Handiwirawan and B. Setiadi, 1995. The effect of improving management system on doe and ewe productivity. Proceedings Sciences and Technology National Meeting. Bogor, Indonesia. 25-26 January 1995. Pp.374-379. Astuti, M. 1997. Estimation the genetic distance among population of the Kacang, Peranakan Etawah and Lokal goat based on blood protein analysis. Buletin Peternakan 21(1): 1-9. Awemu, E.M., L.N. Nwakolar and B.Y. Abubakar, 1999. Environmental influences on pre-weaning mortality and reproductive performance of Red Sakoto does. Small Ruminant Research 34: 161-165. Awemu, E.M., L.N. Nwakalo and B.Y. Abubakar, 2002. The biological productivity of the Yankasa sheep and the Red Sakoto goat in Nigeria. Dept.of Animal Science, University of Nigeria, Nsukka, Nigeria. Emilia Bagnicka, Ewa Wallin, Marek ukaszewicz, Tormod dny, 2007. Heritability for reproduction traits in Polish and Norwegian populations of dairy goat. Small Ruminant Research 68(3): 256-262. Christopher, D.L., 2001. Boer Goat production: progress and perspective. Proceedings of the 2001 Conference on Boer goats. Beijing, China, Oct. 20 25, 2001. Curtis, H.J., 1969. Aging. In: Hafez, E.S.E. and I.A. Dyer (Eds.), Animal growth and nutrition. Lea and Fibger, Philadelphia, USA. pp.165-174. Das, S.M., 1993. Reproductive parameters and productivity indices of Blended goats at Malya Tanzania. International Foundation for Science Workshop Animal Production Scientific. Workshop for East African IFS. Kampala, Uganda, April, 1922, 1993.
Ebozoje, M.O., and L.O. Ngere, 1995. Incidence of preweaning mortality in West African dwarf goats and their Red Sokoto halfbreds. Nigeria Journal of Animal Production 22: 93-98. Greyling, J.P.C., 2000. Reproduction traits in the Boer goat doe. Small Ruminant Research 36: 171-177. Gunes, H., P. Horst, M. Evrim and A. Valle-Zrate, 2002. Studies on improvement of the productivity of Turkish Angora goats by crossing with South African Angora goats. Small Ruminants Research 45(2): 115-122. Hailu, D., G. Mieso, A. Nigatu, D. Fufa, D. Gamada, 2006. The effect of environmental factors on preweaning survival rate of Borana and Arsi-Bale kids. Small Ruminant Research 66(1-3): 291-294. Holst, P.J.,1999. Recording and on-farm evaluations and monitoring:breeding and selection. Small Ruminant Research 34(2): 197-202. Lassoued, N., M. Rekik, H.B. Salem, M.A. Dargouth, 2006. Reproductive and productivity traits of goats grazing Acacia cyanophylla Lindl. with and without daily PEG supplementation. Livestock Science 105 (1-3): 129-136. Mtenga, L.A., G.C. Kifaro and B. Belay, 1994. Studies on factors affecting reproductive performance and mortality rates of Small East African goats and their crosses. Small Ruminants Research and Development in Africa Pp.69-74. Muir, J.P., 2006. Weight gains of meat goat kids on wheat pastures fertilized at different nitrogen levels. Small Ruminant Research 66 (1-3): 64-69. Ndlovu and Simela, 1996. Effect of season of birth and sex of kid on the production of live weaned single born kids in smallholder East African goat flocks in North East Zimbabwe. Small Ruminant Research 22: 1-6. Nett, T.M., 1987. Function of the hypothalamichypophysial axis during the post-partum period in ewe and cows. In: Maria, G.A. and M.S. Ascaso [Authors], Litter size, lambing interval and lamb mortality of Salz, Rasa Aragonesa, Romonov and F1 ewes on accelerated lambing management. Small Ruminants Research 33: 167-172. Odubote, I.K., 1996. Genetic parameters for litter size at birth and kidding interval in the West African Dwarf goats. Small Ruminant Research 20: 261-265. Oishi, K., A.K. Kahi, Y. Nagura, M. Fujita, and H. Hirooka, 2008. Effect of culling age of does on milk and meat production in Japanese-Saanen goats. Livestock Science 114 (2-3): 220-232.
Devendra, C., and G.B. McLeroy, 1982. Goat and Sheep Production in the Tropics. Longman, London, New York.
72
ztrk, A. and A.H. Akta, 1996. Effect of environmental factors on gestation length in Kenya Merino sheep. Small Ruminant Research 22: 85-88. Ricordeau, G., J. Thimonier, J.P. Poivey, M.A. Driancourt, M.T. Hochereu-De-Reviers and L. Tchamitchian, 1990. I.N.R.A. Research on the Romanov sheep breed in France: A review. Livestock Production Science 24: 305-332. Setiadi. B., D. Priyanto and Subandriyo, 1999. Morphologic characteristics and productivity of Peranakan Etawah goats in Purworejo. Proceedings of National Meeting on Animal Science. Purwokerto, August, 1999. Shrestha, J.N.B. and M.H. Fahmy, 2007. Breeding goats for meat production: 2. Crossbreeding and formation of composite population. Small Ruminant Research 67(2-3): 93-112. Sodiq, A., 2004. Doe productivity of Kacang and Peranakan Etawah goats and factors affecting them in Indonesia. Landwirtschaft 78: 121. Sodiq, A., and B. Haryanto, 2007. Non-Genetic Factors Influence on Doe Productivity Performance of Local Kejobong Goat under Village Production System. Animal Production 9(3): 123-128. Song, H.B., I.H.Jo. and H.S. Sol, 2006. Reproductive performance of Korean native goats under natural and intensive conditions. Small Ruminant Research 65(3): 284-287.
SPSS Inc., 1999a. SPSS for Windows: Base Systems Users's Guide Release 10.0. Michigan Avenue, Chicago. SPSS Inc., 1999b. SPSS Advanced Model 10.0. South Wacker Drive, Chicago. Pp.333. Steinbach, J., 1987. Evaluation of indigenous and exotic breeds and their crosses for production in unfavourable environments. Proceedings of the Fourth International Conference on Goats, Vol. II. Brasilia, Brazil. Urdaneta, L.D., G.T. Hernandes, C.M.B. Perez, O.G. Betancourt, F.G. Cossio, M.O. Arce and O.G. Betancourt, 2000. Comparison of Alpine and Nubian goats for some reproductive traits under dry tropical condition. Small Ruminant Research 36: 91-95. Wilson, R.T. and D. Light, 1986. Livestock production in Central Mali. Journal of Animal Science (6): 557567. Wilson, R.T., C.P. Peacock and A.R. Sayers, 1985. Preweaning mortality and productivity indices for goat and sheep on Masai ranch in Kenya. Animal Production (41): 201-206. Zhang, C., L. Yang, and Z. Shen, 2008. Variance components and genetic parameters for weight and size at birth in the Boer goat. Livestock Science 115 (1): 73-79.
ANIMAL PRODUCTION, Mei 2008, hlm. 73 77 ISSN 1411 2027 Terakreditasi No.56/DIKTI/Kep/2005
Vol.10 No.2
Dinamika Perkembangan Folikel dan Profil Progesteron Plasma selama Siklus Estrus pada Sapi Perah
(Follicular Development Dynamics and Plasma Progesterone Profile during the Estrous Cycle of Dairy Cows)
Prabowo Purwono Putro*, Raden Wasito, Hastari Wuryastuty dan Soedarmanto Indarjulianto
Fakultas Kedokteran Hewan Bagian Reproduksi dan Obstetri, Universitas Gadjah Mada, Yogyakarta
ABSTRACT: A total of five local Friesian cows, 4 to 5 years, healthy, reproductively sound, were used in the study to understand the development dynamics of dominant follicles and plasma progesterone profile during estrous cycle. Transrectal ultrasonographic examination using real time, B-mode, with 7.5 MHz transducer was performed daily for one full cycle to follow the development of dominant follicle and corpus luteum dynamics. Blood plasma was collected daily to determine progesterone levels using EIA technique. Follicular development dynamics and plasma progesterone levels were analyzed statistically using analyses of variance, while correlation between plasma progesterone levels and corpus luteum size were tested using correlation analyses. The length of estrous cycle in local Friesian cow was 21.00 + 1.00 days. Follicular dynamics during estrous cycle indicated only had two waves of dominant follicular development. The first wave of dominant follicle was firstly identified on day 3, reached maximum diameter (11.17 + 0.90 mm) on day 11 and identifiable until day 15. The second dominant follicle appeared on day 11, reached maximum size on day 21 (13.17 + 0.69 mm) and underwent ovulation on the next day. The increased diameter of dominant follicle from days 17 to 21 was linear with growth rate of 1.20 + 0.18 mm/day. Ovulatory dominant follicle had larger size than non-ovulatory ones (P<0.05). Corpus luteum was ultrasonically detectable from days 5 to 19 of the estrous cycle. The maximum size of corpus luteum (11.83 + 0.75 mm) attained on day 11, and then regressed substantially till day 19. Plasma progesterone level started to rise during the luteal phase, reached the peak level on day 12 (4.64 + 0.23 ng/ml) and then decreased steadily till the lowest level (0.42 + 0.05 ng/ml) at the time of estrus. The plasma progesterone profile and the corpus luteum development were concomitant each other during estrous cycle of the cow. It can be concluded that the follicular dynamics during estrous cycle in local Friesian cows only had two waves of dominant follicular development, while plasma progesterone levels manifested corpus luteum function throughout the estrous cycle. Key Words: Follicle, corpus luteum, progesterone, estrous cycle, cow
Pendahuluan
Dinamika folikel ovaria pada sapi terjadi dalam bentuk gelombang-gelombang perkembangan folikel. Suatu gelombang perkembangan folikel meliputi pertumbuhan serentak sekelompok folikel, satu diantaranya akan menjadi folikel dominan, mencapai ukuran terbesar, serta akan menekan perkembangan folikel-folikel lain yang lebih kecil (Pierson et al., 1988). Pemeriksaan ultrasonografi transrektum dari folikel memperlihatkan bahwa kebanyakan siklus estrus pada sapi mempunyai dua gelombang (Fortune, 1993 dan Garcia et al., 1999) atau tiga gelombang (Ginther et al., 2001) perkembangan folikel dominan. Suatu folikel dominan dalam perkembangannya sampai mencapai diameter
terbesar, berkembang secara linier selama kurang lebih 6 hari, dalam ukuran yang relatif sama selama 6 hari, kemudian akan mengalami regresi, ditunjukkan dengan pengecilan diameter antrum folikel. Gelombang perkembangan folikel dapat diikuti dengan pemeriksaan ultrasonografi mulai ukuran folikel pertama 4-5 mm pada hari 0 dan 10 untuk 2 gelombang dan hari 0, 9 dan 16 untuk 3 gelombang perkembangan folikel dominan (Ginther et al., 2001 dan Jaiswal et al., 2004). Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui dinamika perkembangan folikel dominan dan profil progesteron dalam plasma darah selama siklus estrus pada sapi perah bangsa peranakan Friesian Holstein (PFH).
Metode Penelitian
Sejumlah 5 ekor sapi perah betina peranakan Friesian Holstein, umur 4-5 tahun, sehat, mempunyai
73
*Korespondensi Penulis: prabowopp@yahoo.co.id
76
siklus reproduksi baik, digunakan dalam penelitian ini. Hewan dinyatakan siap untuk dipakai dalam penelitian bila skor kondisi tubuhnya sudah mencapai antara 3,0 - 3,5 dari suatu ukuran penilaian kondisi tubuh antara 1 (emasiasi) dan 5 (kegemukan) menurut Matsuda (1997). Pengamatan estrus berdasarkan pengamatan tingkah laku dan tandatanda luar sekurang-kurangnya 4 kali sehari, seperti metode yang dilaporkan oleh Sturman et al. (2000). Estrus merupakan standing estrus dan dihitung sebagai hari 0.
dengan kecepatan 3.000 rpm selama 10 menit, kemudian plasma darah dipisahkan dan dipindahkan ke tabung plastik bertutup ukuran 1 ml dan seterusnya disimpan dalam suhu -20C sampai saat dilakukan asai untuk hormon progesteron. Determinasi kuantitatif progesteron dilakukan dengan metode EIA (enzyme immunoassay), menggunakan kit komersial (Progesterone EIA KitTM, Ridgeway Science, UK). Sensitivitas teknik ini sebesar 0,10 ng/ml, koefisien intraasai dan interasai kurang dari 10%, reaksi silang terhadap steroid lain kurang dari 2%.
Pemeriksaan Ultrasonografi Ovaria

Pemeriksaan reproduksi dilakukan dengan alat ultrasonografi real-time transrektal, B-mode (Honda HS-2000, Honda Electronics Co. Ltd., Tokyo, Japan). Probe yang digunakan merupakan tranduser transrektum, mempunyai daya panjang gelombang ultrasonik 7,5 MHz, lebar probe 2 cm, serta dengan panjang kabel penyambung 3,5 meter. Sapi ditempatkan dalam suatu kandang jepit, kemudian rektum dievakuasi faesesnya dan diperiksa struktur ovarianya. Pemeriksaan ovaria dilakukan setiap hari selama satu siklus estrus penuh oleh operator yang sama. Pemeriksaan ultrasonografi ovaria dilakukan dengan metode yang diperkenalkan oleh Singh et al. (1997) serta Garcia dan Salaheddine (1998). Probe dilumasi dengan cairan lubrikansia (coupling gel) dan dimasukkan ke dalam rektum, dengan dipandu oleh genggaman tangan operator pada permukaan ovaria. Probe digunakan untuk pemindaian permukaan ovarium dari lateral ke medial dan sebaliknya beberapa kali. Pengukuran folikel dominan dan korpus luteum menggunakan metode Pierson dan Ginther (1988). Ukuran folikel dominan merupakan diameter antrum folikel, tidak termasuk dinding folikel. Folikel tampak sebagai struktur bulat, berwarna hitam, serta berbatas tegas. Korpus luteum tampak sebagai struktur dengan ekhogenisitas rendah, pada layar monitor sebagai struktur berwarna abu-abu. Ukuran korpus juga diukur dengan cara diukur rerata diameter terpanjang dan terpendek. Waktu ovulasi ditentukan dari menghilangnya folikel dominan dengan diameter lebih dari 10 mm secara tiba-tiba.
Analisis Data
Data yang dicatat meliputi dinamika perkembangan folikel dan korpus luteum, serta kadar hormon progesteron plasma darah. Dinamika perkembangan folikel dan konsentrasi progesteron plasma dianalisa menggunakan analisis varian, sedangkan korelasi antara konsentrasi progesteron plasma dan ukuran korpus luteum diuji dengan analisis korelasi. Semua perhitungan statistik dilakukan dengan menggunakan program SPSS 13.0 for Windows XP (SPSS Inc., Chicago, Illinois, USA).
Hasil dan Pembahasan

Panjang siklus estrus dari sapi PFH dalam penelitian ini adalah 21,00 + 1,00 hari. Perkembangan dinamika folikel dominan, korpus luteum, dan profil progesteron plasma selama siklus estrus disajikan pada Gambar 1 dan Gambar 2.
14
12
10
Diameter folikel (mm)
Estrus
Estrus
Pengambilan Plasma Darah dan Determinasi Progesteron Plasma

Darah diambil dari vena coccygea semua hewan penelitian, menggunakan tabung vakum 10 ml berisi lithium heparin. Tabung kemudian disentrifugasi
0 -4 -2 0 2 4 6 8
hari siklus estrus
10
12
14
16
18
20
22
24
folikel dominan pertama
folikel dominan kedua
Gambar 1. Grafik perkembangan dinamika folikel dominan pertama dan kedua selama siklus estrus pada sapi PFH
Dinamika Perkembangan Folikel (Putro et al.)
77
14 12
16 14 12 10
10 8
8 6 4
Estrus
Estrus
6 4 2 0
2 0
-4 -2 0 2 4 6 8 10 12 14 16 18 20 22 24
hari siklus estrus

korpus luteum progesteron plasma
Gambar 2. Perkembangan korpus luteum dan profil progesteron plasma selama siklus estrus pada sapi PFH
Diameter folikel dominan pada hari ke 21 pada saat menunjukkan gejala estrus adalah 13,17 + 0,69 mm. Peningkatan diameter folikel dominan dari hari 17 sampai 21 bersifat linier dengan kecepatan pertumbuhan 1,20 + 0,18 mm/hari. Tiga dari 5 folikel ovulasi (60%) folikel berkembang dalam ovarium kanan, sedangkan 2 folikel ovulasi (40%) berkembang dalam ovarium kiri. Letak di dalam ovaria kanan atau kiri dari folikel dominan, folikel ovulasi dan korpus luteum tidak mempunyai pola spesifik dari 5 siklus estrus sapi PFH yang diteliti. Dengan mengikuti perkembangan folikel secara individual, dalam penelitian ini hanya ditemukan perkembangan 2 gelombang folikel dominan dalam satu siklus estrus pada sapi PFH. Folikel dominan pertama diidentifikasi mulai hari ke 3 mencapai ukuran maksimum 11,17 + 0,90 mm sekitar hari ke 11 dan masih dapat dideteksi sampai dengan hari ke 15. Folikel dominan kedua muncul mulai hari ke 11, mencapai ukuran maksimum pada hari ke 21. Folikel ini akan mengalami ovulasi pada hari berikutnya. Folikel dominan ovulasi mempunyai ukuran yang lebih besar daripada folikel dominan non-ovulasi (13,17 + 0,69 mm versus 11,17 + 0,90 mm, P<0,05). Pada pertengahan siklus estrus, proses perkembangan dan atresia folikel lebih lambat daripada awal atau akhir siklus estrus. Hasil ini memang sedikit berbeda dengan penemuan-penemuan sebelumnya, seperti Noseir (2003) dan Fricke (2004) yang melaporkan adanya 2 dan 3 gelombang, sedangkan Salverson (2006) menemukan bahwa disamping adanya 2 dan 3 gelombang, kadang-kadang ada juga 1 dan 4 gelombang perkembangan folikel dominan pada sapi
Friesian Holstein. Dalam hal perkembangan dan regresi folikel berukuran lebih dari 5 mm serta korpus luteum dapat diikuti sepanjang siklus estrus sapi, hasil pemeriksaan ultrasonografi ini juga sependapat dengan temuan para peneliti tersebut. Adanya sedikit perbedaan pola perkembangan folikel dominan pada sapi PFH di daerah tropis ini diduga erat kaitannya dengan perbedaan lingkungan, antara lain termasuk status nutrisi, suhu, kelembaban udara dengan sapi Friesian di daerah subtropis. Data diameter folikel terbesar dari penelitian ini secara konsisten sama dengan laporan penelitipeneliti lain dari berbagai hari siklus estrus pada sapi perah (Fortune, 1993; Garcia et al., 1999; Ginther et al., 2001; Fricke, 2002, 2004; Fortune et al., 2004). Pemeriksaan ovaria menunjukkan bahwa perkembangan suatu folikel anovulasi berdiameter lebih dari 10 mm dari hari ke 0 sampai hari ke 8, serta perkembangan selektif folikel preovulasi dari hari ke 17 sampai hari ke 21. Pola perkembangan folikel dominan selama siklus estrus dari penelitian ternyata sama dengan yang dilaporkan oleh Jaiswal et al. (2004). Meskipun dalam penelitian ini pemeriksaan folikel dominan hanya berdasarkan pada morfologinya saja, hasil penelitian memunculkan dugaan bahwa pertumbuhan folikel merupakan suatu proses dinamik yang dikendalikan oleh proses lokal dan sistemik (Vassena et al., 2003; Fortune et al., 2004). Kecepatan tumbuh yang lebih tinggi pada folikel dominan kedua menjelang ovulasi, menunjukkan bahwa dominasi hormon progesteron pada fase lutea berakibat mengurangi kecepatan tumbuh folikel. Hormon progesteron ini mempunyai pengaruh umpan balik negatif terhadap produksi hormon gonadotropin, seperti laporan oleh Sirois dan Fortune (1988). Pola dinamika folikel ovaria setengah pertama siklus estrus, hari ke 3 sampai 11, ditandai dengan perkembangan folikel dominan 1, akhirnya regresi dan menghilang setelah hari ke 15. Perkembangan folikel dominan kedua, hari ke 11 sampai estrus berikutnya, ditandai dengan perkembangan folikel baru, akhirnya mengalami ovulasi setelah estrus. Pola dinamika perkembangan folikel ovulasi yang sama juga diamati oleh Savio et al. (1988) dan Ginther et al. (2001) yang mengikuti perkembangan folikel selama siklus estrus pada sapi Friesian Holstein. Pada pertengahan siklus estrus, proses perkembangan dan atresia folikel lebih lambat daripada awal atau akhir siklus estrus, diduga karena
U k u r a n k o r p u s lu te u m ( m m )
K a d a r p r o g e s t e r o n ( n g /m l)
76
hambatan dari hormon progesteron pada sekresi hormon gonadotropin, seperti yang dilaporkan juga oleh Fortune et al. (2004). Sesuai dengan pengamatan Lobb dan Dorrington (1993), Burke et al. (1998) serta Ginther et al. (2001) bahwa perkembangan folikel dominan menghambat pertumbuhan lebih lanjut dari folikel-folikel kecil pada kedua ovaria, karena terjadinya regulasi intraovaria dalam perkembangan lebih lanjut folikel. Korpus luteum dapat dideteksi ultrasonik mulai hari ke 5 sampai 19 dari siklus estrus. Ukuran maksimum korpus luteum 11,83 + 0,75 mm dicapai pada hari ke 11 dari siklus estrus. Ukuran korpus luteum kemudian mengalami regresi secara tetap sampai 2 hari menjelang estrus, akhirnya tidak dapat diikuti lagi. Perubahan dalam rerata kadar progesteron plasma paralel dengan ukuran korpus luteum sepanjang siklus estrus. Pola perkembangan korpus luteum yang mulai berkembang pada hari ke 2, mencapai ukuran maksimum hari ke 11, kemudian berangsur-angsur mengalami regresi, sampai hari ke 20 tidak dapat dideteksi lagi secara ultrasonografi. Kadar hormon progesteron selama siklus estrus, mulai meningkat setelah memasuki fase lutea, mecapai puncak hari ke 12 dan berangsur-angsur menurun hingga mencapai 0,42 + 0,05 ng/ml pada saat estrus. Perubahan-perubahan pola perkembangan korpus luteum dengan kadar hormon progesteron terjadi secara paralel satu sama lain sepanjang siklus estrus sapi, seperti ditunjukkan dengan tingginya koefisien korelasi (r = 0,913). Kadar progesteron mulai meninggi seiring dengan meningkatnya ukuran korpus luteum, mencapai kadar puncaknya sewaktu ukuran korpus luteum mencapai maksimum, kemudian kadarnya menurun pada saat ukuran korpus luteum mengalami regresi. Kenyataan ini sependapat dengan tulisan Tom et al. (2000), OConnor (2003), Shearer (2004). dan Salverson (2006) bahwa dinamika perkembangan dan regresi korpus luteum dapat diikuti dengan melihat profil kadar progesteron plasma darah.
maksimum hari 21, serta mengalami ovulasi pada hari berikutnya. Profil progesteron plasma darah mencerminkan status fungsi korpus luteum selama siklus estrus.
Daftar Pustaka
Burke, J. M., J.H. Hampton, C.R. Staples and W.W. Thatcher, 1998. Body condition influences maintenance of a persistent first wave dominant follicles in dairy cows. Theriogenology 49: 751-760. Fortune, J.E., 1993. Follicular dynamics during the bovine estrous cycle: A limiting factor in improvement of fertility. Animal Reproduction Science 33: 111-125. Fortune, J.E., G.M. Rivera and M.Y. Yang, 2004. Follicular development: the role of the follicular microenvironment in selection of the dominant follicle. Animal Reproduction Science 82-83: 109126. Fricke, P. M., 2002. Scanning the future-ultrasonography as a reproductive management tool for dairy cattle, Journal of Dairy Science 85: 1918-1926. Fricke, P. M., 2004. Potential applications and pitfalls of ultrasound for managing reproduction in dairy cattle. Journal of Dairy Science 87: 912-916. Garcia, A. and M. Salaheddine, 1998. Ultrasonic morphology of the corpora lutea and central lutea cavities during selection of recipients for embryo transfer. Theriogenology 49: 243. (Abstract). Garcia, A., G.C. Van Der Weijden, B. Colenbrander and M.M. Bevers, 1999. Monitoring follicular development in cattle by real-time ultrasonography: A Review. Veterinary Reord 145: 334-340. Ginther, O. J., D. R. Bergfelt, M. A. Beg and K. Kot, 2001. Follicle selection in cattle: Relationship among growth rate, diameter ranking, and capacity of dominance. Biology of Reproduction 65: 345350. Jaiswal, R. S., J. Singh and G.P. Adams, 2004. Developmental pattern of small antral follicles in the bovine ovary. Biology of Reproduction 71: 12441251. Lobb, D.K. and J. Dorrington, 1993. Intraovarian regulation of follicular development. Animal Reproduction Science 28: 343-354. Matsuda, S., 1997. Body condition score of donor and recipient for cattle embryo transfer. Manual of
Kesimpulan
Dinamika folikel selama siklus estrus pada sapi peranakan Friesian Holstein (PFH) hanya ditandai dengan 2 gelombang pertumbuhan folikel dominan. Folikel dominan pertama muncul hari 3-15 mencapai ukuran maksimum sekitar hari 11. Folikel dominan kedua muncul mulai hari 11, mencapai ukuran
Dinamika Perkembangan Folikel (Putro et al.)
77
Bovine Embryo Transfer. Transfer Center, Japan.
Fukushima
Embryo
Noseir, W.M.B., 2003. Ovarian follicular activity and hormonal profile during estrous cycle in cows: the development of 2 versus 3 waves. Reproduction Biology and Endocrinology 1: 50-56. OConnor, M.L., 2003. Milk Progesterone Analysis for Determining reproductive status. College of Agricultural Sciences. Cooperative Extension Compendium. The Pennsylvania State University. Pierson, R. A. and O.J. Ginther, 1988. Ultrasonic imaging of the ovaries and uterus in cattle. Theriogenology 29: 21-37. Pierson, R. A., J.P. Kastelic and O.J. Ginther, 1988. Basic principles and techniques for transrectal ultrasonography in cattle and horses. Theriogenology 29: 1-19. Salverson, R., 2006. Manipulation of the oestrus cycle in cow. South Dakota State University-Cooperative Extension Service-USDA. Savio, J. D., L. Keenan, M.P. Boland and J.F. Roche, 1988. Pattern of growth of dominant follicles during the estrous cycle in heifers. Journal of Reproduction and Fertility 83: 663-671.
Shearer, J. K., 2004. The milk progesterone test and its applications in dairy cattle reproduction. University of Florida. Cooperative Extension Service Compendium. Singh, J., R.A. Pierson and G.P. Adams, 1997. Ultrasound image attributes of the bovine corpus luteum: structural and functional correlates. Journal of Reproduction and Fertility 109 : 35 - 44. Sirois, J. and J.E. Fortune, 1988. Ovarian follicular dynamics during estrous cycle in heifers monitored by real-time Ultrasonography. Biology of Reproduction 39: 308-317. Sturman, R.W., J.J. Brockway and A.P. Barry, 2000. Fixed time artificial insemination in dairy cows. Theriogenology 49: 1338-1344. Tom, J.W., R.A. Pierson and G.P. Adams, 2000. Quantitative echotexture analysis of bovine corpora lutea. Theriogenology 49: 1345-1352. Vassena, R., G.P. Adams, R.J. Mapletoft, R.A. Pierson and J. Singh, 2000. Ultrasound image characteristics of ovarian follicles in relation to oocyte competence and follicular status in cattle. Animal Reproduction Science 76: 25-41.
Vol.10 No.2
Histologis Ovarium Domba Pascatransplantasi Intrauterin pada Kelinci Pseudopregnansi

(The Histological of Ewe Ovarium Post-Intrauterine Transplantation to Pseudopregnancy Rabbit)
Ramadhan Sumarmin1, Arief Boediono2, Adi Winarto2, dan Tutty Laswardi Yusuf2
1 2
Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam, Universitas Negeri Padang Fakultas Kedokteran Hewan,Institut Pertanian Bogor
ABSTRACT: The objective of this study was to evaluate the histologycal of ewe ovarium post-intrauterin transplantation to pseudopregnancy rabbit. The experiment was concerned with the 1 or 7 days of pseudopregnancy to receive the ewe ovarian transplant. Post transplantation 5, 7 or 9 days of ewe ovarium were recollected. To determine histologically postintrauterine transplantation of ewe ovarium, the histological preparat was prepared by the paraffin methods followed by HE staining. The result showed that there were follicle development with all stages of follicle dynamics (Primordial, Primary, Prentral and Antral follicle stages) in all group of treatment. The ewe ovarian post-intrauterine transplantation damaged was found as follicles degeneration, ephitellial damaged and the formation of protein aggregate. It can be concluded that the histological of ewe ovarium post-intrauterine transplantation in pseudopregnancy rabbit is still good in the 5 or 7 days after intrauterine transplantation in pseudopregnancy rabbit. Key Words: Histological, post-intrauterine transplantation, ewe ovarium
Pendahuluan
Ovarium pada hewan betina merupakan gudang dan tempat produksi oosit. Setiap ovarium mengandung oosit dalam jumlah yang sangat banyak namun hanya sedikit sekali dari jumlah oosit tersebut yang dimatangkan dan diovulasikan selama masa subur atau pada masa reproduktif (Gilbert, 1994). Untuk meningkatkan jumlah oosit yang dapat dimanfaatkan dari suatu ovarium berbagai teknik terus dikembangkan termasuk teknik preservasi terhadap ovarium. Salah satu teknik yang dikembangkan adalah preservasi ovarium dengan cara transplantasi ovarium intraspesies atau interspesies baik dari ovarium yang segar maupun ovarium yang telah dibekukan (Parkening et al., 1985; Gunasena et al., 1997; Liu et al., 2000; Kim et al., 2001; Liu et al., 2002; Cushman et al., 2002; Snow et al., 2002). Transplantasi ovarium secara autologus pada tikus yang berumur 23 hari memperlihatkan bahwa ovarium yang berasal dari tikus yang masih belum dewasa (immature) yang ditransplantasikan, pada
*Koresponden Penulis: sumarmin68@yahoo.co.id . HP.081389958976
ovarium tersebut ditemukan adanya revaskularisasi pembuluh darah. Ovarium kembali memiliki kemampuan untuk mengontrol sekresi gonadotropin melalui mekanisme umpan balik negatif hormon steroid dalam waktu satu minggu setelah transplantasi meskipun belum terjadi anastomosis pembuluh darah (Dissen et al., 1994). Ovarium yang sebelumnya telah dibekukan jika ditransplantasikan memperlihatkan pula bahwa jaringan ovarium toleran terhadap proses pembekuan dan thawing. Potongan bagian korteks ovarium domba yang telah dibekukan, tiga minggu kemudian di-thawing dan ditransplantasikan secara autologus pada daerah pelvis, ternyata mampu kembali berperan dalam produksi FSH dan mencapai keadaan normal setelah empat bulan kemudian. Pada domba tersebut secara normal juga terjadi perkawinan dan kebuntingan (Gosden et al., 1994). Teknologi reproduksi bantuan telah banyak dikembangkan dan dilakukan untuk memecahkan permasalahan reproduksi dan juga untuk melakukan preservasi ovarium sebagai sumber gamet betina pada hewan-hewan yang terancam punah atau hewan ternak betina genetik unggul. Meskipun secara in vitro atau superovulasi dapat dihasilkan oosit matang (mature oocytes) dalam jumlah yang lebih banyak, namun dari jumlah itu masih sedikit sekali oosit yang dapat difertilisasi. Hal ini memperlihatkan adanya
78
Histologis Ovarium Domba (Sumarmin et al.)
83
keterbatasan dalam maturasi oosit secara in vitro (Liu et al., 2002; Snow et al., 2002). Salah satu usaha untuk mendapatkan oosit matang secara in vivo adalah melalui teknik transplantasi ovarium. Pada transplantasi interspesies diharapkan akan terjadi proses pengaktifan folikel primordial, pematangan terhadap inti dan sitoplasma oosit secara sempurna. Metode ini merupakan salah satu alternatif pemecahan permasalahan untuk preservasi ovarium sebagai sumber gamet (Cushman et al., 2002; Snow et al., 2002). Transplantasi interspesies lainnya dilakukan secara intrauterin oleh Kagabu dan Umezu (2001). Ovarium mencit yang sudah dibekukan dan kemudian di-thawing berhasil ditransplantasikan ke dalam rongga uterus tikus. Pada penelitian ini ditemukan banyak folikel yang berkembang dengan baik. Folikel tersebut semakin banyak ditemukan jika sebelum transplantasi interspesies dilakukan, pada tikus resipien terlebih dahulu diinfus atau ditransfusikan cairan darah mencit. Evaluasi terhadap histologis ovarium domba yang ditransplantasikan secara intrauterin pada kelinci pseudopregnansi perlu dilakukan sebagai dasar untuk melakukan penelitian tentang viabilitas oosit domba yang berasal dari ovarium pascatransplantasi intrauterin pada kelinci pseudopregnansi. Penelitian ini bertujuan untuk mengkaji histologis ovarium domba pascatransplantasi intrauterin pada kelinci pseudopregnansi. Hasil penelitian ini diharapkan dapat memberikan kontribusi terhadap penerapan dan pengembangan teknologi transplantasi ovarium interspesies terutama yang dilakukan dalam rangka preservasi dan optimalisasi pemanfaatan ovarium.
Materi Percobaan dan Tata Kerja

Ovarium Domba Ovarium domba dikoleksi dari Rumah Potong Hewan (RPH) pada pagi hari pukul (06.00 07.00 WIB). Sampel ovarium ditempatkan dalam kantong plastik yang telah diisi dengan larutan garam fisiologis 0,9% dan antibiotik penisilin G dan diletakkan dalam termos yang telah berisi es batu. Segera setelah sampai di laboratorium sampel ovarium domba dibersihkan dari jaringan lain yang terikut pada saat sampling. Hewan Percobaan Hewan percobaan yang digunakan dalam penelitian ini adalah 24 ekor kelinci betina jenis New Zealand White yang telah dewasa kelamin dengan berat badan 2,5 3 Kg. Untuk mendapatkan kelinci betina bunting semu hari pertama, pada kelinci betina dilakukan ulas vagina (kopulasi tiruan) pada pukul enam pagi dan empat jam setelah kopulasi tiruan, kelinci dapat dijadikan sebagai resipien. Pakan berupa butiran (pellet) dengan komposisi kandungan sebagaimana termuat dalam lampiran 1. Pakan diberikan sebanyak 100 gram/ekor/hari dan air minum diberikan secara ad libitum. Kandang kelinci yang digunakan dalam penelitian ini adalah kandang individual yang terbuat dari kawat dengan ukuran 75 cm panjang x 40 cm lebar x 50 cm tinggi. Setiap kandang dilengkapi masing-masing dengan tempat pakan dan tempat minum. Penyediaan Ovarium Domba untuk Donor Ovarium domba dikoleksi dari RPH Ciampea ditempatkan dalam plastik yang berisi larutan garam fisiologis 0,9% yang dilengkapi antibiotik penisilin G 100 IU/ml, kemudian diletakkan dalam wadah termos yang telah diisi dengan es batu. Setelah sampai di laboratorium ovarium domba dibersihkan dari jaringan lain yang menyertainya pada saat sampling dengan menggunakan gunting dan pinset. Hal ini dilakukan dalam larutan garam fisiologis 0,9% yang dilengkapi antibiotik penisilin G 100 IU/ml di dalam petridish berdiameter 10 cm. Ovarium yang telah dibersihkan kemudian dibelah menjadi empat bagian dan sementara potongan jaringan ovarium tersebut ditempatkan dalam petridish berpenutup yang berisi larutan garam fisiologis 0,9% yang dilengkapi antibiotik penisilin G 100 IU/ml. Potongan jaringan ovarium siap untuk ditransplantasikan.
Metode Penelitian
Waktu dan Tempat Penelitian
Penelitian ini dilaksanakan di Unit Rehabilitasi Reproduksi (URR) Departemen Reproduksi, Klinik dan Patologi, Fakultas Kedokteran Hewan IPB, dari bulan Agustus 2004 sampai dengan Januari 2005.
Rancangan Percobaan
Penelitian ini menggunakan rancangan acak lengkap (RAL) dengan perlakuan tiga rentang waktu transplantasi yang berbeda masing-masing 5, 7 atau 9 hari. Setiap kelompok perlakuan dilakukan dengan ulangan sebanyak 6 kali.
84
Penyediaan Kelinci Resipien dan Teknik Transplantasi Kelinci betina resipien selanjutnya dianestesi dengan menginjeksikan 20 mg ketamin/kg b.b. (Ilium, NSW, 100 mg ketamin/mL) dan selang 10 menit kemudian dengan 2 mg xylazine/kg b.b. (Ilium, NSW, 20 mg xylazine/mL) yang dilakukan secara intramuskular. Setelah kelinci teranestesi diletakkan di atas bak bedah dan dicukur rambut di sekitar daerah linea alba serta diusap bagian yang akan dibedah dengan alkohol 70% (Techakumphu et al., 1987; Forcada dan Lopez, 2000). Pembedahan dilakukan pada daerah linea alba sepanjang 3 4 cm (kulit, otot perut dan peritoneum). Kemudian dilanjutkan dengan membuat insisi pada punggung uterus sepanjang 1 cm. Melalui celah insisi tersebut dimasukkan potongan jaringan ovarium domba dan didorong ke arah kornua uteri. Transplantasi potongan jaringan ovarium dilakukan empat buah untuk setiap kornua uteri kelinci. Setelah ovarium domba ditransplantasikan, insisi pada uterus dijahit dan setelah itu dilakukan juga penjahitan terhadap peritoneum, otot perut dan kulit untuk menutup luka. Sesudah proses penjahitan luka selesai, kemudian di atas jahitan tersebut dioleskan betadine dan kelinci dipindahkan kembali ke kandangnya menjelang siuman. Kelinci resipien kemudian dipelihara kembali dan diperhatikan proses penyembuhan lukanya setiap hari. Agar tidak terjadi infeksi dilakukan pengolesan betadine setiap pagi dan sore hari sampai luka benar-benar sembuh. Pengolesan betadine dilakukan setiap pagi dan sore hari sampai luka benar benar sembuh agar tidak terjadi infeksi. Pembuatan Preparat Histologis ovarium domba pascatransplantasi Ovarium domba pascatransplantasi yang dikoleksi kembali pada hari ke 5, 7 atau 9 kemudian difiksasi dalam larutan Bouin selama 24 jam. Untuk pengerjaan pembuatan preparat selanjutnya dilakukan sesuai dengan Metode Parafin dan pewarnaan Hematoksilin-Eosin (Kiernan, 1990).
Analisis Data
Data yang didapatkan pada penelitian ini selanjutnya dideskripsikan dengan acuan buku Basic Histology (Junqueira dan Corneiro, 1986).

Setelah dilakukan percobaan didapatkan hasil pengamatan seperti yang terdapat pada gambargambar berikut. Berdasarkan Gambar 1 dapat diketahui bahwa pada semua preparat baik preparat ovarium kontrol maupun preparat ovarium domba pascatransplantasi dapat ditemukan folikel primordia dan folikel primer. Namun demikian struktur jaringan ovarium domba kontrol pada bagian korteks terlihat lebih teratur jika dibandingkan struktur korteks pada jaringan ovarium pascatransplantasi. Beberapa kerusakan jaringan yang umum ditemukan pada kelompok perlakuan adalah terjadinya kerusakan lapisan epitel ovarium, hubungan antar sel pada bagian korteks dan medula ovarium yang mulai berdegenerasi sehingga jarak antar sel semakin lebar (c) dan terjadinya agregat protein pada bagian korteks sebagai hasil berdegenerasinya sel-sel folikel dan jaringan ikat. Hal yang sama ditemukan pada penelitian Cushman et al. (2002) yang melakukan transplantasi bagian korteks ovarium sapi pada membran embrionik ayam. Berdasarkan hasil tersebut juga dapat diketahui bahwa kerusakan jaringan korteks terparah ditemukan pada perlakuan ovarium domba pascatransplantasi 9 hari. Kerusakan jaringan ovarium pascatransplantasi pada perlakuan 5 atau 7 hari relatif sama yaitu pada struktur korteks dari kedua perlakuan tersebut ditemukan jaringan epitel yang rusak dan terbentuknya rongga antar sel pada jaringan ikat. Pada Gambar 2 dapat dilihat bahwa pada kontrol dan kelompok perlakuan ditemukan adanya folikel preantral dengan keadaan zona Pellusida yang baik serta memiliki struktur inti yang jelas. Struktur folikel preantral perlakuan 5 hari pascatransplantasi adalah struktur folikel yang paling mirip dengan struktur folikel preantral kelompok kontrol dimana zona Pelusida dan inti sel oosit serta susunan sel-sel pengiring (sel granulosa, teca interna dan teca eksterna) dengan mudah dan jelas dapat diamati. Pada kelompok perlakuan 7 atau 9 hari pascatransplantasi meskipun zona Pelusida dan inti
Pengamatan Variabel Percobaan

Pengamatan terhadap perubahan histologis dari ovarium domba pascatransplantasi intrauterin pada kelinci dilakukan dengan membandingkan histologis ovarium domba pascatransplantasi dengan histologis ovarium domba kelompok kontrol.
83
sel oosit dapat dengan mudah teramati namun untuk struktur sel pengiring keadaanya tidak seteratur pada perlakuan 5 hari pascatransplantasi dan kontrol. Selsel pengiring mulai terlihat berdegenerasi dan membentuk rongga antar sel. Folikel preantral inilah yang nantinya berpotensi untuk dimatangkan (maturation) dan difertilisasi secara in vitro (Vasena et al., 2003). Gambar 3 dapat dilihat bahwa pada semua kelompok perlakuan ditemukan folikel antral meskipun tidak memiliki kemiripan struktur folikel yang sama. Perbedaan struktur folikel antral yang sangat menyolok terutama ditemukan pada kelompok perlakuan pascatransplantasi 9 hari. Perbedaan yang ditemukan pada folikel antral dari perlakuan 9 hari yaitu ukuran folikel yang relatif kecil meskipun dengan sel oosit yang berukuran relatif sama dengan kontrol dan perlakuan lainnya. Disamping perbedaan tersebut, hal lain yang juga bisa dilihat adalah struktur sel pengiring oosit yang membangun antrum tidak teratur dan sukar untuk ditentukan bagian selsel granulosa, teca interna dan teca eksterna. Kemungkinan pada sel pengiring tersebut sedang terjadi degenerasi sel atau autolisis sebagai akibat lamanya transplantasi. Jika peristiwa autolisis terjadi lebih cepat maka
sebagian sel-sel folikel berdegenerasi dan menyisakan agregat protein (Gambar 4). Agregat protein ini tidak hanya berasal dari sel-sel folikel yang berdegenerasi tetapi juga berasal dari degenerasi jaringan ikat yang terdapat pada bagian korteks ovarium. Kemungkinan peristiwa berdegenerasinya sel-sel atau jaringan tersebut disebabkan oleh tidak cukupnya ketersediaan sumber nutrisi atau energi untuk tetap mendukung proses metabolisme sel secara sempurna (Tilly, 1998). Sumber energi yang ada berupa sekreta uterus sedianya ditujukan sebagai sumber nutrisi di awal perkembangan embrio menjelang implantasi. Kerusakan struktur ovarium yang terjadi sejalan dengan lamanya transplantasi dilakukan, juga ditemukan kerusakan struktur dari Korpus Luteum. Jika dibandingkan dengan kontrol, struktur korpus Luteum pada semua perlakuan terlihat berdegenerasi dan semakin tinggi tingkat degenerasi sel pada perlakuan 9 hari pascatransplantasi. Hal ini ditandai dengan ditemukan rongga antar sel yang semakin besar dan juga sel-sel korpus Luteum yang mulai berdegenerasi dan membentuk agregat protein (Gambar 5). Pada kerusakan yang lebih parah terjadi pemisahan korpus Luteum.
a A
b 10
a B
b 10
a a 10 D c 10 b
b C
Gambar 1. Gambaran histologis bagian korteks dari ovarium. A. Histologis Ovarium Kontrol. B. Histologis ovarium pascatransplantasi 5 hari. C. Histologis ovarium pascatransplantasi 7 hari. D. Histologis ovarium pascatransplantasi 9 hari. a Folikel primordial. b Folikel primer. c Rongga antar sel
84
100
B
100
100
100
Gambar 2. Gambaran histologis tingkat perkembangan folikel sekunder ovarium domba. A. Histologis ovarium kelompok kontrol. B. Histologis ovarium kelompok pascatransplantasi 5 hari. C Histologis ovarium kelompok pascatransplantasi 7 hari. D. Histologis ovarium pascatransplan-tasi 9 hari.
A 10
B 10
C 10
D 10
Gambar 3. Gambaran histologis folikel antral pada berbagai perlakuan. A Histologis ovarium kontrol. B Histologis ovarium pascatransplantasi 5 hari. C Histologis ovarium pascatransplantasi 7 hari. D Histologis ovarium pascatransplantasi 9 hari.
83
b a
10
Gambar 4. Gambaran histologis terjadinya degenerasi sel (a) dan pembentukkan agregat protein (b).
CL CL A
100 B 100
CL
CL
C
100
100
Gambar 5. Gambaran histologis jaringan Corpus Luteum. A Histologis ovarium kelompok kontrol B Corpus Luteum pascatransplantasi 5 hari. C Corpus Luteum pascatransplantasi 7 hari D Corpus Luteum pascatransplantasi 9 hari
Korpus Luteum yang berdegenerasi ini diduga karena peristiwa autolisis dan juga saat terpisah dari domba donor maka fungsi korpus Luteum tidak bisa dipertahankan karena tidak adanya faktor luteotropik yang mendukungnya, sedangkan media nutrisi yang berasal dari sekreta uterus kelinci kemungkinan tidak mampu mendukung kebutuhan energi atau nutrisi untuk metabolisme sel-sel korpus Luteum (Tilly, 1996;1998). Hal inilah yang menyebabkan korpus Luteum menjadi berdegenerasi.
Kesimpulan
Dari hasil dan pembahasan tentang histologis jaringan ovarium domba pascatransplantasi
intrauterin pada kelinci pseudopregnansi dapat diambil kesimpulan bahwa masih dapat ditemukan folikel primordial, folikel primer, folikel preantral dan antral pada semua perlakuan. Kerusakan jaringan yang ditemukan yaitu kerusakan jaringan epitel, degenerasi sel folikel dan jaringan ikat serta ukuran folikel yang tidak sejalan dengan perkembangannya terutama ditemukan pada perlakuan 9 hari pascatransplantasi. Perlu dilakukan penelitian lanjutan mengenai kualitas oosit yang ditemukan sampai hari ke 7 pascatransplantasi untuk mengetahui viabilitas oosit domba pascatransplantasi intrauterin pada kelinci pseudopregnansi serta kemampuannya untuk berkembang setelah IVF.
84
Ucapan Terimakasih
Penulis mengucapkan terimakasih kepada DP3M DIKTI yang telah membiayai penelitian ini melalui dana Hibah Tim Pascasarjana tahun 2005-2007.
Junqueira, L.C., and J. Corneiro, 1986. Histologi Dasar. Edisi 2. Penterjemah Adji Dharma.EGC Press. Jakarta. Kagabu, S., and M. Umezu, 2001. Effect of blood transfusion on the survival rate of cryopreserved mouse ovaries transplanted into rat uterine cavity. Mammakan Ovarium Research 18: 58 61. Kiernan, J.A., 1990. Histological and Histochemical Methods. 2nd edition. Pergamon Press. Oxford. Kim, S.S., J. Radford, M. Harris, J. Varley, A. Rutherford, B. Lieberman, S. Shalet, and R.Gosden, 2001. Ovarian tissue harvested from lymphoma patients to preserve fertility may be save for autotransplantation. Biology Reproduction 16(10): 2056 2060. Liu, J., E.J. Van der, B.R. Van den, F. Dumortier, and M. Dhont, 2000. Maturation of mouse primordial follicles by combination of grafting and in vitro culture. Biology Reproduction 62: 1218 1223. Liu, J., E.J. Van der, B.R. Van den, and M. Dhont, 2002. Early massive follicle loss and apoptosis in heterotropically grafted newborn mouse ovaries. Human Reproduction 17(3): 605 611. Parkening, T.A., T.J. Collins, and F.F.B. Elder, 1985. Orthotopic ovarian transplantations in young and aged C57BL/6J mice. Biology Reproduction 32: 989 997. Snow, M., S.L. Cox, G. Jenkin, A. Trounson, and J. Shaw, 2002. Generation of live young from xenografted mouse ovaries. Science 297: 2227. Steel, R.G.D. and J.H. Torrie, 1993. Prinsip dan Prosedur Statistik. Penterjemah Soemantri. Gramedia. Jakarta. Techakumphu, M., S. Wintenberger-Torres, and C. Sevellec, 1987. Survival of rabbit embryos after synchronous or asynchronous transfer. Animal Reproduction Science 12: 297 304. Tilly J., 1996. Apoptosis and ovarian function. Reproduction 1: 162-172. Tilly J., 1998. Cell death and species propagation: molecular and genetic aspects of apoptosis in the vertebrate female gonad, in: When Cells Die. Edited by Lokhsin et al. Willey-Liss. Toronto. Vasena R, R.J. Mapletoft, S. Allodi, J. Singh, and G.P. Adam, 2003. Morphology and development competence of bovine oocytes relative to follicular status. Theriogenology 60: 923-932.
Daftar Pustaka
Colby, E.D., 1986. The Rabbit dalam Current Theraphy in Theriogenology 2. Morrow DA. Editor. WB Sounders Co. Philadelphia. Cushman, R.A., C.M. Wahl, and J.E. Fortune, 2002. Bovine ovarian cortical pieces grafted to chick embryonic membranes : a model for studies on the activation of primordial follicles. Human Reproduction 17(1): 48 54. Dissen, G.A., H.E. Lara, W.H. Fahrenbach, M.A. Costa and S.R. Ojeda, 1994. Immature rat ovaries becomes revascularized rapidly after autotransplantation and show a gonadotrophine-dependent increase in angiogenic factor gene expression. Endocrinology 134(3): 1146 -1153. Forcada, F., and M. Lopez, 2000. Repeated surgical embryo recovery and embryo production in rabbit. Animal Reproduction Science 64: 121 126. Gilbert F. Scott, 1994. Developmental Biology. 4th edition. Sinauer Association, Inc. Sunderland, Massachusetts. P. 803-805. Gosden, R.G., M.I. Boulton, K. Grant, and R. Webb, 1994a. Follicular development from ovarian xenografts in SCID mice. Reproduction Fertility 101: 619 623. Gosden, R.G., D.T. Baird, J.C. Wade, and R. Webb, 1994b. Restoration of fertility to oophorectomized sheep by ovaries autografts stored at -196 degrees C. Human Reproduction 9(4): 597 603. Gunasena, K.T., J.R. Lakey, P.M. Vilines, E.S. Critser, and J.K. Critser, 1997. Allogeneic and xenogeneic transplantation of cryopreserved ovarian tissue to athymic mice. Biology Reproduction 57(2): 226 231. Gunasena, K.T., J.R. Lakey, P.M. Vilines, M. Bush, C. Raath, E.S. Critser, L.E. Mc Gann, and J.K. Critse, 1998. Antral follicles develot inxenografted cryopreserved African elephant (Loxodonta africana) ovarian tissue. Animal Reprod Science 53: 265 175. Hafez, E.S.E., 1970. Reproduction and Breeding techniques for Laboratory Animal. Lea and Febiger. Philadelphia.
ANIMAL ANIMAL PRODUCTION, Mei 2008, hlm. 85 89 ISSN 1411 2027 Terakreditasi No.56/DIKTI/Kep/2005
Vol.10 No.2
Pengaruh Jenis Kelamin dan Bobot Potong terhadap Karakteristik Fisik Karkas Kelinci Peranakan New Zealand White
(Effects of Sex and Slaughter Weight on Physical Characteristics of Carcass of New Zealand White Crossbred)
Imbang Haryoko dan Titik Warsiti
ABSTRACT: The objective of the experiment was to investigate the effects of sex and slaughter weight on physical characteristics of carcass of New Zealand White crossbred rabbits. 32 heads of New Zealand White crossbred rabbits (16 male and 16 female) by individual cages were involved in this study. Two levels of nested classifications were applied in this study. Male and female rabbits were grouped by slaughter weight (SW) SW1 (1,259.38 16.44 g), SW2 (1,674.88 26.55 g), SW3 (2,076.25 26.59 g), and SW4 (2,398.50 19.41 g), and four replications. Variables consist of carcass weight and percentage, lean, bone, and fat weight and percentages. Analysis of variance and least significant test (LSD) were applied in this. This study reavealed that sex did not affect significantly (P>0.05) in all variables, whereas slaughter weight had significant effect (P<0.01) on all variables measured. It can be concluded that physical characteristics of carcass of male rabbits are similar to those of female with the same SW, but SW significantly increase physical carcass characteristics, except to percentage of bone. Key Words: Rabbits, carcass characteristic, slaughter weight, sex, New Zealand White
Pendahuluan
Kelinci mempunyai potensi sangat besar untuk dikembangkan sebagai ternak penghasil daging seperti halnya ternak potong lain (domba, kambing, babi dan sapi). Modal yang dibutuhkan dan pemeliharaan kelinci relatif lebih murah dan sederhana dibandingkan dengan komoditi ternak potong lainnya, sehingga sangat potensial untuk mendukung percepatan swasembada daging nasional. Hingga saat ini pemeliharaan kelinci lebih banyak digunakan sebagai hewan kesayangan atau hewan percobaan di laboratorium daripada sebagai ternak penghasil daging. Pertumbuhan dan perkembangan ternak memiliki berhubungan dengan faktor umur, jenis kelamin dan bobot hidup. Kelinci mengalami pertumbuhan dipercepat (accelarating growth phase) sejak dilahirkan sampai umur dewasa kelamin. Pertumbuhan lambat (retarding growth phase) terjadi setelah kelinci mencapai dewasa kelamin hingga dewasa tubuh. Perubahan yang terjadi selama pertumbuhan berkaitan dengan pertambahan bobot badan, perubahan bentuk tubuh, dan perubahan komposisi tubuh. Ternak jantan pada umumnya lebih diprioritas-
kan sebagai ternak potong karena memiliki laju pertumbuhan yang lebih cepat daripada betina sehingga untuk mencapai bobot potong yang sama, kelinci jantan memerlukan waktu yang lebih cepat daripada betina. Produksi karkas hasil kelinci jantan diharapkan lebih tinggi daripada kelinci betina sehingga pemeliharaan menjadi lebih efisien. Laju pertumbuhan kelinci yang tinggi akan mempengaruhi bobot potong dan karkas yang dihasilkan. Pada usaha ternak pedaging, agar diperoleh produksi karkas optimal maka pemotongan dilakukan pada saat umur dan bobot potong yang tepat. Semakin tinggi bobot potong kelinci diharapkan produksi karkas yang dihasilkan juga semakin besar. Kondisi tersebut sekaligus dapat memperbaiki karakteristik fisik karkas (bobot dan persentase daging, tulang dan lemak karkas). Laju pertumbuhan, status nutrisi, jenis kelamin dan bobot tubuh merupakan faktor yang berhubungan erat satu sama lain, secara sendiri atau kombinasi dapat mempengaruhi komposisi tubuh atau karkas yang dihasilkan (Soeparno, 1998). Penelitian ini bertujuan mengkaji pengaruh faktor jenis kelamin dan bobot potong terhadap karakteristik fisik karkas pada kelinci Peranakan New Zealand White.
85
88
Metode Penelitian
Kelinci Peranakan New Zealand White lepas sapih (bobot awal rata-rata 1.037,38 30,75 g sebanyak 32 ekor, terdiri atas 16 ekor jantan dan 16 ekor betina, yang dipelihara dalam kandang individu. Kelinci tersebut berasal dari Desa Kalisalak, Kecamatan Kebasen, Kabupaten Banyumas. Pakan terdiri dari rumput lapang dan penguat (campuran : dedak padi, tepung jagung kuning, dan konsentrat unggas kode 521 dengan rasio 1:1:1). Peralatan penelitian meliputi kandang individu sebanyak 32 unit, tempat pakan, tempat minum, ember, sapu lidi, timbangan digital : merk AND seri 11111-06 kapasitas maksimal 4.000 g (kepekaan 1 g), merk AND seri 11111-04 kapasitas maksimal 400 g (kepekaan 0,1 g), timbangan merk Nagata kapasitas 3.000 g (kepekaan 1 g), termohigrometer, pisau potong, scalpel, cutter, tali plastik, kertas label dan kantong plastik. Obat-obatan yang digunakan adalah Medoxy AL, vitamin B-Kompleks, dan Wormectin. Metode penelitian dilaksanakan secara in-vivo di kandang percobaan. Rancangan percobaan adalah pola tersarang (Nested Classification) 2 tingkat. Sebagai grup adalah jenis kelamin (jantan dan betina) dan sub grup berupa bobot potong (BP) tersarang dalam jenis kelamin, terdiri dari : BP1 (1.259,38 16,44 g), BP2 (1.674,88 26,55 g), BP3 (2.076,25 26,59 g), dan BP4 (2.398,50 19,41 g), dan masingmasing BP terdiri 4 ekor untuk setiap jenis kelamin. Pemeliharaan kelinci dilaksanakan selama delapan minggu, terdiri dari satu minggu untuk penelitian pendahuluan dan tujuh minggu periode pemeliharaan mulai dari BP1 sampai BP4 tercapai. Kelompok BP didasarkan pada bobot terberat yang dicapai kelinci jantan dalam setiap interval pemeliharaan 2 minggu, sedangkan kelinci betina mengikuti sampai diperoleh bobot potong yang relatif sama. Rumput lapang diberikan tiga kali sehari yaitu pada pagi, siang dan sore hari secara adlibitum, air minum diberikan setiap pagi hari secara ad-libitum, dan pakan penguat sebanyak 3,50% dari bobot badan (as-fed) diberikan pada sore hari sebelum pemberian rumput lapang. Karakteristik fisik karkas yang diamati adalah (1) bobot dan persentase karkas, (2) bobot dan persentase komponen karkas (daging, tulang dan lemak). Karkas diperoleh dari kelinci yang dipotong dikurangi dengan darah, kepala, kulit dan bulu, keempat telapak kaki, dan organ-organ dalam. Diseksi komponen karkas dilakukan untuk
memperoleh daging, tulang, dan lemak karkas yang dapat dipisahkan secara fisik. Analisis ragam dan uji beda nyata terkecil (BNT) diterapkan pada penelitian ini..

Bobot dan Persentase Karkas
Hasil penelitian terhadap karakteristik fisik karkas kelinci peranakan New Zealand White pada masing-masing jenis kelamin dan bobot potong, ditampilkan pada Tabel 1 dan 2. Pada Tabel 1 terlihat bahwa jenis kelamin kelinci dalam bobot potong yang sama secara statistik berpengaruh tidak nyata (P>0,05) terhadap bobot dan persentase karkas meskipun secara kuantitatif pada kelinci jantan cenderung lebih tinggi daripada betina. Adapun antar kelompok bobot potong berpengaruh sangat nyata (P<0,01) terhadap bobot dan persentase karkas, dan secara kuantitatif kelinci jantan cenderung memiliki bobot dan persentase karkas lebih tinggi daripada betina pada setiap kelompok bobot potong. Pada bobot potong yang sama, jenis kelamin memberikan pengaruh yang relatif sama terhadap bobot dan persentase karkas karena mulai BP1 sampai dengan BP4, kelinci jantan dan betina masih tergolong dalam pertumbuhan yang sama cepatnya sehingga pertambahan massa jaringan tubuhnya juga masih relatif sama. Dengan kata lain kelinci jantan dan betina memiliki laju pertumbuhan yang hampir sama dan belum mencapai titik puncak produksi. Antar kelompok bobot potong dengan level yang relatif besar ternyata berpengaruh sangat nyata (P<0,01) terhadap bobot dan persentase karkas. Hal ini disebabkan kelinci tersebut masih dalam periode pertumbuhan dipercepat sehingga pada kelompok bobot potong yang semakin tinggi, diikuti dengan pertambahan jaringan absolut yang tinggi pula (baik terhadap bobot ataupun persentase karkasnya). Penelitian ini membuktikan hasil yang sama dengan penelitian yang dilakukan oleh Lukefar et al. (1989) bahwa jenis kelamin kelinci New Zealand White tidak berpengaruh terhadap karakteristik karkas yang dihasilkan pada bobot potong 56 hari. Demikian juga dengan hasil penelitian yang dilaporkan oleh Yal et al. (2006) bahwa kelinci New Zealand White jantan dan betina yang dipotong pada umur 11 minggu memberikan pengaruh yang tidak nyata terhadap bobot dan persentase karkas, masingmasing 832 g dan 48,77% pada kelinci jantan, sedangkan pada kelinci betina sebesar 849 g dan 48,69%.
Pengaruh Jenis Kelamin (Haryoko dan Warsiti)
89
Tabel 1. Rataan bobot dan persentase karkas kelinci peranakan New Zealand White pada jenis kelamin dan bobot potong yang berbeda Jenis Kelamin dan Produksi Karkas Jantan: Bobot (g) Persentase (%) Betina: Bobot (g) Persentase (%)
a,b,c,d
Kelompok Bobot Potong (gram) BP1 (1.259,38 16,44) 500,28 29,19a 48,98 1,31
a
BP2 (1.674,88 26,55) 767,83 27,87b 54,70 0,33

b
BP3 (2.076,25 26,59) 997,00 25,42c 58,04 0,75

c
BP4 (2.398,50 19,41) 1.145,28 34,39d 58,72 0,46d 1.118,60 29,14d 58,34 0,52d
487,83 21,99a 48,37 1,00

a
750,33 29,17b 54,03 0,55

b
953,13 31,17c 56,74 0,61

c
Superskrip yang berbeda pada baris yang sama menunjukkan ada perbedaan pada P<0,05
Tabel 2. Rataan bobot dan persentase komponen karkas kelinci peranakan New Zealand White pada jenis kelamin dan bobot potong yang berbeda Jenis Kelamin dan Komponen Karkas Jantan: Bobot Karkas (g) Daging Tulang Lemak Persentase Karkas (%) Daging Tulang Lemak Betina: Bobot Karkas (g) Daging Tulang Lemak Persentase Karkas (%) Daging Tulang Lemak
a,b,c,d
BP1 (1.259,38 16,44)
Kelompok Bobot Potong (gram) BP2 BP3 (1.674,88 26,55) (2.076,25 26,59)
BP4 (2.398,50 19,41)
364,05 24,52a 117,48 2,97a 18,75 1,92a 72,74 0,67a 23,52 0,77a 3,74 0,21a
568,65 19,75b 160,33 5,69b 38,85 2,54b 74,06 0,16b 20,88 0,13b 5,06 0,15b
749,30 16,97c 193,80 3,95c 53,90 4,63c 75,16 0,22c 19,44 0,13c 5,40 0,32c
868,55 19,71d 209,88 7,27d 66,85 7,95d 75,85 0,61d 18,32 0,12d 5,83 0,53d
349,53 13,95a 114,93 6,46a 23,38 1,91a 71,66 0,40a 23,55 0,29a 4,79 0,23a
556,25 20,39b 154,03 7,18b 40,05 1,90b 74,14 0,21b 20,52 0,17b 5,34 0,13b
712,85 21,64c 183,88 5,83c 56,40 4,08c 74,80 0,23c 19,29 0,21c 5,91 0,24c
861,15 28,58d 201,70 4,55d 70,15 5,46d 75,70 0,27d 18,03 0,10d 6,27 0,32d
Iyayi dan Odueso (2003) melaporkan bahwa strain kelinci New Zealand White dengan level bobot potong sebesar 1.305, 1.315, 1.425, dan 1.600 g berpengaruh nyata terhadap produksi karkas masingmasing sebesar 875, 1.000, 1.075, dan 1.335 g. Peneliti lain seperti Gondret et al. (2005) menyatakan bahwa pada bobot hidup 2.306 65 g, dihasilkan bobot karkas antara 1.313 - 1.358 g dengan persentase karkas antara 56,70 - 58,60%. Menurut Oteku dan Igene (2006) umur potong kelinci lokal juga berpengaruh secara signifikan terhadap bobot potong absolut dan persentase karkas, yaitu pada umur potong 10, 13, dan 16 minggu dihasilkan bobot karkas yang meningkat dari 809,7, 1.189,5, dan 1.491,7 g. Sebaliknya, jika level antar bobot potong kelinci semakin rendah maka akan
berpengaruh tidak nyata (P>0,05) terhadap bobot dan persentase karkas yang dihasilkan. Prawirodigdo et al. (2005) melaporkan bahwa kelinci lokal dengan bobot potong 1.024, 1.047, dan 1.137 g berpengaruh tidak nyata terhadap bobot karkas, yaitu sebesar 450, 478, dan 532 g.
Bobot dan Persentase Komponen Karkas

Tabel 2 menunjukkan bahwa kelinci peranakan New Zealand White jantan cenderung memiliki bobot dan persentase daging dan tulang karkas yang lebih tinggi daripada betina, sebaliknya kelinci betina cenderung memiliki bobot dan persentase lemak karkas yang lebih tinggi daripada jantan. Namun demikian secara statitik jenis kelamin berpengaruh tidak nyata (P>0,05) terhadap bobot dan persentase
88
komponen karkas kelinci tersebut. Berbeda halnya dengan bobot potong yang memberikan perbedaan signifikan (P<0,01) terhadap bobot dan persentase komponen karkas yang dihasilkan. Jenis kelamin berpengaruh tidak nyata karena kelinci masih dalam masa pertumbuhan dipercepat (umur muda) sehingga ketiga komponen karkas (daging, tulang, dan lemak) masih terus berjalan dan pertumbuhannya relatif sama antara jantan dan betina. Pada umumnya perubahan pertumbuhan komponen karkas akan terjadi setelah umur dewasa tercapai, karena pada saat itu tulang sudah mulai stabil dan lemak tubuh akan cepat meningkat. Deltoro dan Lopez (1986) juga menyatakan bahwa jenis kelamin secara khusus hanya mempengaruhi sebagian kecil karakteristik karkas yang dihasilkan terutama kandungan lemak karkas pada kelinci dewasa. Sementara itu, antar kelompok bobot potong berpengaruh sangat nyata terhadap bobot dan persentase komponen karkas karena produksi komponen karkas masih terus meningkat, meskipun peningkatan dari ketiga komponen tersebut tidak selalu sama besar. Oleh karena itu, meskipun bobot komponen karkas absolut (daging, tulang, dan lemak) mulai dari BP1 sampai dengan BP4 masih terus meningkat, tetapi secara proporsional tulang karkas akan menurun. Peningkatan persentase daging dan lemak karkas merupakan kompensasi dari penuruan persentase tulang karkas. Pada kelinci yang sudah dewasa ketika bobot tulang relatif stabil, maka akan dilajutkan dengan pertumbuhan lemak secara cepat. Soeparno (1998) menyatakan bahwa persentase karkas banyak dipengaruhi oleh tingkat bobot potong dan lebih kecil dipengaruhi oleh nutrisi. Menurut Sents et al. (1982) peningkatan bobot potong dapat meningkatkan bobot karkas tetapi persentase karkas tidak selamanya meningkat. Cunningham dan Acker (2001) menyatakan bahwa persentase daging dan tulang pada ternak muda relatif tinggi dan persentase lemak karkasnya rendah, sebaliknya pada ternak yang lebih tua persentase lemak lebih tinggi tetapi persentase daging dan tulangnya lebih rendah. Tingkat perubahan persentase daging, tulang, dan lemak karkas dipengaruhi oleh spesies, bangsa, tipe ternak, pakan, dan jenis kelamin. Pada ternak tipe besar biasanya persentase daging tanpa lemak lebih tinggi dibandingkan ternak tipe kecil. Demikian juga ternak jantan perdagingannya lebih tinggi daripada betina pada umur dan bobot yang sama. Hernandez et al. (2004) melaporkan bahwa kelinci yang
dipotong pada umur muda (9 dan 13 minggu) menghasilkan lemak karkas dan imbangan daging dan tulang lebih rendah dibandingkan kelinci yang lebih tua. Menurut Rihi (2004) peningkatan persentase karkas yang rendah memberikan pengaruh yang tidak nyata terhadap persentase daging dan tulang karkasnya. Menurut Pla et al. (1998) pada kelinci betina presentase jaringan lemak lebih tinggi daripada jantan.
Kesimpulan
Pada bobot potong yang sama kelinci peranakan New Zealand White jantan dan betina menghasilkan bobot dan persentase karkas serta komponen fisik karkas (daging, tulang, dan lemak) relatif sama. Peningkatan bobot potong (dari 1,25 menjadi 2,39 kg) akan diikuti oleh peningkatan bobot karkas (0,5 menjadi 1,15kg pada jantan; 0,49 menjadi 1,12 kg pada betina) dan persentase karkas (48,98% menjadi 58,72% pada jantan; 48,37% menjadi 58,34% pada betina) beserta komponen fisik karkas, sedangkan persentase tulang karkas cenderung menurun.
Daftar Pustaka
Cunningham, M., and D. Acker, 2001. Animal Science and Industry. 6th edition. Prentice Hall. New Jersey. Deltoro, J. and A.M. Lopez, 1986. Development of commercial characteristics of rabbits carcasses during growth. Livestock Production Science 15 (2): 271-283. Gondret, F., C. Larzul., S. Combes, and H. de Rochambeau, 2005. Carcass composition, bone mechanical properties, and meat quality traits in relation to growth rate in rabbits. Journal of Animal Science 83 (7): 1526-1535. Hernandez, P., S. Aliaga, M. Pla, and A. Blasco, 2004. Selection for growth rate and slaughter age on carcass composition and meat quality traits in rabbits. Journal of Animal Science 82 (3): 654-660. Iyayi, E.A., and O.M. Odueso, 2003. Response of some metabolic and biochemical indices in rabbit fed varying levels of dietary cyanide. African Journal of Biomedical Research 6 (1): 43-47. Lukefahr, S.D., C.V. Nwosu, and D.R. Rao, 1989. Cholesterol level of rabbit and trait relationships among growth, carcass and lean yield performances. Journal of Animal Science 67 (8): 2009-2017.
Pengaruh Jenis Kelamin (Haryoko dan Warsiti)
89
Oteku, I.T., and J.O. Igene, 2006. Effect of diet types and slaughter ages on carcass characteristics of the domestic rabbits in humid southern Nigeria. Pakistan Journal of Nutrition 5 (1): 1-5. Pla, M., L. Guerrero, D. Guardia, M. Oliver, and A. Blasco, 1998. Carcass characterisics and meat quality of rabbit lines selected for different objectives : I. Between lines comparison. Livestock Production Science 54 (2): 115-123. Prawirodigdo, S., V.U. Subiyanti, G. Purwanto, and B. Sudarmoyo, 2005. Inclusion of fresh Ipomoea aquatica in the diets of growing Indonesian native rabbits : A preliminary study. Jurnal Pengembangan Peternakan Tropik 30 (1) : 1-6.
Rihi, J.L. 2004. Produksi karkas dan kualitas fisik daging kelinci lokal yang diberi konsentrat dengan level protein berbeda. Buletin Peternakan 28 (2): 65-71. Sents, A.E., L.E. Walters, and J.V. Whiteman, 1982. Performance and carcass characteristics of ram lambs based on slaughtered different weight. Journal of Animal Science 60 (6): 1360-1368. Soeparno, 1998. Ilmu dan Teknologi Daging. Gadjah Mada University Press. Yogyakarta. Yal, S., E.E.I. Onba, dan I. Onba, 2006. Effect of sex on carcass and meat characteristics of New Zealand White rabbits aged 11 weeks. Asian-Australian Journal of Animal Science 19 (8): 1212.
Vol.10 No.2
Feed Restriction Does Not Impair Insulin Sensitivity, but Exercise and Resumption of Full Feeding Increase Insulin Sensitivity and Blood Flow Across the Hind-Limb Muscles
(Pembatasan Pakan tidak Menurunkan Kepekaan terhadap Insulin tetapi Excersise dan Pemberian Pakan Penuh Meningkatkan Kepekaan Insulin dan Aliran Darah Otot Kaki Belakang Domba)
Pambudi Yuwono dan Akhmad Sodiq
ABSTRAK: Tujuan penelitian ini adalah untuk mengetahui kepekaan terhadap insulin dan pemanfaatan glukosa oleh kaki belakang domba yang mendapatkan perlakuan pembatasan pakan dan excersise serta pada domba yang diberi pakan penuh dan tidak excesise. Domba sebanyak 18 ekor berumur 8-9 bulan dikelompokan berdasarkan bobot badan dalam rancangan acak kelompok terdiri dari tiga perlakuan dengan enam ulangan. Terdapat dua periode dalam penelitian ini, pada peride I (45 hari) domba dalm perlakuan I dibatasi pemberian pakannya dan excersise selama 2,5 jam perhari, 6 hari seminggu dengan kecepatan 1,1 m per detik. Domba dalam perlakuan II hanya mengalami pembatasan pakan saja, sedangkan domba dalam perlakuan III diberi pakan ad libitum dan tidak excersise. Pada periode II (30 hari), semua domba dalam perlakuan I, II dan III diberi pakan ad libitum dan berhenti excersise. Kepekaan terhadap insulin ditandai oleh ektraksi glukosa selama hiperisulim pada kaki belakang tidak berbeda nyata (P>0.05) antar perlakuan pada akhir periode I. Ekstraksi glukosa (rataan salah baku) masing-masing perlakuan adalah 4,71 0,9; 3,70 0,72; 3.49 0.54 %/kg otot. Pada minggu kedua periode II, kepekaan terhadap insulin cenderung lebih tinggi (P=0.064) dengan nilai ektraksi glukosa (rataan salah baku) untuk perlakuan I, II dan III masing-masing adalah 3,79 0,26; 3,88 0,39; 2.99 0.41 %/kg otot. Pada akhir periode I, laju aliran darah yang melalui kaki belakang untuk perlakuan I dan II masing-masing lebih rendah 19 dan 24% dibandingkan dengan perlakuan III sehingga berakibat pemanfaatan glukosa lebih rendah (P<0,05). Pada periode II, laju aliran darah dan pemanfaatan glukosa tidak berbeda nyata (P>0,05) antara ketiga perlakuan. Disimpulkan bahwa pembatasan pakan tidak menurunkan kepekaan terhadap insulin. Excersise dan pemberian pakan secara ad libitum setelah sebelumnya mengalami pembatasan pakan akan meningkatkan kepekaan terhadap insulin. Kata Kunci: Domba, glukosa, ektraksi, insulin, laju aliran darah, excersise, pembatasan pakan
Introduction
Previous experiment showed clearly that prolonged underfeeding of sheep reduces glucose clearance rate from its circulation, following an intravenous injection of a bolus of glucose (Yuwono, 2004). The glucose clearance rates return to normal values when underfed animals return to full feeding. It is uncertain whether the change in the glucose clearance rate in underfed animals is caused by reduced insulin secretory responses to glucose or impaired insulin action at tissue level. Factors such as pancreatic secretory response to glucose load, insulin clearance rate from the blood and the action of insulin on target tissues are responsible for glucose clearance (Bergman, 1989). Since skeletal muscle is a major site for glucose disposal, reduction in glucose uptake by this tissue has a major impact on glucose clearance rate. Insulin mediates glucose
90
uptake by muscle cell by attaching to its cell membrane receptors thus creating an interaction that initiates a cascade of events resulting in translocation of glucose transporters (Glut-4) to membranes (Lienhard et al., 1992). Underfeeding can increase the number of insulin receptors thus providing more binding sites for insulin (Knott et al., 1992) which result in increases in insulin sensitivity. Insulin sensitivity is also governed by the number of Glut- 4 in the plasma membrane (Hansen et al., 1998). Previous authors have already reported that both calorie restriction (Dean et al., 1998 and Edward et at al., 2007) and exercise (Brozinick et al., 1993 and Hansen et al., 1998) can increase the number of Glut4 at muscle cell surfaces. It is hypothesised that underfeeding of sheep increases hind-limb muscle sensitivity to insulin and exercise during underfeeding has an additive effect on hind-limb muscle sensitivity to insulin. The aim
94
of the current experiment was to determine insulin sensitivity of hind-limb muscles and glucose uptake by the hind-limb muscles of sheep that had been underfed and exercised and sheep that had resumed full feeding and ceased exercising.
Research Methods
Animals and Feeding
Eighteen sheep wethers 8-9 months of age, pelleted lucerne hay (Medicago sativa), arterial catheters made of polyethylene 0.86 mm ID x 1.27 mm OD. Jugular venous catheters for left and right external jugular veins made of Polyethylene 1.0 mm ID x 1.5 mm OD and a leg vein catheter made of Clear vinyl tubing 0.86 mm ID x 1.27 mm OD. The Polyethylene catheters were purchased from Critchley Electrical Products Pty Ltd, Silverwater, NSW, Australia. Aseptic and sterile glucose load made up as a 50% solution (wt/v) and prepared by dissolving and filtering D-glucose was obtained from Laboratory grade; Ajax Chemicals, Auburn, NSW, Australia). A stock solution containing 100 IU/ mL beef mono component insulin was purchased from Novo Nordisk Pharmaceutical Pty Ltd, Denmark. Stock solutions of 37 MBq/mL of tritiated water (3HOH) diluted in aliquots of 100 mL to give concentrations of 925 kBq/mL and 9.25 kBq/mL During the adaptation period, the wethers were kept in individual pens and fed a diet containing pelleted lucerne hay (Medicago sativa). Following this period, the animals were fed according to the feeding regimes outlined in Table 1. The amounts of feed given to the animals in Groups I and II were adjusted progressively in order to ensure that animals in these groups lost live weight at a similar rate. Animals in Group III were fully fed throughout the experiment.
Table 1. Treatments imposed on animals in Groups I, II and III during Periods I and II Period Group I Group II Group III I (45 days) II (21 days) Underfed + exercise Full feeding only Underfed only Full feeding only Full feeding only Full feeding only
three treatments. Treatments were then randomly allocated to animals within blocks. Treatment I (Group I) included an underfeeding regimen and exercise [walking on a treadmill at an incline of 5o at 1.1 m/s for 2.5 h/d, 6 d/week (energy expenditure was approximately 1.3 Em)]. Treatment II (Group II) included the underfeeding regimen only. Treatment III (Group III) was the control group, which involved full feeding and no exercise throughout the experiment. After Period I, exercise and underfeeding were terminated and all animals were fully fed for four weeks (Period II). All animals were weighed within the same time period (60 min) on the same day each week. Weighing was conducted before feeding. Lateral saphenous vein, femoral artery jugular vein catheterisation and hind-limb muscle preparation for the current study of muscle metabolism was similar to that described by Domanski et al. (1974), with some modifications according to procedures described by Teleni and Annison (1986). Hyperinsulinemic euglycemic clamp study. The study was conducted at the end of Period I and in Week 2 of Period II (resumption of full feeding). In order to produce hyper insulinaemia at control glucose concentrations, a euglycaemic glucose clamp was performed according to the methods reported by De Fronzo et al. (1979). Insulin was administered as a single continuous infusion through a jugular catheter at the rate of 6 mU/min per kg live weight, as described by Weekes et al. (1983). Blood flow was estimated using the 3HOH technique described by Oddy et al. (1981). Blood was collected over 10 minute intervals into 10 mL tubes kept in an ice bath. Plasma separation. Blood samples were centrifuged in a refrigerated (4oC) centrifuge (GAR centrifuge, Beckman Instrument, USA) at 3000 g for 10 minutes. Plasma was collected into 5 mL plastic vials and stored frozen at 20oC until required for analysis. Variables measured were blood flow across the hind limb, glucose uptake by hind-limb muscle and glucose extraction by hind-limb muscle.
Statistical Analysis
Oneway ANOVA according to Daniel (1991) was applied in this study. Where there was a significant effect of treatments a post-hoc multiple range test using Honestly Significant Difference (HSD) was undertaken in order to determine the significance of difference between means.
Experimental Design
Eighteen wethers were used in the experiments. The wethers were blocked on live weight in randomised block design for six replicates of
94

Steady State Glucose Infusion Rate (SSGIR)
Data on SSGIR during infusion of insulin at the end of Period I and Week 2 of resumption of full feeding (Period II) are presented in Table 2. The glucose clamp procedure was successful as indicated by the relative stability in arterial glucose concentration between pre-infusion and during infusion periods in Periods I and II. Under steady state conditions, glucose infusion rate during insulin infusion would be equal to the amount of glucose being translocated out of glucose space (i.e., glucose metabolised) provided that endogenous glucose production is completely suppressed (deFronzo et al., 1979 and Steven et al., 2005). Brockman (1983) has reported that insulin concentrations of 60 U/mL during euglycaemia in sheep inhibited the appearance rate of endogenous glucose by 50%. Maximal inhibition (100%) occurred during combined hyperglycaemia (~5mM) and hyperinsulinaemia (~200U/mL). An insulin dose of 6 mU/min/kg in sheep produced arterial plasma insulin concentrations of about 630 U/mL according to Weekes (1985). The current experiment has not ascertained whether endogenous glucose production was completely suppressed in each group of animals. The rate of insulin infusion would suggest that complete suppression of endogenous glucose production had taken place. However, if this assumption is incorrect, the SSGIR values presented in Table 2, have underestimated the amount of glucose translocated out of glucose space. The finding that animals undergoing prolonged underfeeding (Group II) had lower mean SSGIR values than those of the fully fed animals at the end of Period I, appears to contradict with the observation that mean values of glucose A-V concentration difference across hind-limb muscles which are expressed as per mU insulin infused per kg muscle were not different between Groups II and III. The portal drained viscera and the skeletal muscle are the two major sites of glucose disposal in sheep (Weekes, 1979). The entire splanchnic bed accounts for only 5% of disposal, whereas muscle could account for 85% of glucose disposal of intravenously infused glucose in humans (Baron et al., 1988). Therefore changes in skeletal muscle glucose uptake during hyperinsulinaemia can significantly affect glucose infusion rates required to maintain reference glucose concentrations.
Because under steady state conditions the amount of exogenous glucose infusion required to maintain euglycamia is the sum of the insulininduced increase in glucose utilisation and the insulininduced suppression of glucose production, it is difficult to conclude whether the low mean value of SSGIR in Group II was due to insulin resistance by muscles or to a reduction in decrement of endogenous glucose production. There would be less probability of the latter factor occurring as previously discussed in the preceding paragraph. It is possible that lower SSGIR values for Groups I and II were due to lower reference glucose concentrations for the two groups. Increasing the reference value so that it equals that of Group II might have resulted in higher SSGIR values for Groups I and II. The fact that, at the end of Period I, there was no significant difference in SSGIR between Groups I and III although values for both these groups were higher than that for Group II, probably reflect the presence of an insulin-independent mechanism which facilitates the uptake of glucose by skeletal muscles of the exercised animals in Group I. When full feeding was resumed for 14 days and glucose concentrations returned to normal values, previously underfed and exercised and underfed and not exercised animals had higher SSGIR values than the control group. This phenomenon might be due to adaptive responses to resumption of full feeding rather than the effect of the last bout of exercise or underfeeding. Resumption of full feeding brought about an increase in insulin-stimulated glucose utilisation and this finding is consistent with the observation that resumption of full feeding enhanced insulin-induced glucose A-V concentration difference across the hind limb in sheep (Table 2). An interesting point is the increase in the concentration of blood glucose in animals in Groups I and II in Period II. Such an increase could be reflected in an increase in SSGIR as previously discussed.
Arterial Glucose, Glucose Arterio Venous (AV) Concentration Difference and Glucose Extraction
Mean values of arterial glucose concentrations, glucose A-V concentration difference and glucose extraction by hind-limb muscles at the end of Period I and Week 2 of Period II are presented in Tables 2. Means of glucose A-V concentration differences infused for Groups I and II tended to be higher than
Feed Restriction Does Not (Yuwono dan Sodiq)
95
Table 2 . Mean ( sem) steady state values of glucose infusion rate (SSGIR), arterial plasma glucose concentration, glucose arterio-venous (A-V) concentration difference, glucose extraction, blood flow and glucose uptake by hind-limb muscles of animals in Groups I (underfed and exercised), II (underfed and not exercised) and III (fully fed and not exercised) during Periods I and II
Period I Groups II 0.02 0.002b Period II Groups II 0.04 0.004a
SSGIR (mg/mU insulin infused/kg LW) Arterial (mM) Pre infusion During infusion A-V (mol/mU insulin infused/min/kg muscle) During infusion Extraction (%/kg) Pre infusion During infusion Blood flow during infusion (mL/min/100 g muscle)
I 0.03 0.004ab
III 0.03 0.003a1
P 0.030
I 0.03 0.003a
III 0.025 0.002b
P 0.025
3.50 0.18a 3.94 0.26
3.54 0.24a 3.64 0.41
4.47 0.15b 4.84 0.30
0.040 0.054
4.27 0.258 4.39 0.234
4.00 0.192 4.21 0.233
4.29 0.174 4.26 0.167
0.594 0.830
1.28 0.23 0.84 0.16 4.71 0.90 9.79 1.09
0.87 0.16 0.83 0.15 3.70 0.72 9.13 0.84
0.79 0.13 0.69 0.07 3.49 0.54 11.97 1.13
0.147 0.538 0.478 0.161
0.94 0.06 0.78 0.10 3.79 0.26 11.59 0.67
1.08 0.11 0.92 0.16 3.88 0.39 12.35 0.96
0.70 0.202 0.63 0.13 2.9 0.41 11.43 0.99
0.186 0.181 0.064 0.742
Glucose uptake during 2.78 0.44 a 2.06 0.38a 3.97 0.34b 0.018 infusion (mol/min/100 g muscle) a,b Means with thedifferent superscript in the same row are different at P<0,05 significantly
3.26 0.25
3.36 0.43
3.04 0.54
0.911
those for Group III when they are expressed per kg hind-limb muscle per mU insulin. Due to significant differences in live weight (LW) between Group III and Groups I and II, discussion on glucose A-V concentration difference across the hind-limb muscle is made on the basis per mU insulin infused per kg. The trends in glucose AV concentration difference and glucose extraction were similar. At the end of Period I, mean values of glucose AV concentration difference, during insulin infusion, for Groups I and II were 1.6 and 1.1 times that for Group III. Animals in Group I tended to have higher mean values of glucose A-V concentration difference than animals in Group III (P=0.07). It might be concluded from this finding that exercise had an additive effect on insulin-increased glucose A-V concentration difference across hind-limb muscles of underfed animals. Exercise is likely to increase distribution of fast twitch oxidative muscle fibres which are known to enhance insulin sensitivity (Kriketos et al., 1996). Resumption of full feeding resulted in increased mean values of glucose A-V concentration difference for Groups I and II which were 1.4 and 1.5 times higher (P=0.186) respectively, than those for the control animals in Group III. Such increases are consistent with observations of Yuwono (2000) that there was increased efficiency in N utilisation during resumption of full feeding by animals in Groups I and II. An increased glucose A-V concentration
difference by muscle of these animals probably was to support the increased utilisation of glucose in protein synthesis.
Blood Flow and Glucose Uptake

Mean values of blood flow across the hind limb and glucose uptake by the hind limb at the end of Period I and Week 2 of Period II are presented in Table 2. At the end of Period I and week 2 of Period II, mean values of blood flow across the hind-limb muscle were not statistically different amongst Groups. At the end of Period I, mean values of glucose uptake by the hind limb during infusion of insulin and glucose were significantly lower in animals in Groups I and II than those for animals in Group III. At week 2 of Period II, mean values of glucose uptake by the hind limb were not different amongst Groups. It was found in Period I that glucose uptake was lower in animals in Groups I and II than for animals in Group III and this was due to low absolute values of glucose A-V concentration difference and blood flow. Blood flow values across hind-limb muscles of animals in Groups I and II were 19% and 24% lower respectively than those across the hind-limb muscle of animals in Group III. Low blood flow values probably reflect a reduction in metabolic rates in Groups I and II. Mahyuddin (1990) has reported a reduction in CO2 entry rate (reflecting a reduction in metabolic rate) in underfed sheep.
94
When full feeding resumed for 14 days, mean values of glucose uptake by hind-limb muscle were not different amongst groups because absolute values of glucose A-V concentration difference and blood flow were similar across Groups. Bigdelli (1996) has reported similar results from his study.
Daniel, W.W., 1991. Biostatistics: A Foundation for Analyses in the Health Sciences. 5th edition. John Wiley & Son Inc, Singapore. De Fronzo, R.A., J.D. Tobin and R. Andres, 1979. Glucose clamp technique: A method for quantifying insulin secretion and resistance. American Journal of Physiology 237: e214-e223. Dean. D.J., J.T. Brozinick Jr,. S.W. Cushman and G.D. Cartee, 1988. Calorie restriction increases cell surface GLUT-4 in insulin-stimulated skeletal muscle. American Journal of Physiology 275: e957e964. Edward, B.A. and D.C. Gregory, 2007. In vitro simulation of calorie restriction-induced decline in glucose and insulin leads to increased insulin-stimulated glucose transport in rat skeletal muscle. American Journal of Physioiology Endocrinolology Metabolism 293: e1782-e1788. Hansen, P.A., L.A. Nolte, M.M. Chen and J.O. Holloszy, 1998. Increased Glut-4 translocation mediates enhanced insulin sensitivity of muscle glucose transport after exercise. Journal of Applied Physiology 85: 1218-1226. Knot, R.M., P. Trayheern and J.E. Hesketh, 1992. Changes in insulin-receptor mRNA levels in skeletal muscle and brown adipose tissue of weaning rats during fasting and refeeding. British Journal of Nutritions 68: 583-592. Kriketos, A.D., D.A. Pan, S. Lillioja, G.J. Cooney, L.A. Baur, M.R. Milner, J.R Sutton, A.B. Jenkins, C. Bogardus and L.H. Storlien, 1996. Interrelationships between muscle morphology, insulin action and adiposity. American Journal of Physiology 270: R1332-1339. Leinhard, G.E., J.W. Slot, D.E. James and M.M. Mueckler, 1992. How cells absorb glucose. Scientific American 266: 34-39. Mahyuddin, P., 1990. Metabolism in Compensatory Growth. [PhD thesis]. James Cook University, Townsville. Oddy, V.H., B.W. Brown and A.W. Jones, 1981. Measurement of organ blood flow using tritiated water.1. Hind limb muscle blood flow in conscious ewes. Australian Journal Biological Science 34: 419-425. Steven E. B., E. Mitchell, P. S. Freedson, S.R. Chipkin, and B.Braun. 2005. Improved insulin action following short-term exercise training: role of energy and carbohydrate balance. Journal of Applied Physiology 99: 2285-2293.
Conclusions
When sheep were underfed, insulin sensitivity of hind-limb muscle was not different from that of fully fed animals. However, inclusion of exercise during underfeeding improved insulin sensitivity in hindlimb muscles. Resumption of full feeding improved insulin sensitivity of hind-limb muscles in previously underfed animals. The hind-limb muscles of previously underfed and exercised animals were still sensitive to insulin when exercise was terminated and after full feeding had resumed for 14 days. Although hind-limb muscles of underfed and exercised animals and underfed but not exercised animals are more sensitive to insulin than those of fully fed sheep at the end of the underfeeding period, total glucose uptake by the hind-limb muscle was much lower in the former groups. Resumption of full feeding resulted in no apparent difference in total glucose uptake by the hind-limb muscle between sheep experiencing nutritional stress and being exercised compared with control sheep
References
Baron , A.D., G Brechtel, P. Wallace and S.V. Edelman, 1988. Rates and tissue sites of non-insulin and insulin mediated glucose uptake in humans. American Journal of Physiology 255: e769-e744. Bergman, F.N., 1989. Toward physiological understanding of glucose tolerance. Diabetes 38: 1512-1527. Bigdelli, M., 1996. Compensatory growth in the ruminant animal. [PhD thesis]. James Cook University of North Queensland. Townsville, Australia. Brockman, R.P., 1983. Effects of insulin and glucose on the production and utilization of glucose in sheep (ovis aries). Comparative Biochemistry Physiology 74a: 681-685. Brozinick Jr, J.T, G.J. Elgen Jr, B.B. Yospelkis III, H.Y. Kang and J.L. Ivy, 1993. Effects of exercise training on muscle Glut-4 protein content and translocation in obese Zucker rats. American Journal of Physiology 265: f419-E427.
Feed Restriction Does Not (Yuwono dan Sodiq)
95
Teleni, E. and E.F. Annison, 1986. Development of a sheep hind-limb muscle preparation for metabolic studies. Australian Journal Biological Science 39: 271-281. Weekes, T.E.C., A.N. Janes, and D.G. Armstrong, 1985. Insulin action and glucose metabolism in sheep fed on dried-grass or ground maize-based diets. British Journal of Nutritions 54: 459-471. Weekes, T.E.C., Y. Sasaki and T. Tsuda, 1983. Enhanced responsiveness to insulin in sheep exposed to cold. American Journal of Physiology 244: e335-e345.
Weekes, T.E.C., 1979. Carbohydrate Metabolism In: Digestive Physiology and Nutrition of Ruminants. 2nd ed. DC Church (Editor) O & B Books, Corvallis, Oregon. Yuwono, P., 2000. Effects of exercise and Feed restriction on growth, body composition and glucose metabolism in sheep. [MSc Thesis]. James cook University, Townsville. Yuwono, P, 2004. Effects of feed restriction and exercise on glucose tolerance in sheep. Animal Production 5: 63-68.
Vol.10 No.2
Pengaruh Aras Undegraded Protein dan Energi terhadap Intake dan Kecernaan Nutrien serta Metabolit Darah pada Sapi Perah
(Effect of Undegraded Protein and Energy Level on Intake and Digestibility of Nutrient and Blood Metabolite in Dairy Cows)
Budi Prasetyo Widyobroto*, Subur Priyono Sasmito Budhi, dan Ali Agus
Fakultas Peternakan, Universitas Gadjah Mada, Yogyakarta
ABSTRACT: An experiment was conducted to determine the effect of undegraded protein and energy level on intake and digestibility of nutrient and glucose and urea blood content in dairy cows. The benefit of the research was to inform about the utilization of undegraded protein and energy level to optimize nutrient utilization in dairy cattle. The experiment was conducted in 4 month in the Department of Animal Nutrition and Feed Science, Faculty of Animal Science Gadjah Mada University. The experiment used 4 female rumen fistulated dry cows (Friesian Holstein Crossbreed) of 3.0-3.5 years old and 350400 kg body weight. The treatments of this experiment were T1: 20% of undegraded protein (UDP) and 70% energy from requirement; T2: 20% undegraded protein and 120% energy from requirement; T3: 30% undegraded protein and 70% energy from requirement; and T4: 30% undegraded protein and 120% energy from requirement with Latin square design. Variables observed were intake and digestibility of dry matter (DM), organic matter (OM), crude protein (CP), neutral detergent fiber (NDF), Acid detergent fiber (ADF), and glucose and urea blood content. Collected data were analyzed by analysis of variances, and further differences were tested by orthogonal contrast. Results of the research showed that the level of UDP in the rations did not affect DM, OM, CP intake, rumen degradable protein (RDP), NDF and ADF; however level of energy had significant affect on DM, OM, CP, RDP and ADF intake. The level of UDP resulted in non significant difference in DM; but significantly different on CP digestibility. Digestibility of DM and OM were significantly influenced by the level of energy, but it did not influence NDF and ADF digestibility. Cattle treated with the high energy rations had higher blood glucose concentration than cattle treated with the low energy rations. Blood urea in cattle fed low UDP rations was higher than cattle fed high UDP rations. Key Words: Undegraded protein, nitrogen, energy, blood metabolite
Pendahuluan
Konsumsi hijauan pada ruminansia di daerah tropis dibatasi oleh tingginya kandungan serat kasar dan kecernaannya relative rendah disebabkan oleh tingginya komponen dinding sel (Capper et al., 1977). Suplementasi undegraded protein (UDP) dengan memperhitungkan ketersediaan prekursor N untuk mikrobia rumen mutlak diperlukan pada ruminansia yang berproduksi tinggi khususnya ternak perah. Prekursor N yang mencukupi untuk sintesis protein mikrobia diharapkan perkembangbiakan mikrobia rumen menjadi optimal, sehingga kecernaan serat menjadi meningkat. Newbold et al. (1988), Atkinson et al. (2007) melaporkan bahwa konsumsi dapat dipengaruhi oleh degradasi protein dalam rumen yang akan mempengaruhi kecernaan dan undegraded protein juga berpengaruh pada
Korespondensi Penulis: dir-akademik@ugm.ac.id
suplai asam amino di intestinum. Kerry dan Amos (1992) menunjukkan bahwa aras UDP tidak berpengaruh secara nyata terhadap kecernaan BK tetapi berpengaruh terhadap kecernaan PK dan aras UDP rendah memberikan kecernaan PK lebih tinggi dibanding aras UDP tinggi. Reksohadiprodjo et al. (1998), dan Widyobroto et al. (1999) juga melaporkan bahwa UDP 42 % dan UDP 58% tidak memberikan perbedaan secara significant pada kecernaan BO, NDF dan ADF ransum. Baumann et al. (2004), melaporkan bahwa suplementasi RDP meningkatkan total konsumsi bahan kering. suplementasi RDP yang dikombinasikan dengan bahan pakan sumber energi (jagung) mengakibatkan terjadinya penurunan konsumsi hijauan, tetapi dapat meningkatkan kecernaan bahan organik. Secara keseluruhan bahwa suplementasi RDP dan sumber energi dapat digunakan untuk meningkatkan kualitas hijauan. Robinson et al. (1991) melaporkan bahwa konsentrasi glukosa plasma darah meningkat dengan meningkatnya aras UDP ransum, walaupun tidak
96
98
berbeda nyata. Hal ini disebabkan oleh adanya pasokan asam amino gligogenik yang tinggi pada pakan UDP tinggi merupakan bahan pembentuk glukosa dalam usus halus. Sletmoen-Olson et al. (2000) melaporkan bahwa sapi selama bunting dan 1 bulan laktasi yang mendapatkan ransum UDP rendah memberikan konsentrasi glukosa plasma konsisten lebih tinggi dibanding yang mengkonsumsi UDP sedang maupun tinggi. Ransum yang kelebihan protein terdegradasi dalam rumen memberikan konsentrasi urea endogen yang tinggi dalam darah, susu dan urine. Tingginya konsentrasi urea berhubungan dengan gangguan fertilitas, turunnya energi tersedia, polusi lingkungan dan kerugian ekonomi (Roseler et al., 1992). Berdasarkan uraian diatas maka dibuat hipotesa bahwa sapi perah yang mendapat ransum aras UDP dan energi tinggi memberikan kenaikan konsumsi dan kecernaan, serta kadar glukosa dan urea darah.
Metode Penelitian
Penelitian dilakukan di jurusan Nutrisi dan Makanan Ternak Fakultas Peternakan Universitas Gadjah Mada (UGM) Yogyakarta selama 4 bulan. Penelitian ini menggunakan 4 ekor sapi Peranakan Friesian Holstein (PFH) betina tidak berproduksi, yang difistula pada bagian rumennya dengan bobot badan 350400 kg dan berumur 3,03,5 tahun, digunakan untuk studi intake dan kecernaan nutrien. Masing-masing ternak mendapat 4 macam perlakuan ransum yaitu T1: Undegraded protein 20% dan energi memenuhi 70% dari kebutuhan, T2: Undegraded protein 20% dan energi memenuhi 120% dari kebutuhan, T3: Undegraded protein 30% dan energi memenuhi 70% dari kebutuhan dan T4: Undegraded protein 30% dan energi memenuhi 120% dari kebutuhan, dengan menggunakan rancangan latin square 4 x 4 (Tabel 1). Penelitian berlangsung dalam dua periode yaitu 15 hari periode adaptasi dan 15 hari koleksi. Ternak diletakkan di kandang individu dan diberi pakan dan minum secara ad libitum. Ransum diberikan sesuai dengan kebutuhan nutrisinya (INRA, 1988). Komposisi kimia dan nilai nutrisi ransum disajikan
pada Tabel 2. Rumput raja dan konsentrat diberikan 2 kali per hari (pukul 8.00 dan pukul 17.00 WIB). Rumput yang diberikan pada ternak berupa cacahan dan konsentrat diberikan sebelum distribusi rumput. Pengumpulan sampel pakan, sisa pakan dan feses dilakukan pada periode koleksi. Koleksi feses dilakukan setiap hari pada waktu yang sama pada pukul 08.00 (1x24 jam) dicampur secara homogen, diambil sebanyak 1% dari berat total feses sebagai sampel. Kemudian dikeringkan dan sebelum dianalisis sampel digiling dengan Willey mill dengan saringan berdiameter lubang saringan 1 mm. Sampel pakan konsentrat diambil setiap pencampuran, dan sampel hijauan diambil setiap 2 hari sekali dan pada setiap akhir periode koleksi dicampur, diambil sampel representatif untuk dianalisis BK, BO, PK, NDF dan ADF. Sampel sisa pakan diambil setiap hari pada setiap sapi dan pada setiap akhir periode dicampur untuk analisis BK, BO, PK, NDF dan ADF masing-masing 3 ulangan menggunakan metode AOAC (1980). Sampel darah diambil sebelum periode adaptasi dimulai dan pada hari terakhir periode koleksi data. Darah diambil 3 jam setelah pemberian pakan konsentrat pada vena jugularis dengan menggunakan venoject yang dilengkapi dengan EDTA sebagai agent anti koagulan. Darah yang terkoleksi kemudian dianalisis kandungan glukosa plasma darah dengan metode Randox (Merck Kit Diagnostik) dan urea plasma darah dengan metode Berthelot (Merck Kit Diagnostik) masing-masing 3 ulangan.
Tabel 1. Skema penelitian Sapi A B C D Periode 1 T1 T2 T3 T4 Periode 2 T2 T3 T4 T1 Periode 3 T3 T4 T1 T2 Periode 4 T4 T1 T2 T3
Data konsumsi BK, BO, PK, RDP, UDP, ADF, NDF, glukosa dan Urea plasma darah yang diperoleh dianalisis variansi dan jika terdapat pengaruh nyata antar perlakuan dilanjutkan dengan uji kontras ortogonal (SAS, 1987).
98
Tabel 2. Proporsi, komposisi kimia dan nilai nutrisi ransum Bahan Pakan/ Nutrien T-1 60,00 0,80 1,20 4,00 34,00 Susunan Ransum T-2 T-3 60,00 60,00 2,80 0,80 6,00 6,40 1,20 1,20 4,00 12,80 34,00 10,80 T-4 60,00 2,80 6,00 6,40 1,20 12,80 10,80
Rumput Jagung Urea Tepung Ikan Bungkil Kedelai + HCHO Molases Dedak Cassava Mineral * Komposisi kimia dan nilai nutrisi ransum (% BK) BO (%) 88,72 PK (%) 10,00 UDP (%)b 19,84 NDF (%) 48,11 NEl (Mcal.kg) 1,35
88,72 10,00 19,84 48,11 1,35
85,67 14,93 29,98 49,59 1,41
85,67 14,93 29,98 49,59 1,41
T-1 : Undegraded Protein 20% dan Energi 70% dari kebutuhan T-2 : Undegraded Protein 20% dan Energi 120% dari kebutuhan T-3 : Undegraded Protein 30% dan Energi 70% dari kebutuhan T-4 : Undegraded Protein 30% dan Energi 120% dari kebutuhan BO : Bahan Organik PK : Protein Kasar UDP : Undegraded Protein NDF : Neutral Detergent Fiber NEl : Net Energy for lactation a Hasil analisis kimia Lab. Nutrisi dan Makanan Ternak, Fak. Peternakan UGM b Dihitung berdasarkan nilai degradasi in sacco hijauan dan konsentrat (60:40) Ditambahkan dalam konsentrat sebanyak 0,5%
Tabel 3. Konsumsi nutrien sapi perah yang mendapat ransum dengan aras undegraded protein dan energi berbeda Variabel BK (kg/ekor/hari) BO (kg/ekor/hari) PK (g/ekor/hari) RDP (g/ekor/hari) UDP (g/ekor/hari) NDF (kg/ekor/hari) ADF (kg/ekor/hari) T-1 4,88b 4,29 b 510 b 410 b 99 b 2,86 1,56 b Ransum T-2 T-3 6,29 ab 5,07 b 5,86 ab 4,42 b ab 739 530 b 595 a 371 b 144 a 159 b 3,43 2,80 1,81 ab 1,64 b T-4 7,80 a 7,21 a 894 a 626 a 268 a 4,21 2,23 a Kontras 12vs34 13vs24 ns ** ns ** ns ** ns ** ** ** ns ns ns **
T-1 : Undegraded Protein 20% dan Energi 70% dari kebutuhan T-2 : Undegraded Protein 20% dan Energi 120% dari kebutuhan T-3 : Undegraded Protein 30% dan Energi 70% dari kebutuhan : Undegraded Protein 30% dan Energi 120% dari kebutuhan T-4 PK : Protein Kasar RDP : Rumen Degraded Protein UDP : Undegraded Protein NDF : Neutral Detergent Fiber ADF : Acid Detergent Fiber a,b,c Superskrip yang berbeda pada baris yang sama menunjukkan ada perbedaan pada P<0,05

Konsumsi dan Kecernaan Nutrien
Rerata konsumsi bahan kering dan nutrien sapi perah yang mendapat ransum dengan aras
undegraded protein dan energi yang berbeda disajikan pada Tabel 3. Hasil penelitian menunjukkan bahwa aras UDP dalam ransum tidak berpengaruh terhadap konsumsi BK, BO, PK, RDP, NDF dan ADF. Aras energi
98
memberikan perbedaan pada konsumsi BK, BO, PK, RDP, UDP dan ADF. Hal ini disebabkan pada aras energi rendah ternak hanya mendapatkan 70% dari kebutuhan nutriennya, sedangkan pada aras energi tinggi ternak mendapat 120% dari kebutuhannya. Konsumsi RDP lebih tinggi pada aras energi tinggi sedangkan antara UDP 20 dan UDP 30 tidak berbeda nyata, pemenuhan kebutuhan protein bagi mikroba dalam rumen dapast tercapai dan tidak berbeda nyata pada level UDP yang berbeda. Konsumsi UDP tertinggi dicapai pada T-4 dan tidak berbeda nyata antara T-1, T-2 dan T-3 (Tabel 3). Konsumsi BK dan BO tertinggi dicapai pada ternak yang mendapat ransum T-4 (UDP tinggi dan energi tinggi), diikuti T-2 dan tidak berbeda nyata antara T-2 dan T-1. Kemampuan ternak untuk mengkonsumsi pakan tergantung pada faktor fisik dan faktor khemis. Pada ransum energi rendah ternak masih mampu mengkonsumsi pakan tetapi karena dibatasi maka ternak tidak mampu memenuhi kebutuhannya (kontrol diluar ternak), sedangkan pada aras energi 120% konsumsi ternak dikontrol oleh satiety fisik atau khemis. Faverdin (1995), Forbes et al. (1995) melaporkan bahwa kontrol satiety selain dikendalikan oleh faktor khemis, juga dikendalikan oleh faktor fisik yang berhubungan dengan kemampuan volume rumen untuk menampung ingesta. Tingginya konsumsi BK dan BO pada T-4 juga disebabkan konsumsi PK yang paling tinggi. Hal ini disebabkan adanya hubungan positif dengan konsumsi BK dan BO sesuai yang dikemukakan oleh Oldham et al. (1979) bahwa konsumsi bahan kering mempunyai respon positif terhadap konsumsi protein dan produksi susu pada sapi perah. Arroquy et al. (2004), melaporkan bahwa peningkatan suplementasi RDP mengakibatkan terjadinya peningkatan konsumsi BK dan BO hijauan secara linier. Suplementasi RDP berpengaruh positif terhadap konsumsi dan kecernaan hijauan, dan jika disediakan dalam kuantitas cukup, bisa menghindari efek negatif dari suplementasi (non free carbohydrat) NFC terhadap kecernaan serat. Konsumsi protein pada ternak yang mendapat ransum T-2 dan T-4 berbeda tidak nyata, sedangkan T-4 lebih tinggi (P<0,01) dibanding T-1 dan T-3, perbedaan ini disebabkan oleh perbedaan konsumsi BK dan kandungan PK ransum yang lebih tinggi pada T-4. Konsumsi NDF diantara empat ransum tidak berbeda nyata, sedangkan konsumsi ADF tertinggi pada T-4 (Tabel 3). Hasil penelitian menunjukkan bahwa kecernaan BK dan BO lebih tinggi (P<0,01) pada ternak yang
mendapat ransum dengan aras energi tinggi lebih tinggi dibanding ransum dengan aras energi rendah, tetapi kecernaan NDF dan ADF tidak berbeda nyata (Tabel 4). Hal ini disebabkan pada aras energi rendah aktivitas mikroba rumen tidak optimal pertumbuhannya. Hasil yang diperoleh Widyobroto et al. (2007) bahwa ransum dengan level energi tinggi memberikan hasil sintesis protein mikroba lebih besar dibanding ransum energi rendah. Aras UDP dan energi tidak berpengaruh secara nyata terhadap kecernaan fraksi serat (NDF dan ADF), dan hasil kecernaan fraksi serat relatif tinggi. Hal ini disebabkan kualitas serat ransum merupakan serat yang relatif mudah terdegradasi. Kerry dan Amos (1992) menunjukkan bahwa aras UDP tidak berpengaruh secara nyata terhadap kecernaan BK tetapi berpengaruh terhadap kecernaan PK. Aras UDP rendah memberikan kecernaan PK lebih tinggi dibanding aras UDP tinggi.
Glukosa dan Urea Plasma Darah

Hasil metabolit darah berupa urea dan glukosa plasma darah ternak yang mendapat ransum dengan aras UDP dan energi berbeda disajikan pada Tabel 5. Hasil penelitian menunjukkan bahwa aras UDP berpengaruh secara nyata terhadap kadar urea darah tetapi tidak berpengaruh pada kadar glukosa darah. Aras energi berpengaruh (P<0,05) terhadap glukosa darah, sedangkan aras UDP tidak berpengaruh secara nyata terhadap glukosa darah. Konsentrasi glukosa plasma darah lebih tinggi (P<0,05) pada ternak yang mendapat pakan energi tinggi dibanding ternak yang mendapat ransum energi rendah. Hal ini disebabkan konsumsi energi yang tinggi cenderung menghasilkan kinetik konsentrasi VFA yang relatif tinggi (Widyobroto et al., 2007), sehingga meningkatkan konsentrasi glukosa plasma darah. Aras UDP dalam ransum tidak berpengaruh nyata terhadap kadar glukosa darah, hal ini disebabkan aras UDP tidak berpengaruh terhadap intake BK. Sletmoen-Olson et al. (1999) melaporkan bahwa ternak yang mendapatkan ransum rendah UDP memberikan konsentrasi glukosa plasma konsisten lebih tinggi dibanding yang mengkonsumsi UDP sedang maupun tinggi. Sebaliknya Robinson et al. (1990) melaporkan bahwa konsentrasi glukosa plasma darah meningkat dengan meningkatnya aras UDP ransum, walaupun tidak berbeda nyata, hal ini disebabkan oleh adanya pasokan asam amino gligogenik yang tinggi pada pakan UDP tinggi yang merupakan bahan pembentuk glukosa dalam usus halus.
100
Tabel 4. Kecernaan nutrien sapi perah yang mendapat ransum dengan aras undegraded protein dan energi berbeda Variabel KcBK KcBO KcNDF KcADF T-1 75,07ab 76,97 ab 75,20 67,20 Ransum T-2 T-3 80,40 a 72,15 b 82,73 a 74,99 b 69,99 70,29 64,70 62,91 T-4 78,23 ab 82,26 a 71,75 64,34 Kontras 12vs34 13vs24 ns * ns ** ns ns ns ns
T-1 : Undegraded Protein 20% dan Energi 70% dari kebutuhan T-2 : Undegraded Protein 20% dan Energi 120% dari kebutuhan T-3 : Undegraded Protein 30% dan Energi 70% dari kebutuhan : Undegraded Protein 30% dan Energi 120% dari kebutuhan T-4 KcBK : Kecernaan Bahan Kering KcBO : Kecernaan Bahan Organik KcNDF : Kecernaan Neutral Detergent Fiber KcADF : Kecernaan Acid Detergent Fiber a,b,c Superskrip yang berbeda pada baris yang menunjukkan ada perbedaan pada P<0,05
Tabel 5. Konsentrasi urea dan glukosa plasma darah (mg/100 ml) pada sapi perah yang mendapat ransum dengan aras undegraded protein dan energi berbeda Fraksi glukosa urea T-1 58,88ab 34,44 a Ransum T-2 T-3 63,61 b 52,01 a 45,04 ab 54,44 b T-4 70,77 c 66,35 c Kontras 12vs34 13vs24 * ns ns *
T-1 : Undegraded Protein 20% dan Energi 70% dari kebutuhan T-2 : Undegraded Protein 20% dan Energi 120% dari kebutuhan T-3 : Undegraded Protein 30% dan Energi 70% dari kebutuhan T-4 : Undegraded Protein 30% dan Energi 120% dari kebutuhan abc Superskrip yang berbeda pada baris yang menunjukkan ada perbedaan pada (P<0,05)
Kadar urea darah lebih tinggi (P<0,05) pada ternak yang mendapat ransum UDP rendah dibanding UDP tinggi, hal ini disebabkan aras UDP rendah menghasilkan degradasi protein yang lebih tinggi, menyebabkan kadar urea rumen tinggi dan akhirnya kadar urea darah menjadi tinggi. Walaupun data kadar NH3 cairan rumen menunjukkan adanya kecenderungan lebih tinggi pada aras UDP rendah, tetapi tidak berbeda nyata. Rodriquez et al. (1997) melaporkan bahwa konsentrasi amonia rumen mencapai puncaknya satu jam setelah pemberian pakan dan selanjutnya turun dan konsentrasi terendah 6 jam setelah pemberian pakan. Sedangkan konsentrasi urea darah mencapai puncaknya 1,5-2 jam setelah puncak konsentrasi NH3 cairan rumen dan tergantung dari aras RDP dalam pakan.
memberikan kenaikan konsentrasi glukosa darah sedangkan peningkatan konsumsi UDP dalam protein ransum yang sama menurunkan kadar urea darah. Pemberian ransum dengan aras UDP dan energi tinggi pada sapi perah kering tidak dapat meningkatkan efisiensi penggunaan nutrien.
Ucapan Terimakasih
Pada kesempatan ini penulis mengucapkan terima kasih kepada Direktorat Penelitian dan Pengabdian, Direktorat Jenderal Pendidikan Tinggi, Departemen pendidikan Nasional yang telah memberikan dana untuk penelitian ini melalui Hibah Bersaing No. Kontrak 017/P2IPT/PHB/V/2000.
Kesimpulan
Berdasarkan hasil penelitian dapat disimpulkan bahwa pemberian aras UDP dan level energi yang melebihi kebutuhan dapat meningkatkan konsumsi BK, BO, PK, UDP, RDP, dan ADF, serta kecernaan BK, BO, dan PK. Peningkatan konsumsi energi
Daftar Pustaka
AOAC, 1975. Official Methods of Analysis Association. (13th ed.), Official Analytical Chemist. Association of Official Analytical Chemist, Washington, DC. Atkinson, R.L., C.D. Toone and P.A. Ludden, 2007. Effects of supplemental ruminally degradable
98
protein versus increasing amounts of supplemented ruminally undegradable protein on site and extent of digestion and ruminal characteristics in lambs fed low-quality forage. Journal of Animal Science 85: 3322-3330. Arroquy, J.I., R.C. Cochran, M. Villarreal, T.A. Wickersham, D.A. Llewellyn, E.C. Titgemeyer, T.G. Nagaraja, D.E. Johnson and D. Gnad, 2004. Effect of level of rumen degradable protein and type of supplemental non-fiber carbohydrate on intake and digestion of low-quality grass hay by beef cattle. Animal Feed Science and Technnology 115: 83-99. Baumann, T.A., G. P. Lardy, J. S. Caton and V. L. Anderson, 2004. Effect of energy source and ruminally degradable protein addition on performance of lactating beef cows and digestion characteristics of steers. Journal of Animal Science 82 : 2667 2678. Capper, B.S., D.J. Morgan, and W.H. Pan, 1977. Alkali treated roughages for feeding ruminants. Journal of Tropical Science 19: 2. Faverdin Ph., J.P. Dulphy, J.P. Coulo, R. Verite, J.P. Garel, J. Rouel and B. Marquis, 1991. Substitution of forage by concentrate for dairy cows. Livestock Production Science 27: 137-156. Forbes, J.M., 1995. Physical limitation of feed intake in ruminants and its interactions with other factors affecting intake. In : E.V. Engelhardt, S. LeonhadMarek, G.Greves, and D. Giesecke (Eds.), Ruminant Physiology : Digestion, Metabolism, Growth and Reproduction. Proceedings of the Eight International Symposium on Ruminant Physiology Pp : 217 230. Institut National de Recherche Agronomique, 1988. Alimentation des Bovins, Ovins et Caprins, Ed. R. Jarrige. Paris. 417 p. Kerry, C.M. and H.E. Amos, 1993. Effects of source and level of undegraded intake protein on nutrient use and performance of early lactation cows. Journal of Dairy Science 76(2): 499-513. Newbold. C.J., D.G. Chamberlain and P.C. Thomas, 1988. Effect of intraruminal infusions of sodium bicarbonate on the rate of passage and degradation of dietary proteins in cows given a silage-based diet. Proceeding of Nutrition Society 42: 287-293. Oldham, J. D., J. D. Sutton and A. B. McAllan, 1979. Protein digestion and utilization by dairy cows. Annual Research Vterinary 10 (2): 290-293.
Reksohadiprodjo, S., B.P. Widyobroto, M. Soejono dan H. Hartadi, 1998. Manajemen Nutrien Sapi Perah sebagai Kontribusi untuk Pencegahan Lingkungan. Rangkuman Laporan Penelitian Hibah Bersaing III. Fakultas Peternakan Universitas Gadjah Mada Yogyakarta. Robinson, P.H., R.E. Mcqueen and P.L. Burgess, 1991. Influence of rumen undegraded protein levels on feed intake and milk production of dairy cows. Journal of Dairy Science 74: 1623 1631. Rodriguez, L.A., C.C. Stallings, J.H. Herbein dan M.L. McGilliard, 1997. Diurnal variation in milk and plasma urea nitrogen in Holstein and Jersey cows in response to degradable dietary protein and added fat. Journal of Dairy Science 80: 33683376. Roseler, D.K., J.D. Ferguson, C.J. Sniffen and J. Herrema, 1993. Dietary protein degradability effects on plasma and milk urea nitrogen and milk nonprotein nitrogen in holstein cows. Journal of Dairy Science 76 (2 ): 525-534. SAS Institut Inc., 1987. SAS/STAT Guide for personal Computers. Version 6 Editions. SAS Institut Inc. Cary, NC, 1028 p. Sletmoen-Olsen, K.E., J.S. Caton, L.P. Reynolds and K.C. Olsen, 2000. Undegraded intake protein suplementation: I. Effects on blood hormone and metabolite concentration in periparturient beef cows fed low-quality hay during gestation and lactation. Journal of Animal Science 78: 456-463. Widyobroto B.P., SPS. Budhi, A. Agus and B. Santosa, 1999. Effect of undegraded protein level on nutrient digestibility and microbial protein synthesis of dairy cows. In : Lobley GE, A. White and JC. MacRae. (Ed). Protein metabolism and nutrition. Book of abstracts of the VIIIth International Symposium on Protein and Metabolism. P. 72. EAAP publication Wageningen Holland. Widyobroto B.P., SPS. Budhi dan A. Agus, 2007. Pengaruh aras undegraded protein dan energi terhadap kinetik fermentasi rumen dan sintesis protein mikroba pada sapi perah. (Effect of undegraded protein and energi level on rumen fermentation parameters and microbial protein synthesis in dairy cattle). Jurnal Pengembangan Peternakan Tropis (Journal of the Indonesia Tropical Animal Agriculture) 32 (3): 194-200.
106
Feeding Complete Feed Containing Different Acidogenic Value and Effective Fiber Affect Rumen Acidosis Depression
(Pemberian Ransum Komplit dengan Kandungan Acidogenic Value dan Kandungan Serat Efektip Berbeda Berpengaruh terhadap Depresi Rumen Acidosis)
Budi Rustomo*
ABSTRAK: Tujuan dari penelitian adalah untuk mengevaluasi pengaruh pemberian ransum komplit (complete feed, CF) dengan kandungan acidogenic value (AV) dan physically effective Neutral Detergent Fiber (peNDF) berbeda, terhadap tingkat depresi rumen acidosis pada sapi perah. Empat ransum komplit (CF) iso-energi dan iso-protein yang diformulasi dari bahan konsentrat dengan kandungan AV berbeda (AV rendah; LA = 9 mg Ca g-1 DM atau AV tinggi; HA = 6,5 mg Ca g-1 DM), dicampur dengan silase jagung dan alfalfa yang di cacah dengan ukuran partikel berbeda (kasar : CS; dan lembut : FS). Rataan panjang geometris partikel (Xgm) CS = 12,8 mm, FS = 10,2 mm. Perbedaan ukuran partikel hijauan menghasilkan peNDF>1.18 yang berbeda. Empat ekor sapi fistula laktasi dibagi secara acak untuk memperoleh satu dari 4 ransum percobaan dalam rancangan faktorial (2 x 2) (HACS, LACS, HAFS, dan LAFS). Rumen acidosis dievaluasi dengan pengukuran pH rumen secara kontinyu selama 4 hari berturut turut. Semua ransum percobaan menyebabkan subacute rumen acidosis (SARA) dengan tingkat depresi pH rumen yang berbeda. Tingkat depresi rumen acidosis dievaluasi dengan waktu yang di butuhkan ketika pH rumen dibawah atau pada saat pH rumen 5,6 dan 5,8. Peningkatan kandungan AV meningkatkan depresi rumen acidosis, yang ditandai dengan perpanjangan waktu selama pH rumen dibawah 5,6 (135.1 vs. 236.7 min d-1; LA vs. HA, berturut-turut) dan selama pH rumen dibawah pH 5.8 (290.0 vs. 480.6 min d-1; LA vs. HA, berturut-turut). Peningkatan peNDF>1.18 (CS) mampu memperpendek waktu selama pH rumen 5.8 (290.5 vs. 194.9 min/d) untuk sapi yang diberi pakan komplit dengan AV tinggi (HA), tetapi tidak untuk sapi yang diberi CF dengan AV rendah (LA). Peningkatan peNDF ransum dapat membantu memperkecil depresi rumen acidosis ketika diberi pakan CF dengan AV tinggi. Oleh sebab itu, AV dan peNDF dapat digunakan untuk memperbaiki formulasi ransum untuk memperkecil depresi rumen acidosis. Kata Kunci: Complete feed (CF), Acidogenic Value (AV), peNDF, pH rumen, rumen acidosis
Introduction Rumen acidosis is a common metabolic problem in dairy cattle (Nocek, 1997), associated with the rate and extent of acid production from feed fermentation. The severity of ruminal acidosis in cattle is variable and ranges from acute to subacute or chronic (Owens et al., 1998; Kleen et al., 2003). In dairy operations, sub-acute acidosis (SARA) is more common than acute acidosis. Feeding a diet high in ruminally fermentable carbohydrate (RFC) and/or low in effective fibre causes the initial rumen insult (Armentano and Pereira, 1997). SARA is identified by a daily repeated period of depressed rumen pH between 5.2 and 5.6 (Cooper et al., 1995; Cooper and Klopfenstein, 1996; Owens et al., 1998; Cumby et al., 2001). In spite of this, the length of time per day
*
Contact Person: brustomo@yahoo.com
when ruminal pH is below 5.6 (Keunen et al., 2002) or below 5.8 (Krause et al., 2002b; Krause and Combs, 2003) was a more important determinant of rumen acidosis depression than the mean daily ruminal pH. The clinical signs of SARA are not easily observed, but it can decrease feed intake (Garret et al., 1999). Animals suffering from SARA remain alert, but have transient anorexia, depression and dehydration (Underwood, 1992). Rumen acidosis is related to the amount of acid produced as feed is fermented and the ability of the feed to encourage chewing and production of salivary buffers. The possibility of alleviating ruminal acidosis relates to both the amount of acid produced from fermentation of feed and the ability of the feed to stimulate chewing and production of salivary buffers (Mertens 1997). Rustomo et al. (2006a) evaluated the acidogenic value (AV) of feeds using an in vitro laboratory technique. The AV varied with protein, starch, NFC and fiber contents of feedstuffs. Physically effective NDF (peNDF) has
Feeding Complete Feed (Rustomo)
109
been defined as the fraction of feed that stimulates chewing and saliva production (Mertens, 1997). Zebeli et al. (2006) reported that peNDF>1.18 was a better parameter to predict ruminal pH (R2 = 0.67) than peNDF>8 (R2 = 0.27). The peNDF>1.18 also provide better parameters to evaluate fiber effectiveness of rations rather than merely use dietary NDF or forage NDF. The objective of the present study was to evaluate the effects of, and the interaction between, level of feed AV and peNDF>1.18 on rumen acidosis depression in dairy cows.
Separator, Fort Atkinson, Wisconsin) as described by Kononoff et al. (2003a). All feed samples were sieved in triplicate. The geometric mean (Xgm) and standard deviation (Sgm) (Assessed by Standard S424, ASAE, 2001), and the peNDF>1.18 analysis are presented in Table 3. Experimental Design. The feeding experiment was conducted as a 4 x 4 Latin square with a 2 x 2 factorial treatment arrangement, with the duration of each period was 3 wk (14 d of adaptation and 7 d of data collection). Feed ingredient AV was used to formulate two isoenergetic (NEL = 1.5 0.01 Mcal kg-1) and isonitrogenous (CP = 17.4 0.1 % DM) concentrate diets (low AV, LA vs. high AV, HA). All diets were formulated to meet or exceed the requirements of a 620 kg multiparous cow producing 30 kg of milk per day according to the Cornell-PennMiner Dairy model version 3.0. Diets were fed as a CF with forage to concentrate ratio of 50:50. Two levels of forage particle size (CS and FS) were combined with the 2 levels of concentrate AV (HA and LA) to prepare 4 complete feed (CF) or total mix ration (TMR) in a data ranger (American Calan, Northwood, NH); HACS, HA concentrate + coarse silage; HAFS, HA concentrate + fine silage; LACS, LA concentrate + coarse silage and LAFS, LA concentrate + fine silage. Alfalfa haylage and corn silage (the theoretical length of cut 1.3 and 1.9 cm, respectively), provided the coarse forage of the diets (CS). The finely chopped forage (FS) was obtained by rechopping CS (1600 rpm for 36 min in a mixer; Taylor Model # 1350, Orton, ON). The ingredients composition of the concentrate are shown in Table 1 and dietary composition of the CF are presented in Table 2. Ruminal pH Measurements. Ruminal pH was measured continuously every minute for 4 d in each period using pH electrode (AlZahal et al. 2006). The pH probe was placed into the anterior region of the ventral sac of the rumen with a weight of 0.5 kg. The probe was connected to a data logger (pH Temp101, Monarch Instrument, Amherst, NH). The position of the pH electrode was examined 3 times each day. Electrodes and the pH transmitter were calibrated at recording period using standard pH 4 7 (Fisher Scientific, Fairlawn, NJ). Rumen fluid was also sampled 3 times each day for pH measurement using a pH meter (pH 310, Oakton Instruments, Vernon Hills, IL) to verify the accuracy of continuous ruminal pH recordings. The daily ruminal pH data were recorded
Research Methods
Animals and Feed Intake. Four multiparous fistulated Holstein dairy cows (114 14 DIM, and 600 66 kg live weight) were used in this trial. The cows were fed twice daily at 0900 and 1300 h in equal portions for ad libitum intake (10% refusals). Feed intake was recorded daily, and the animals had unlimited access to fresh water. Feed and ort samples were taken 3 times per week and stored at -20oC for later analysis. The DM of the feeds and orts were determined by oven drying at 60o C for 48 h (AOAC, 1990). Feed Analysis. The AV of feeds (mg Ca g-1 DM) were analyzed as described by Rustomo et al. (2006a). The chemical compositions of feeds were determined using standard AOAC (1990). Organic matter was assessed by ashing at 500oC for 16 h and CP, soluble protein and non-protein nitrogen was determined using the macro-Kjeldahl. Starch was analyzed using starch hydrolysis method (Hall, 2000), Ca and P using spectroscopy, ether extract, ADF and lignin using method of AOAC, (1990), NDF (AOAC, 2002) using A-3306 alpha amylase (Sigma-Aldrich, St. Louis, MO). Non-fiber carbohydrates (NFC) were calculated as NFC = 100 (% NDF + % CP+ % Fat + %Ash). Physicallly Effective NDF (peNDF) Analysis. The physically effective NDF (peNDF>1.18) was estimated using the total NDF content of the feed multiplied by the physical effectiveness factor (pef>1.18). The pef of particles > 1.18 mm (pef>1.18) was determined using the proportion of DM of particles retained on the top, middle- and bottom- screen of the PSPS (Heinrichs and Kononoff, 2002; Kononoff and Heinrichs, 2003a). The particle sizes of CF was assessed by the new compact Penn State Particle Size Separator (PSPS; C24682N, Nasco 3-sieves Forage Particle
106
using a data recording software (version 2.0, Monarch Instruments, Amherst, NH), and the pH data were summarized for each 24 h period by calculating the minimum, mean pH, and the amount of time below or at pH 5.6 and 5.8.
Table 1. Ingredient composition (% DM) and AV (mg Ca g-1feed DM) of the concentrate Ingredients Barley Wheat Oats Wheat bran Roasted soybeans Canola meal Corn gluten meal Fish meal Soybean meal Tallow Salt CaCO3 powder Dicalcium phosphate Selenium Mineral and vitamin premix
1
HACS 24.20 24.40 16.30 16.30 14.90 0.99 1.29 1.29 0.30 0.10
Treatments1 HAFS LACS 24.20 24.40 21.60 46.10 16.30 16.30 14.90 0.99 1.29 1.29 0.30 0.10 9.90 2.90 14.80 1.58 0.59 2.18 0.30 0.10
LAFS 21.60 46.10 9.90 2.90 14.80 1.58 0.59 2.18 0.30 0.10
Statistical Analysis. Data on the response variables were analyzed using PROC MIXED of SAS (v. 9.1; SAS Institute Inc., 2004) using the model: Yijkl = + Ci + Pj + Ak + Fl + (A x F)kl + ijkl; where Yijkl = the dependent variable, = overall mean, Ci = effect of cow (i = 1, 2, 3, 4), Pj = effect of period (j = 1, 2, 3, 4), Ak = effect of AV (k = 1,2), Fl = effect of peNDF (l = 1, 2), (A x F)kl = the effect of interaction of Ak and Fl, and ijkl = random residual error. The effects of AV and peNDF>1.18 were analyzed as fixed effects. For the repeated measurements of continuous ruminal pH data, day of sampling was analyzed as a fixed effect with repeated measurement. Results and Discussion Result of peNDF analysis are shown in Table 3. The geometric mean length of all diets was greater than the minimum of 6.4 mm that has been proposed to reduce rumination (Woodford et al., 1986). Rechopping forage reduced the geometric mean particle size and peNDF>1.18 of FS CF. The peNDF>1.18 was 40.4 vs. 38.5% DM for CS and FS diets, respectively. Kononoff and Heinrichs, (2003a) suggested that measuring peNDF>1.18 using PSPS is more reasonable parameter to assess physically effective fiber in the CF than that of peNDF>8, due to the large portion of concentrate that passes through an 8 mm screen..
Table 3. Particle size, physical effectiveness factor (pef>1.18) and peNDF>1.18 (%DM) of Complete Fed (CF)
Dependent Treatments1 P value HACS HAFS LACS LAFS SEM2 AV3 PS4 variable X gm, mm5 9.90 7.50 9.70 7.60 0.09 0.60 <0.01 Sgm, mm6 2.60 2.90 2.70 2.80 0.03 0.57 <0.01 NDF, % DM 41.70 42.60 44.00 44.00 0.77 0.02 0.17 7 pef>1.18 0.94 0.89 0.94 0.89 0.02 0.17 <0.01 8 peNDF>1.18 39.50 37.80 41.20 39.20 0.40 0.01 <0.01 1 Treatments: HACS = high acidogenic value concentrate, coarse forage; HAFS = high acidogenic value concentrate, fine forage; LACS = low acidogenic value concentrate, coarse forage; LAFS = low acidogenic value concentrate, fine forage. 2 SEM = Standard error of measurement (n = 12). 3 AV = Acidogenic value of the diet. 4 PS = Particle size of the diet. 5 Xgm = Geometric mean length as calculated by the ASAE (2001). 6 Sgm = Standard deviation as calculated by the ASAE (2001). 7 pef>1.18 = physical effectiveness factor measured as the proportion of DM retained on top-, middle- and bottom- screen. 8 peNDF>1.18 = physically effective NDF >1.18 mm = pef>1.18 multiplied by NDF content of TMR.
Treatments: HACS = High-AV concentrate and coarse silage, HAFS = High-AV concentrate and fine silage, LACS = Low-AV concentrate and coarse silage, LACS = Low-AV concentrate and fine silage.
Table 2. Dietary composition, chemical analysis and AV (mg Ca g-1 feed DM) of the complete feed (CF) Ingredients Ingredients (%; DM basis) Concentrates Corn silage2 Alfalfa silage3 Dry matter (%) Organic matter (% of DM) NEL (Mcal kg-1) Composition (%; DM basis) Crude protein, % of DM Soluble protein, % of DM Undegradable protein, % of CP NDF, % of DM ADF, % of DM NFC, % of DM Starch, % of DM Calcium, % of DM Phosphorus, % of DM Potassium, % of DM Magnesium, % of DM Sodium, % of DM AV, mg Ca g-1 DM
1
HACS 50.10 26.80 23.10 44.40 92.70 1.5 0 17.60 5.00 35.00 41.70 26.60 29.90 15.60 0.70 0.50 1.80 0.20 0.20 10.00
Treatments1 HAF S LACS 50.10 26.80 23.10 44.2 0 91.7 0 1.5 0 17.60 5.00 35.90 42.60 25.50 28.70 15.40 0.70 0.50 1.80 0.20 0.20 10.00 50.10 26.80 23.10 44.70 92.80 1.50 17.10 4.50 36.90 44.00 26.30 28.60 14.20 0.70 0.50 1.80 0.30 0.10 8.70
LAFS 50.10 26.80 23.10 44.70 92.80 1.50 17.30 4.70 36.60 44.00 26.10 27.90 13.80 0.70 0.50 1.80 0.30 0.10 8.70
Treatments: HACS = High-AV concentrate and coarse silage, HAFS = High-AV concentrate and fine silage, LACS = Low-AV concentrate and coarse silage, LACS = Low-AV concentrate and fine silage. 2 DM, 31.00 %; CP, 7.10 %; ADF, 27.90 %; NDF, 47.00 %; starch, 24.60 % and NFC, 39.50 %. 3 DM, 41.30 %; CP, 16.30%; ADF, 39.90 %; NDF, 55.10 %; starch, 0.40 % and NFC, 16.20%.
All diets resulted in similar pattern of ruminal pH changes during the day, which was related to feed intake. The ruminal pH declined after morning feeding and continuously depressed 8 h after afternoon feeding, then gradually increased and returned to normal pH (>6.0) over night (Figure 1).
109
additional acid-load derived from feed fermentation of a lower peNDF>1.18 (Table 4).
6,6 6,4 Ruminal pH 6,2 6,0 5,8 5,6 5,4 5,2 F e e d i n g F e e d i n g
6,4
Rumial pH (unit pH)
6,2
6,0
5,8
5,6
9:00 AM
10:00 AM
11:00 AM
12:00 PM
1:00 PM
Hours After Morning Feeding
LACS
LAFS
HACS
9: 00 10 :0 0 11 :0 0 12 :0 0 13 :0 0 14 :0 0 15 :0 0 16 :0 0 17 :0 0 18 :0 0 19 :0 0 20 :0 0 21 :0 0 22 :0 0 23 :0 0 0: 00 1: 00 2: 00 3: 00 4: 00 5: 00 6: 00 7: 00 8: 00
Hour
Figure 2a. Average Hourly Ruminal pH Changes Five Hours After Morning Feeding
HACS HAFS
6.2
LACS
LAFS
R u m in a l p H (u n it p H )
Figure 1. Daily Ruminal pH Changes of Experimental Cow Measured as Average Hourly Measurement of 4 Days Ruminal pH Readings.
6.0
The nadir of ruminal pH was attained at approximately 4 - 5 h after afternoon feeding. Although all diets resulted in a decreased ruminal pH or rumen acidosis, the rate and extent of rumen acidosis depression after morning feeding (Figure 2a) and afternoon feeding (Figure 2b) increased with increasing AV of CF, and with decreasing peNDF>1.18 of CF. As expected, the rate of pH depression after morning feeding was highest for HAFS and lowest for LACS. The rumen acidosis depression was prolonged after afternoon feeding. During the day, the HAFS cows spent approximately 9 h per day at ruminal pH below 5.8, as compared to only approximately 4 h per day for LACS cows. There was a tendency that HAFS cows maintained a sub-optimum ruminal pH (< 5.8) longer than HACS cows and the LAFS cows maintained a sub-optimum ruminal pH (< 5.8) longer than LACS cows (Figure 2b). These results indicate that at the same level of concentrates AV, reducing peNDF>1.18 resulted in a tendency of prolonged time spent at sub-optimal pH (< 5.8) and decreased time at the optimal pH (> 6.0). The trend in a decreased ruminal pH and an extended time spent at sub-optimum ruminal pH (< 5.8) due to increasing AV agree with the ruminal pH changes in in vitro study (Rustomo et al., 2006a) as well as in in vivo study (Rustomo et al., 2006b). Additionally, the tendency in an additional depression of ruminal pH due to decreasing peNDF>1.18, likely reflected the
5.8
5.6
5.4 1:00 PM 2:00 PM 3:00 PM 4:00 PM 5:00 PM
Hours After Afternoon Feeding (h) LACS LAFS HACS HAFS
Figure 2b. Average Hourly Ruminal pH Changes Five Hours After Afternoon Feeding
The effects of dietary treatments on ruminal pH are presented in Table 4. Increasing concentrate AV decreased mean pH (from 6.07 to 5.97) and minimum pH (from 5.49 to 5.34). Whereas increasing peNDF>1.18 did not affect ruminal pH changes. The results of rumen acidosis depressions due to feeding CF of different AV agree with the previous study of Rustomo et al. (2006b), where increasing concentrate AV increased time spent below pH 5.6 or below 5.8 by 2- 4 h d-1. Krause et al. (2002b) and Krause and Combs (2003) found that increasing dietary fermentability also increased time spent below pH 5.8. Based on time below pH 5.6 or 5.8, all cows used in the current study suffered sub acute rumen acidosis (SARA); however the SARA depression in HA cows was more severe than those in LA cows. Increasing concentrate AV increased time spent below pH 5.6 and 5.8 for
106
Table 4. Effect of acidogenic value of concentrate and forage particle size on mean-, minimum-, maximum-ruminal pH, time below pH 5.0 to 6.8 (min d-1), DMI (Kg d-1) and Acid Load Treatments1 P value Dependent variable Mean ruminal pH, Minimum ruminal pH Time below pH 5.6 Time below pH 5.8 DMI Acid load5
ad 1
HACS 6.01a 5.38a 227.02 423.55a 21.14 211.40a
HAFS 5.94a 5.29a 246.42 537.67a 21.21 212.10a
LACS 6.05ab 5.49ab 129.19 284.00b 21.58 187.75b
LAFS 6.08b 5.48b 140.94 296.00b 22.25 193.54ab
SEM2 0.03 0.04 40.09 54.86 0.60 5.40
AV3 0.01 0.004 0.02 0.003 0.26 0.01
peNDF4 0.50 0.27 0.70 0.26 0.56 0.57
AV x peNDF 0.13 0.40 0.92 0.37 0.63 0.65
Means within a row with different superscripts differ (P < 0.05); Treatments; HACS = high acidogenic value concentrate, coarse forage; HAFS = high acidogenic value concentrate, fine forage; LACS = low acidogenic value concentrate, coarse forage; LAFS = low acidogenic value concentrate, fine forage. 2 SEM = Standard error of measurements (n = 16); 3 AV = Acidogenic value of the diet; 4 peNDF = peNDF of the diet 5 Acid load = Acidogenic value of feed multiplied by DMI.
approximately 2 h d-1 and 3 h d-1, respectively. The depression in ruminal pH in the first 5 h after morning feeding (Figure 2a) was likely due to increased rumen acid load from the excessive accumulation of VFA rather than lactic acid (Oetzel, 2000). The acid load within the rumen are generated from feedstuffs as end products of organic matter fermentation by rumen microbes (Allen, 1997). In normal feeding conditions, VFA do not increase in the rumen at high enough concentration to depress ruminal pH dramatically. But when the rate of acid production is faster than the rate of absorption, the VFA accumulate within the rumen (Owens et al., 1998). During SARA, ruminal pH can drop below 5.5 with very low concentrations of lactate in the rumen (Plaizier 2004; Plaizier et al., 2001). Lactic acid may increase during adaptation to dietary changes (Owen, 1998), but it is generally an insignificant intermediary ruminal metabolite and may not have a great effect on ruminal pH during SARA (Allen, 1997). Owens et al. (1998) indicated that VFA are responsible for the pH depression between 5.0 and 6.0, whereas lactic acid production rarely occurs above a pH 5.0. Thus, total rumen acid load (mainly VFA), rather than lactate alone, is likely responsible for ruminal pH depression in SARA in the current study. The amount of carbohydrate that is necessary to induce ruminal acidosis varies with composition and fermentability of the non-fiber carbohydrate (NFC) fraction (Allen, 1997), and the content and degree of fineness of the structural carbohydrate (Mertens, 1997; Yang et al., 2001; Zebeli et al., 2006). In the present study, cows fed fine (FS) diets maintained a lower ruminal pH longer
than cows fed coarse (CS) diets after afternoon feeding (Figure 2b). This indicates that increasing level of peNDF>1.18 mitigated ruminal pH depression. However, the effect of increasing peNDF>1.18 on ameliorating ruminal pH depression was more apparent for cows fed high AV concentrate than those fed low AV concentrate. The lower effect of increased peNDF>1.18 on mitigating ruminal pH depression in low AV diets may have been caused by higher buffering capacity of low AV concentrate as opposed to the high AV concentrate. The low AV concentrate was mainly composed of 46.1 % wheat bran, which had high buffering capacity and could sustain a high rumen fluid pH during 24 h incubation (Rustomo et al., 2006a). Although increasing peNDF is believed could effectively stimulate chewing activity and salivary buffering, the current study showed that ruminal pH was not affected by peNDF>1.18 (Table 4). Mertens (1997) recommended that dairy cow diets contain a minimum of 22 % (1.0 to 2.0%) peNDF>1.18 of ration DM or cows consume 4.4 kg d-1 peNDF>1.18 to maintain a daily mean ruminal pH of 6.0 (Mertens, 1997). Zebeli et al. (2006), estimated a minimum requirement of 19 % ( 2.0 %) peNDF>1.18 of ration DM, or 4.1 kg d-1 (0.6 kg/100 kg of body weight) of peNDF>1.18 intake for the dairy cows fed CF to maintain mean daily ruminal pH 6.0. The peNDF>1.18 (> 39 %DM) and peNDF>1.18 intake (> 5 kg DM d-1) of all experimental diets in the present study were greater than the critical value of peNDF>1.18 or peNDF>1.18 intake. All experimental diets are expected to be adequate in effective fiber, and therefore, the effect of peNDF on ruminal pH was
109
small and not significant as compared to the effect of AV. The present study give another prove that increasing peNDF>1.18 over the critical value did not have a significant effect on ruminal pH changes. Other previous studies (Kononoff and Heinrichs (2003a and b), found that increasing dietary peNDF>1.18 above critical value (from 25.7 to 32.4 %DM) did not have significant effect on ruminal pH. The peNDF1.18 values were all above the proposed minimum peNDF>1.18 values to maintain daily mean ruminal pH 6.0 (Mertens, 1997 and Zebeli et al., 2006); i.e. the hypothetical ruminal acid-base equilibrium (Pitt et al., 1996). Also, all diets tested in the present study (Table 3) and in the studies of Kononoff and Heinrichs (2003a and b) had dietary NDF content of 29.1 to 32.6 (%DM), a range of NDF values that are far greater than the minimum dietary NDF recommendation of 25 % (NRC, 2001). In the study of Krause et al., (2002b), who found a significant effect of forage particle size on ruminal pH, the diets had dietary effective NDF values of 13.6 to 14.4 (%DM), and had an average dietary NDF content of 24.0 (%DM), which was below the critical value of peNDF>1.18 and NDF. Evaluation of time distribution using a frequency distribution curve of time at pH 5.0 up to 7.2 (Figure 3), shows that the time distribution curve of HA cows was shifted to a lower pH range, and hence, HA cows spent longer time at sub-optimum ruminal pH than that of LA cows. Additionally, when cows were fed CF of HA concentrate with coarse forage (CS) or higher peNDF>1.18, they spent less time at sub-optimum ruminal pH of 5.8 (290.5 vs. 194.9 min d-1, P = 0.01,
450 400 350 Time (min/d) 300 250 200 150 100 50 0 5 5,2 5,4 5,6 5,8 6
data not shown) and longer time at optimum pH of 6.4 (179 vs. 239.3 min d-1, P = 0.06, data not shown) as compared to the cows fed LA concentrate with coarse forage or higher peNDF>1.18. These results suggest that increased peNDF>1.18 attenuated ruminal pH drops presented by a shorter time spent at low ruminal pH 5.8 and/or by the longer time spent at high ruminal pH 6.4. However, the effect of increasing FPS on ameliorating ruminal pH depression was more apparent with the consumption of HA concentrate than with LA concentrate. As mentioned earlier, the small effect of increased peNDF>1.18 on attenuating ruminal pH drops in LA diets observed in the present study may have resulted from a higher intrinsic buffering capacity of LA concentrate as reflected by lower acid-load from LA concentrate compared to the HA concentrate (190.65 vs. 211.75 mg Ca/kg DM; P = 0.008, data not shown). All experimental CF diets did not affect dry matter intake (DMI). The significant decrease in DMI caused by increasing fermentability of feeds found in the study of Krause et al., (2002a) was likely because of the more severe ruminal pH depression demonstrated by the longer time spent below pH 5.8 (10.8 h d-1) (Krause et al., 2002b). Thus, the result of the present study also give another attention to the importance of the relationship between the extent of ruminal pH depression below pH 5.8 and the DMI depression. There may be a critical time of ruminal pH depression below pH 5.8, above which the depression would affect DMI depression. The effect of time and ruminal pH depression on DMI depression warrant further study.
6,2
6,4
6,6
6,8
7,2
Ruminal pH
LACS
LAFS
HACS
HAFS
Figure 3. Time spent at ruminal pH 5.0 to 7.2 for the dietary treatments (HACS = high acidogenic value concentrate, coarse forage; HAFS = high acidogenic value concentrate, fine forage; LACS = low acidogenic value concentrate, coarse forage; LAFS = low acidogenic value concentrate, fine forage).
108
Conclusion
Rumen acidosis depression was more affected by the direct effect of increased acid load (AV) derived from feed fermentation within the rumen, rather than the indirect effect of rumen buffering due to consumption of effective fiber (peNDF>1.18). The small and non significant effect of peNDF>1.18 of CF on rumen acidosis was likely due to the high dietary peNDF>1.18 or high dietary NDF of the experimental complete feed diets above that of the critical value recommended to affect ruminal pH depression. Using dietary AV approach is likely more useful to predict ruminal pH changes than using the peNDF or NDF approach. Therefore, using the AV and peNDF>1.18 approaches would give a better diet formulation to mitigate rumen acidosis depression in dairy cows, rather than using the peNDF>1.18 approach alone.
Calberry, J. M., J.C. Plaizier, M.S. Einarson and B.W. McBride 2003. Effects of replacing chopped alfalfa hay with alfalfa silage in a total mixed ration on production and rumen conditions of lactating dairy cows. Journal of Dairy Science 86: 3611-3619. Cooper, R. and T. Klopfenstein, 1996. Effect of Rumensin in feed intake variation on ruminal pH. Scientific Update on Rumensin/Tylan/Mycotil for the Professional Feedlot Consultant. Elanco Animal Health, Indianapolis, IN. Cooper, S. B. D., Kyriazakis, I. and J. V. Nolan, 1995. Diet selection in sheep: the role of the rumen environment in the selection of a diet from two feeds that differ in their energy density. British Journal of Nutrition 74: 39-54. Cumby, J. L., Plaizier, J. C., Kyriazakis, I. and B. W. McBride. 2001. Effect of subacute ruminal acidosis on the preference of cows for pellets containing sodium bicarbonate. Canadian Journal of Animal Science 81: 149-152. Dewhurst, R. J., Wadhwa, D., Borgida, L. P. and W. J. Fisher. 2001. Rumen acid production from dairy feeds. 1. Effects on feed intake and milk production of dairy cows offered grass or corn silages. Journal of Dairy Science 84: 2721-2729. Garret, E.F., M.N. Pereira, K.V. Nordlund, L.E. Armentano, W.J. Goodger, and G.R. Oetzel. 1999. Diagnostic methods for detection of subacute ruminal acidosis in dairy cows. Journal of Dairy Science 82: 1170-1178. Hall, M. B. 2000. Starch gelatinization and hydrolysis method. Neutral detergent soluble carbohydrates, Nutritional Relevance and Analysis A Laboratory manual (p.29 38). Dept. of Animal Science, Univ. of Florida, Gainesville 3261-0910. Heinrichs, J. A. and Kononoff, P. J., 2002. Evaluating particle size of forages and TMRs using the New Penn State Particle Size Separator. Penn State, University Park, PA. Keunen, J. E., Plaizier, J. C., Kyriazakis, I., Duffield, T. F., Widowski, T. M., Lindinger, M. I. and B. W. McBride. 2002. Effect of sub-acute ruminal acidosis model on the diet selection of dairy cows. Journal of Dairy Science 85: 3304-3313. Kleen, J. L., Hooijer, G. A., Rehage, J, and J. P. Noodhuizen. 2003. Subacute ruminal acidosis (SARA): A Review, Journal of Veterinary Medicine A Physiology Pathology Clinic Medical 50: 406-414
References
Allen, M. S., 1997. Relationship between fermentation acid production in the rumen and the requirement for physically effective fiber. Journal of Dairy Science 80: 1447-1462. Allen, M.S., 2000. Effect of diet on short-term regulation of feed intake by lactating dairy cattle. Journal of Dairy Science 83: 1598-162. AlZahal, O., B. Rustomo, T. F. Duffield, and B. W. McBride. 2006. A cordless system for continuous recording of ruminal pH in dairy cows. Journal of Dairy Science, 88 (Suppl. 1): 193 (Abstr. T228). Armentano L. and M. Pereira. 1997. Measuring the effectiveness of fibre by animal response trial. Journal of Dairy Science, 80:1416-1425. ASAE. 2001, S424. Method of determining and expressing particle size of chopped forage materials by sieving. Standards Am. Soc. Agric. Eng., St. Joseph, MI. Association of Official Analytical Chemists. 1990. Official method of analysis. 15th ed. AOAC, Washington, DC. Beauchemin, K. A. and W. Z. Yang, 2005. Effects of physically effective fiber on intake, chewing activity, and ruminal acidosis for dairy cows fed diets based on corn silage. Journal of Dairy Science 88: 2117-2129. Buckmaster, D.M., 2000. Particle size in dairy cows. In Recent advances in animal nutrition. P. C. Garnsworthy and J. Wisemna, ed. Pages 109-128 Nottingham University Press, Nottingham, UK.
109
Kononoff, P. J. and A. J. Heinrichs. 2003a. The effects of reducing alfalfa haylage particle size on cows in early lactation. Journal of Dairy Science 86: 14451457. Kononoff, P. J. and A. J. Heinrichs. 2003b. The effects of corn silage particle size on cows in early lactation. Journal of Dairy Science 86: 2438-2451. Kononoff, P. J., Heinrichs, A. J. and D. R. Buckmaster. 2003a. Modification of Penn state forage and total mixed ration particle separator and the effects of moisture content on its measurements. Journal of Dairy Science 86: 1858-1863 Kononoff, P. J., Heinrichs, A.J. and H. A. Lehman. 2003b. The effect of corn silage particle size on eating behavior, chewing activities, and rumen fermentation in lactating dairy cows. Journal of Dairy Science 86: 3343-3353. Krause, K. M. and D. K. Combs. 2003. Effects of particle size, forage, and grain fermentability on performance and ruminal pH in mid lactation Cows. Journal of Dairy Science 86: 1382-1397. Krause, K. M., Combs, D. K. and K. A. Beauchemin. 2002a. Effects of particle size and grain fermentability in mid lactation cows. I. Milk Production and diet digestibility. Journal of Dairy Science 85: 1936-1946. Krause, K. M., Combs, D. K. and K. A. Beauchemin. 2002b. Effects of particle size and grain fermentability in mid lactation cows. II. Ruminal pH and chewing activity. Journal of Dairy Science 85: 1947-1957. Krause, K.M., Combs, D.K. and K.A. Beauchemin, 2003. Effect of increasing levels of refined cornstarch in the diet of lactating dairy cows on performance and ruminal pH. Journal of Dairy Science 86: 13411353. Mertens, D. R., 1997. Creating a system for meeting the fiber requirements of dairy cows. Journal of Dairy Science 80: 1463-1481. Nocek, J.E., 1997. Bovine Acidosis: Implications on Laminitis. Journal of Dairy Science, 80: 1005- 1028. Owens, F. N., D. S. Secrist, W.J. Hill, and D.R. Gill, 1998. Acidosis in cattle: A Review. Journal of Animal Science 76: 275-286. Oetzel, G.R. 2000. Clinical aspects of ruminal acidosis in dairy cattle. Proceeding of American Association Bovine Practices 33: 46-53.
Pitt, R. E., Van Kessel, J. S., Fox, D. G., Pell, A. N., Barry, M. C. and P. J. Van Soest. 1996. Prediction of ruminal volatile fatty acids and pH within the net carbohydrate and protein system. Journal of Animal Science 74: 226-24 Plaizier, J. C. 2004. Replacing chopped alfalfa hay with alfalfa silage in barley grain and alfalfa based total mixed rations for lactating cows. Journal of Dairy Science 87: 2495-2505. Plaizier, J. C., Martin, A., Duffield, T. F., Bagg, R., Dick, P. and B. W. McBride. 2001. Effect of subacute ruminal acidosis on in situ digestion of mixed hay in lactating dairy cows. Canadian Journal of Animal Science 81: 421-423. Rustomo, B., J.P. Cant, M.Z. Fan, T.F. Duffield, N.E. Odongo and B.W. McBride, 2006a. Acidogenic value of feeds I. The relationship between the acidogenic value of feeds and in vitro ruminal pH changes. Canadian Journal of Animal Science 86: 109-117. Rustomo, B., O. AlZahal, J.P. Cant, M.Z. Fan, T.F. Duffield, N.E. Odongo, and B.W. McBride, 2006b. Acidogenic value of feeds II. Effects of rumen acidload from feeds on dry matter intake, ruminal pH, fiber degradability and milk production in the lactating dairy cow. Canadian Journal of Animal Science 86: 119-126. SAS Institute, Inc., 2004. SAS users guide. Statistics. Version 9.1. ed. 2004. SAS Institute, Inc., Cary, NC. Underwood, W.J., 1992. Rumen lactic acidosis. Part. Epidemiology and pathology. Compendium of Continued Education Practice Veterinary 14: 11271133. Woodford, S.T., N.A. Jorgensen and G.P. Barrington, 1986. Impact of dietary fiber and physical form on performance of lactating dairy cows in early lactation. Journal of Dairy Science 68: 1035-1047. Yang, W. Z., K.A. Beauchemin and L.M. Rode, 2001. Effects of grain processing, forage to concentrate ratio, and forage particle size on rumen pH and digestion by dairy cows. Journal of Dairy Science 84: 2203-2216. Zebeli, Q., M. Tajaf, H. Steingass, B. Metzler, and W. Drochner, 2006. Effects of physically effective fiber on digestive process and milk fat content in early lactating dairy cows fed total mixed rations. Journal of Dairy Science 89: 651-66.
Vol.10 No.2
Minyak Ikan Lemuru dan Suplementasi Vitamin E dalam Ransum Ayam Broiler sebagai Imunomodulator
(The Lemuru Fish Oil and the Suplemen of Vitamin E in the Diet of Broiler Chicken as an Immunomodulator)
Denny Rusmana 1, Wiranda Gentini Piliang2, Agus Setiyono3, dan Slamet Budijanto4
1 2
Fakultas Peternakan Universitas Padjadjaran, Bandung Fakultas Peternakan Institut Pertanian Bogor, Bogor 3 Fakultas Kedokteran Hewan Institut Pertanian Bogor, Bogor 4 Teknologi Pertanian Institut Pertanian Bogor, Bogor
ABSTRACT: The research was conducted using lemuru fish oil and vitamin E supplementation in broiler chicken diet as an immunomodulator. The experiment design was used a completely randomized design with 3 x 3 factorial patern. Nine treatment diets were consisted of three levels of lemuru fish oil supplementation (0, 3, and 6%) as the first factor, and vitamin E supplementation (0, 100, and 200ppm) as the second factor and its combinations. All data were analyzed by analysis of variance and Duncan multiple ranges. There were no significant differences among treatments on antibody titers responses after first ND vaccination, but gave significantly differences on antibody titers (P<0,05) after the second ND vaccination. There were interaction effects of dietary lemuru fish oil and vitamin E on the increasing of the antibody titers. There were no interaction effects of lemuru fish oil and vitamin E on antibody titers responses to IBD. Vitamin E supplementation significantly increased (P<0,05) antibody titers responses to IBD, but not the lemuru fish oil supplementation. The amount of lymphocyte was significantly increased (P<0,05) due to the lemuru fish oil supplementation but not due to the vitamin E supplementation. Key Words: Lemuru fish oil, vitamin E, broiler chicken, immunomodulator
Pendahuluan
Tantangan paling berat dibidang peternakan unggas diantaranya adalah pencegahan penyakit. Daya tahan tubuh ternak merupakan benteng utama untuk mencegah terjangkitnya penyakit. Daya tahan adalah kemampuan tubuh untuk menangkal dan melawan penyakit. Oleh karena itu, daya tahan terkait erat dengan sistem pertahanan kekebalan (imunitas) tubuh yang ditunjang oleh sel imun serta antibodi. Kinerja dan penampilan ternak yang terjangkit penyakit akan diperburuk oleh kesalahan penyusunan ransum. Penyusunan ransum pada dasarnya hanya ditekankan kepada terpenuhinya kebutuhan energi, protein vitamin dan mineral. Asam lemak tak jenuh ganda (PUFA) jarang menjadi perhatian dalam penyusunan ransum. Padahal PUFA merupakan perkursor dari beberapa zat yang mempengaruhi sistem imun. Asam lemak n-6 merupakan perkursor dari prostaglandin E2 (PGE2), dan prostasiklin I2 (PGI2). Asam lemak n-3 merupakan perkursor dari prostaglandin E3 (PGE3), dan prostasiklin I3(PGI3).
Pada sistem pertahanan tubuh, aktivitas PGE2 menyebabkan imunosupresif yang secara anatomis diperlihatkan oleh atrofi organ limfoid (Husband, 1995). Hal ini bergantung pada kekuatan aktifitas prostasiklin I2 yang mempunyai peran sebagai imunostimulan dalam jaringan organ limfoid (Lowenthal et al., 1994). PGE2 dan PGI2 disintesa dari asam arakhidonat (AA) yang metabolismenya meningkat pada reaksi pertahanan tubuh Metabolisme AA dihambat oleh asam lemak n-3 yakni linolenat (LNA) dan eikosa pentaenoat (EPA), karena dikatalisasi oleh enzim yang sama. Sifat penghambatan ini menjadi kuat apabila LNA sudah dimetabolisme menjadi EPA (Hwang et al., 1988). Kehadiran linolenat dan EPA diharapkan dapat mengurangi sifat imunosupresif dari asam lemak n-6. Atas dasar itulah perlu dipertimbangkannya kehadiran asam lemak n-3 linolenat (LNA) dan EPA ke dalam ransum ayam broiler, karena lebih dari 50% ransum ayam broiler adalah jagung. Pakan jagung banyak mengandung asam lemak n-6, sehingga dengan ditambahkannya minyak yang kaya asam lemak n-3 dapat menekan metabolisme dari asam lemak n-6. Minyak ikan dapat dijadikan alternatif
110
Minyak Ikan Lemuru (Rusmana et al.)
115
pakan sumber asam lemak n-3. Rusmana et al. (2000), melaporkan bahwa penambahan minyak ikan tuna sebesar 6% dalam ransum ayam kampung dapat meningkatkan kandungan asam lemak n-3, EPA dan asam dokosa heksaenoat (DHA), dan menekan kandungan AA dalam jaringan. Minyak ikan yang sangat potensial di Indonesia adalah minyak ikan lemuru. Minyak ikan lemuru merupakan hasil sampingan pembuatan tepung ikan dan pengalengan ikan lemuru (Sardinella Longiceps). Produksi ikan lemuru (Sardinella Longiceps) di Indonesia rata-rata mencapai 15,84% per tahun dari produksi total semua jenis ikan. Muncar sebagai daerah penangkapan utama ikan lemuru, produksi rata-rata pertahun 81,37% dari total produksi ikan lemuru di Jawa Timur. Pendataan selama lima tahun terakhir puncak musim lemuru jatuh pada setiap awal musim yaitu bulan Oktober sampai dengan bulan Desember, walaupun terlihat juga pada bulan April sampai Juni. Sepanjang tahun dapat tertangkap dalam jumlah kecil (Bandie, 1982). Kandungan lemak atau minyak dari ikan lemuru sekitar 4,5-11,8% (Hanafiah dan Murdinah, 1982), Penambahan minyak ikan terlalu tinggi dalam ransum ternyata memberikan efek yang kurang menguntungkan. Asam lemak tak jenuh ganda sangat mudah teroksidasi, berdasarkan hasil penelitian Wander et al. (1997) pemberian Asam lemak tak jenuh ganda menurunkan vitamin E dan peningkatan peroksidasi lemak dalam plasma. Pada gilirannya defisiensi vitamin E akan mempengaruhi fungsi kekebalan tubuh. Defisiensi vitamin E telah
menunjukkan penekanan respon imun pada semua spesies (Meydani 1995) Konsekuensinya, peningkatan konsentrasi vitamin E dibutuhkan ketika mengkonsumsi asam lemak n-3.
Metode Penelitian
Penelitian menggunakan metode eksperimental. Rancangan percobaan yang digunakan adalah rancangan acak lengkap pola faktorial 3 x 3 dengan empat ulangan. Perlakuan merupakan kombinasi tingkat pemberian minyak ikan lemuru, dan suplementasi vitamin E. Terdiri dari tiga tingkat pemberian minyak ikan lemuru (0%, 3% dan 6%), dan 3 tingkat suplementasi vitamin E (0, 100,dan 200 ppm). Terdapat sembilan kelompok ransum perlakuan. Komposisi dan kandungan nutrien ransum perlakuan dapat dilihat pada Tabel 1 dan 2. Penelitian menggunakan ayam broiler jantan dan betina CP 707. Jumlah ayam yang digunakan 216 ekor. Ayam dibagi secara acak ke dalam sembilan kelompok perlakuan. Pada setiap kelompok dibagi lagi secara acak ke dalam empat sub kelompok. Setiap sub kelompok terdapat 6 ekor ayam. Ayam dipelihara dari umur sehari (DOC) sampai umur 42 hari dan diberi ransum penelitian. Selama pemeliharaan ayam diberi vaksin Newcastle Diseases (ND). Vaksin ND diberikan pada umur 4 hari (melalui tetes mata), dan pada umur 21 hari (melalui air minum). Vaksin Infecious Bursa diseases (IBD) diberikan pada umur 11 hari (melalui air minum).
Tabel. 1 Komposisi ransum penelitian Bahan makanan Jagung Bungkil kedelai (%) Minyak kelapa sawit (%) Minyak ikan lemuru (%) Vitamin + mineral (%) Dicalciumphosphat (%) CaCO3 (%) Metionin (%) NaCl (%) Vitamin E (ppm) R1 50,00 39,00 6,00 0,00 1,00 2,15 1,15 0,30 0,40 100 R2 50,00 39,00 3,00 3,00 1,00 2,15 1,15 0,30 0,40 100 R3 50,00 39,00 0,00 6,00 1,00 2,15 1,15 0,30 0,40 100 R4 50,00 39,00 6,00 0,00 1,00 2,15 1,15 0,30 0,40 100 100 R5 50,00 39,00 3,00 3,00 1,00 2,15 1,15 0,30 0,40 100 100 R6 50,00 39,00 0,00 6,00 1,00 2,15 1,15 0,30 0,40 100 100 R7 50,00 39,00 6,00 0,00 1,00 2,15 1,15 0,30 0,40 200 100 R8 50,00 39,00 3,00 3,00 1,00 2,15 1,15 0,30 0,40 200 100 R9 50,00 39,00 0,00 6,00 1,00 2,15 1,15 0,30 0,40 200 100
116
Tabel 2. Kandungan nutrien dan energi metabolis (EM) ransum Nutrien dan EM EM (kkal/kg) Protein kasar (%) Lemak kasar (%) Serat kasar (%) Ca (%) Nonpitat P (%) Lisin (%) Metionin (%) Metionin+sistin (%) Vitamin E (ppm) n-3 (%) n-6 (%) n-3/n-6 R1 R2 R3 R4 R5 R6 R7 R8 R9 3060,70 3056,20 3051,70 3060,70 3056,20 3051,703060,70 3056,20 3051,70 21,46 21,46 21,46 21,46 21,46 21,46 21,46 21,46 21,46 8,21 8,21 8,21 8,21 8,21 8,21 8,21 8,21 8,21 3,83 3,83 3,83 3,83 3,83 3,83 3,83 3,83 3,83 1,23 1,23 1,23 1,23 1,23 1,23 1,23 1,23 1,23 0,59 0,59 0,59 0,59 0,59 0,59 0,59 0,59 0,59 1,18 1,18 1,18 1,18 1,18 1,18 1,18 1,18 1,18 0,63 0,63 0,63 0,63 0,63 0,63 0,63 0,63 0,63 0,98 0,98 0,98 0,98 0,98 0,98 0,98 0,98 0,98 17,88 16,83 15,78 117,88 116,83 115,78 217,88 216,83 215,78 0,08 0,55 1,02 0,08 0,55 1,02 0,08 0,55 1,02 1,73 1,78 1,80 1,73 1,78 1,80 1,73 1,78 1,80 0,05 0,31 0,56 0,05 0,31 0,56 0,05 0,31 0,56
Parameter yang diamati adalah respon kekebalan tubuh terdiri dari: 1. Pengukuran titer antibodi ND primer Pada hari ke 14 setelah diberi vaksin ND pertama (umur 18 hari) masing-masing kandang diambil tiga ekor ayam untuk diambil sampel darahnya. Sampel darah diambil melalui pembuluh darah vena untuk dukur titer antibodi. Metode yang digunakan adalah metode HI. 2. Pengukuran titer antibodi ND sekunder Pada hari ke14 setelah diberi vaksin ND kedua (umur 35 hari) masing-masing kandang diambil tiga ekor ayam untuk diambil sampel darahnya. Sampel darah diambil melalui pembuluh darah vena untuk diukur titer antibodi. Metode yang digunakan adalah metode HI. 3. Pengukuran titer antibodi IBD Pada hari ke14 setelah diberi vaksin IBD (umur 25 hari) masing-masing kandang diambil dua ekor ayam untuk diambil sampel darahnya. Sampel darah diambil melalui pembuluh darah vena untuk dukur titer antibodi. Metoda yang digunakan adalah metode ELISA .
Analisis Statistika Data yang terkumpul dianalisis dengan analisis ragam yang dilanjutkan dengan uji jarak berganda Duncan. Analisis statistika diuji pada taraf nyata 5%.

Pengaruh Antibodi Perlakuan Terhadap Titer
Analisis Diferensiasi Sel Darah Putih

Ayam umur 40 hari diambil sampel darah. Setiap kandang diambil 2 ekor. Sampel darah ditampung dalam tabung EDTA ukuran 2ml. Selanjutnya sampel darah dihitung komposisi komponen sel darah putih dengan pengamatan preparat ulas dibawah mikroskop.
Respon titer antibodi terhadap ND dan IBD antar pemberian ransum perlakuan diamati setelah empat belas hari dari vaksinasi. Respon titer antibodi terhadap ND tidak terdapat perbedaan yang nyata (P>0,05) antar pemberian ransum terhadap vaksin ND yang pertama (ND primer). Perbedaan respon titer antibodi terhadap ND antar perlakuan pemberian ransum perlakuan terlihat nyata (P<0,05) terhadap vaksin ND kedua (ND sekunder), bahkan terlihat adanya interkasi antara penambahan minyak ikan lemuru dan vitamin E. Perbedaan respon titer antibodi terhadap IBD antar perlakuan pemberian ransum menunjukkan tidak terdapat adanya interaksi antar pemberian minyak ikan lemuru dan suplementasi vitamin E. Perbedaan respon titer antibodi terhadap IBD antar perlakuan pemberian minyak ikan lemuru tidak menunjukkan perbedaan yang nyata (P>0,05). Perbedaan yang nyata (P<0,05) respon titer antibodi terhadap IBD hanya ditunjukan antar perlakuan suplementasi vitamin E.
115
Tabel 3. Pengaruh perlakuan terhadap titer antibodi ND primer dan ND sekunder Vitamin E (ppm) 0 Minyak Ikan Lemuru (%) 0 3 6 0 3 6 0 3 6 ND Titer Primer (log 2) 5,50 1,38 a 6,00 0,60 a 5,58 1,16 a 5,67 0,65 a 5,75 0,75 a 5,33 1,07 a 5,92 1,24 a 5,58 0,79 a 6,00 1,35 a ND Titer Sekunder (log 2) 6,08 1,00 e 6,42 1,24 de 7,17 0,83 cd 8,42 1,31 ab 7,58 1,00 bc 7,92 1,38 bc 7,00 0,95 cde 7,67 0,49 bc 9,08 1,44 a
100
200
a,b,c,d,e
Supeskrip yang berbeda pada kolom yang sama menunjukkan ada perbedaan pada P<0,05
Tabel 4. Pengaruh perlakuan terhadap titer antibodi IBD Faktor Vitamin E (ppm) 0 100 200 Rataan 0 2,11 0,93 2,44 0,88 2,89 0,60 2,48 0,85a Minyak Ikan Lemuru (%) 3 2,13 0,64 2,63 0,52 2,56 0,88 2,44 0,71a Rataan 6 2,22 0,97 2,88 0,64 2,67 0,71 2,59 0,81a 2,15 0,83 A 2,65 0,70 A 2,70 0,72 B
Suplementasi vitamin E pada ransum perlakuan melebihi kebutuhan normal (100 dan 200 ppm). Kandungan vitamin E pada ransum yang tidak disuplementasi vitamin E berkisar 15,78 17,88 ppm. Menurut Piliang (2002), kebutuhan vitamin E untuk ayam periode starter adalah 30 ppm, sedangkan periode pertumbuhan adalah 10 ppm. Peningkatan suplementasi vitamin E dari 100 200 ppm memperlihatkan efek peningkatan respon titer antibodi ND sekunder dan IBD. Menurut Parakasi, (1988) pemberian vitamin E yang melebihi kebutuhan normal dapat mempengaruhi mekanisme resistensi tubuh dengan meningkatnya pembentukan antibodi secara efisien pada ayam muda maupun ayam dewasa, dosis efektif vitamin E untuk meningkatkan respon antibodi adalah berkisar 130 150 ppm pada makanan yang telah mengandung 35 60 ppm. Sedangkan menurut Erf et al. (1988) kandungan vitamin E 87 ppm dalam ransum dapat memberikan dampak terhadap sistem imun. Mengingat minyak ikan lemuru mudah teroksidasi maka penambahan vitamin E sebanyak 100 -200 ppm memiliki dua fungsi yaitu sebagai antioksidan dan meningkatkan daya tahan tubuh. Peranan asam lemak tak jenuh baru memperlihatkan imunomodulator efek pada respon titer antibodi sekunder terhadap ND. Respon titer anti bodi terhadap ND tidak terdapat perbedaan yang nyata antar pemeberian ransum setelah vaksin ND yang pertama (ND primer). Perbedaan respon titer
antibodi terhadap ND antar perlakuan terlihat nyata (P<0,05) setelah vaksin ND kedua ((ND sekunder). Sesuai yang dilaporkan oleh Sijben et al. (2000) efek Immunomodulator oleh asam lemak tak jenuh ganda lebih besar pengaruhnya pada sekunder dari pada primer terhadap patogen. Pada Tabel 3 dapat dilihat peningkatan respon titer antibodi terhadap ND setelah vaksin ND yang kedua akibat penambahan minyak ikan lemuru pada ransum tanpa suplementasi vitamin E dan yang disuplementasi vitamin E sebanyak 200 ppm. Peranan imunomodulator dari asam lemak n-3 dilaporkan oleh Sijben et al. (2001), meningkatnya LNA pada kandungan asam linoleat (LA) rendah ternyata respon titer antibodi terhadap Mycobacterium butyricum menunjukkan peningkatan, demikian juga pada tingkat LA tinggi peningkatan LNA dalam ransum menunjukkan peningkatan respon titer antibodi terhadap Mycobacterium butyricum. Peningkatan penambahan minyak ikan lemuru dari 0, 3, dan 6% dalam ransum penelitian menyebakan peningkatan imbangan asam lemak n-3 terhadap asam lemak n-6 berturut turut yakni 0,05, 0,031, dan 0,056 (Tabel 2). Kandungan asam lemak n-3 meningkat berturut turut dari 0,08, 0,55, dan 1,02 % dengan kandungan asam lemak n-6 yang relatif tidak begitu besar peningkatannya yaitu berturut-turut dari 1,73, 1,78, dan 1,80%. Berdasarkan hasil pembahasan dapat disimpulkan
116
bahwa asam lemak n-3 memiliki peran sebagai imunomodulator. Hal ini sesuai dengan Huang et al. (1992), melaporkan bahwa pada pemberian asam lemak n-3 PUFA yang tinggi dalam ransum (20g minyak ikan/100g ransum) menghasilkan persentase sel B tertinggi pada tikus yang diinfeksi Listeria. Pengamatan respon titer antibodi terhadap ND diamati setelah 14 hari ayam divaksin ND, ini bisa dianggap sebagai penginfeksian yang diharapkan dapat merangsang peningkatan persentase sel B yang pada akhirnya merangsang peningkatan respon titer antibodi terhadap ND. Ternyata hasil penelitian menunjukkan bahwa terdapat peningkatan yang nyata pada respon titer antibodi terhadap ND, sebagai akibat peningkatan penambahan minyak ikan lemuru sampai 6% dalam ransum. Dari hasil pengamatan respon titer antibodi terhadap ND sekunder terdapat interkasi antara tingkat penambahan minyak ikan lemuru dan suplementasi vitamin E (P>0,05). Semakin tinggi tingkat penggunaan minyak ikan lemuru dan suplementasi vitamin E memberikan imunomodulator efek yang positif dengan semakin meningkatnya titer antibodi. Respon titer antibodi tertinggi terhadap ND sekunder dicapai pada ayam yang diberi ransum mengandung minyak ikan lemuru 6% dan disuplementasi vitamin E sebesar 200 ppm
dengan nilai rataan titer antibodi 9,08 1,44 pada log 2.
Pengaruh Perlakuan terhadap Diferensiasi Sel Darah Putih

Komponen sel darah putih yang dapat diamati dalah eosinofil, heterofil dan limfosit. Pengaruh pemberian ransum perlakuan terhadap masingmasing komponen sel darah putih menunjukkan tidak adanya interaksi antara tingkat penggunaan minyak ikan lemuru dan suplementasi vitamin E. Suplementasi vitamin E menunjukkan signifikansi yang nyata (P<0,05) menurunkan persentase eosinofil. Persentase heterofil antar perlakuan tidak menununjukkan perbedaan yang nyata (P>0,05). Peningkatkan persentase limfosit nyata (P<0,05) dipengaruhi oleh pemberian minyak ikan lemuru, tetapi tidak dipengaruhi oleh suplementasi vitamin E. Jumlah limfosit pada pemberian ransum yang mengandung minyak ikan lemuru 3% tidak menunjukkan berbeda nyata (P>0,05) dibandinggkan dengan yang diberi ransum yang tidak mengandung minyak ikan lemuru. Peningkatan limfosit terlihat berbeda nyata (P<0,05) pada pemberian ransum yang mengandung 6% minyak ikan lemuru dibandingkan dengan yang diberi ransum yang tidak mengandung minyak ikan lemuru.
Tabel 5. Pengaruh perlakuan terhadap kandungan eosinofil (%) Faktor Minyak Ikan Lemuru (%) 0 3 % 2,88 2,52 2,25 1,39 0,88 1,27 1,13 1,76 0,38 0,70 1,88 1,27 1,38 2,04 1,75 1,59 Rataan 2,04 1,96 A 0,83 1,34 B 1,08 1,32 B
6 1,00 1,00 0,50 0,50 1,00 1,32 0,83 1,05
Vitamin E (ppm)
0 100 200 Rataan
A,B
Superskrip yang berbeda pada kolom yang sama menunjukkan ada perbedaan pada P<0,05
Tabel 6. Pengaruh perlakuan terhadap kandungan heterofil Faktor Minyak ikan lemuru (%) 3 % 23,75 14,19 28,25 19,48 19,38 13,54 25,50 19,90 22,63 8,12 18,75 12,47 21,92 11,86 24,17 17,32 0 Rataan
6 20,75 13,50 14,25 16,17 9,79 5,88 9,07 8,71
Vitamin E (ppm)
0 100 200 Rataan
24,25 14,69 19,46 14,56 18,54 10,23
115
Tabel 7. Pengaruh perlakuan terhadap kandungan limfosit Faktor Minyak ikan lemuru (%) 0 3 % 69,50 20,30 73,38 15,61 73,38 19,12 79,75 13,26 79,38 12,33 77,00 8,03 74,08 17,33a 76,71 12,42ab Rataan
6 78,25 10,47 86,00 5,66 84,75 8,70 83,00 8,84b
Vitamin E (ppm)
0 100 200 Rataan
73,71 15,70 79,71 14,22 80,38 9,99
a,b
Peningkatan limfosit erat kaitannya dengan peranan organ limfoid dalam memproduksi sel limfosit (sel B dan sel T). Sel limfosit B adalah sel yang akan memproduksi antibodi. Efek minyak ikan terhadap persentase sel limfoid dilaporkan oleh Huang et al. (1992), bahwa pemberian ransum yang mengandung asam lemak n-3 yang tinggi dalam ransum (20 g minyak ikan/100 g ransum) dapat meningkatkan populasi sel B pada tikus yang diinfeksi dibandingkan dengan tikus yang diberi ransum yang mengandung minyak biji bunga matahari dan minyak kelapa. Meningkatnya limfosit pada tingkat penggunaan minyak ikan lemuru 6%, hal ini menunjukkan peranan minyak ikan lemuru dalam meningkatkan kepekaan sel B untuk membelah yang pada akhirnya meningkatkan limfosit. Peranan minyak ikan lemuru pada tingkat 6% sebagai imunomodulator selain didukung produksi limfosit, didukung juga oleh meningkatnya titer antibodi pada vaksin ND yang kedua. Pada tingkat penggunaan minyak ikan lemuru 3% belum mampu sebagai imunomodulator, karena pada tingkat penggunan minyak ikan lemuru 3% belum mampu meningkatkan limfosit maupun titer antibodi. Hal ini menunjukkan bahwa pada tingkat minyak ikan lemuru yang rendah belum mampu berfungsi sebagai imunomodulator, sebagaimana halnya yang dilapokan oleh Korver and Klasing (1997), pada tingkat minyak ikan 2% belum mampu meningkatkan titer natibodi terhadap vaksin Infectious Bronchitis (IBV), sedangkan Fristsche et al. (1991), tingkat penggunan minyak ikan 7% ternyata mampu meningkatkan titer antibodi pada ayam yang diberi antigen berupa eritrosit domba.
setelah vaksinasi ND yang kedua dengan nilai rataan titer antibodi 9,08 1,44 pada log 2, tetapi tidak setelah vaksin ND yang pertama. Peningkatan suplementasi 200 ppm vitamin E dalam ransum dapat meningkatkan respon titer antibodi IBD dengan nilai rataan titer antibodi 2,70 0,72, tetapi tidak dipengaruhi oleh peningkatan minyak ikan lemuru dalam ransum. Penggunan minyak ikan lemuru sampai 6% dalam ransum memiliki peranan dalam deferensiasi sel darah putih dengan meningkatnya persentase limfosit. Untuk memperbaiki sistem imunomodulator ayam broiler disarankan penambahan minyak ikan lemuru sebanyak 6% dan suplementasi vitamin E 200 ppm dalam ransum.
Daftar Pustaka
Bandie M.J., 1982. Status perikanan lemuru di Jawa Timur. Prosiding Seminar Perikanan Lemuru. Banyuwangi. 18 21 Januari 1982. Pusat Penelitian dan Pengembangan Perikanan. Badan Penelitian dan Pengembangan Pertanian, Departemen Pertanian. Jakarta. Hlm. 37 45. Fritsche, K.L., N.A.Cassity, and S.C. Huang, 1991. Effect of dietary fat source on antibody production and lymphocyte proliferation in chickens. Poultry Science 70: 611- 617. Hanafiah, T.A.R., dan Murdinah, 1982. Evaluasi Mutu pada Penanganan Ikan di Muncar. Prosiding Seminar Perikanan Lemuru. Pusat Litbang Perikanan Deptan. Jakarta. Hwang , D.H, M. Beaudreau. and P. Chanmugan, 1988. Dietary linolenic acid and longer-chain n-3 fatty acid: comparasion of effect on arachidonic acid metabolism in rats. Journal of Nutrition 118: 427 437. Huang, C.C., M.L. Misfeldt, and K.L. Fritshe, 1992. Dietary fat influences 1a antigen expression and immune cell populations in the murine peritoneum and spleen. Journal of Nutrition 122: 1219 1231.
Kesimpulan
Peningkatan minyak ikan lemuru sampai 6% dengan suplementasi 200 ppm vitamin E dalam ransum dapat meningkatkan respon titer antibodi
116
Husband, A.J., 1995. The immune system and intergrated homeostasis. Immunology and Cell Biology 73: 377 382. Korver, D.R., and K.C. Klasing, 1997. Dietary fish oil alters specific and inflamatory immune response in chicks. Journal of Nutrition 127: 2039 2046. Lowenthal, J.W., T.E. Conaick, P.G. Mc Wateres, and J.J.York, 1994. Development of T cells immune responsivenes in chicken. Immunology and Cell Biology 72: 1294 1300. Meydani, S.N., 1995. Vitamin E enhancement T cellmediated function in healthy elderly: mechanisms of action. Nutrition Review 53: S52 S58. Parakkasi, A., 1988. Ilmu Nutrisi dan Makanan Ternak. Vol IB, Monogastrik. UI Pres, Jakarta. Prescott, S.M., 1984. The effect of eicosapentaenoic acid on leukotriene B production by human neutrophils. Journal of Bio-Chemistry 259: 7615 7621. Piliang, W.G., 2002. Nutrisi Vitamin. Vol. 1. Edisi 5. Pusat Antar Universitas Ilmu Hayati, Institut Pertanian Bogor.
Rusmana, D., W.G. Piliang, dan S. Budijanto, 2000. Pengaruh Suplementasi Minyak Ikan, Minyak Jagung dan ZnCO3 dalam Ransum terhadap Kandungan -3, -6 PUFA dan Kolesterol Telur dan Karkas Ayam Kampung. Bogor: [Tesis] Program Pascasarjana Institut Pertanian Bogor. Sijben, J.W., J.W. Schrama, M.G. Niuewland, and H.K. Parmentier, 2000. Immunomodulatory effects of Indomethacin and Prostaglandin E2 on primary and secondary antibody response in growing layer hens. Poultry Science 79(7): 949-955. Sijben, J.W., M.G. Niuewland, B. Kemp, H.K. Parmentier, and J.W. Schrama, 2001. Interaction and antigen dependence of dietary n-3 and n-6 polyunsaturated fatty acids on antibody responsiveness in growing layer hens. Poultry Science 80 (7): 885-893. Wander,R.C., J.A. Hall, J.L. Gradin, S.H. Du, and D.E. Jewe, 1997. The Ratio of Dietary (n-6) to (n-3) Fatty Acids Influence Immune System Function, Eicosanoid Metabolism, Lipid Peroxidation and Vitamin E Status in Aged Dogs. Journal of Nutrition 127: 1198-1205.
ANIMAL PRODUCTION, Mei 2008, hlm.118-121 ISSN 1411 2027 Terakreditasi No.56/DIKTI/Kep/2005
Vol. 10 No.2
Pengaruh Perbedaan Persentase Pemberian Ransum Antara Siang dan Malam Hari terhadap Performans Broiler Strain Cp 707
(The Effect of Ration that Given Different Percentage Between Day and Night to Broiler Strain CP 707 Performance )
Khaira Nova
Fakultas Pertanian, Universitas Lampung
ABSTRACT: The present experiment was conducted to investigate (1) the effects of different percentage of ration between light and dark day to broiler performance, (2) the best level of percentage of ration that given during the light and dark day. This research was arrange with 5 treatments and 4 replications, each experimental units consist of 5 broilers. The treatmens were R1 (Ration that given 30% during light and 70% dark day); R2 (Ration that given 40% during light and 60% dark day); R3 (Ration that given 50% during light and 50% dark day); R4 (Ration that given 60% during light and 40% dark day); R5 (Ration that given 70% during light and 30% dark day). Ration were given 8x/day. The data were analyze by using Analysis of Variance in 0,05 or 0,01 significant degree. The result of this research showed that the different percentage of ration between light and dark day affected (P< 0,05) body weight gain and feed convertion, but not significant affected feed consumption. These result suggested that the ration which given 30% in light day and 70% in dark day is the best treatment influence body weight gain and feed convertion. Key Words: Broiler, performance, percentage of ration, light
Pendahuluan
Broiler merupakan salah satu jenis ternak yang mempunyai kemampuan tinggi dalam mengonversikan ransum yang dikonsumsinya menjadi daging. Produktivitas broiler dipengaruhi oleh faktor genetik dan lingkungan. Lingkungan memberikan pengaruh terbesar dalam menentukan penampilan ternak yaitu 70%, sedangkan faktor genetik 30%. Indonesia merupakan negara beriklim tropis. Perbedaan suhu antara siang dan malam hari cukup tinggi berkisar antara 3 5C dengan kisaran suhu 26 32C, sedangkan suhu optimal untuk pemeliharaan broiler agar dapat berproduksi dengan baik adalah 21 22C (North dan Bell, 1990). Rao et al. (2002) menyatakan bahwa pemeliharaan unggas di negaranegara tropis, suhu lingkungan merupakan stressor utama dengan kisaran suhu yang luas (5 - 43C) untuk waktu yang lama. Suhu ideal pemeliharaan broiler 10-22C untuk pencapaian berat badan optimum, dan 15-27C untuk efisiensi ransum. Tingginya suhu lingkungan di Indonesia merupakan salah satu masalah dalam pencapaian performans broiler yang optimal karena akan mempengaruhi konsumsi ransum (feed intake). Kualitas pencahayaan merupakan persoalan krusial dalam pengelolaan idustri broiler (Rozenboimi et al.,
118
1999) dan suhu sangat berkaitan dengan konversi pakan (Ingram et al., 2000). Meminimalkan gangguan selama cuaca panas adalah dengan cara mengubah spesifikasi ransum dan praktek pemberian ransum. Unggas banyak dihadapkan pada stres yang berasal dari berbagai sumber antara lain praktek manajemen, nutrisi, dan kondisi lingkungan. Oleh sebab itu, perlu dilakukan manipulasi untuk mengimbangi feed intake yang kurang optimal pada siang hari yang suhunya tinggi dan melakukan pemberian ransum saat suhu lingkungan mulai turun pada malam hari. Suhu merupakan faktor lingkungan yang sangat berpengaruh pada industri broiler (Griffin et al., 2005; Brown et al., 2007). Pada suhu yang tinggi, broiler akan mengalami stres, yang akan menyebabkan penurunan konsumsi ransum sehingga terjadi penurunan berat tubuh. broiler mengalami stres karena panas proses metabolisme setelah mengkonsumsi ransum dan panas tambahan karena suhu lingkungan yang tinggi sehingga broiler akan banyak mengkonsumsi air minum. Formulasi pakan secara keilmuan harus disesuaikan dengan kondisi lingkngan maupun tujuan khusus untuk produksi telur atau broiler (Berry, 2008). Strategi harus diberikan berkaitan dengan perbaikan efisiensi pakan (Rahimi et al., 2005; Olanrewaju et al., 2006). Hasil survey pada peternak di Bandar Lampung, terlihat bahwa rata-rata
Pegaruh Perbedaan Persentase (Nova)
119
persentase pemberian ransum pada siang hari sebesar 64,06% dan malam hari sebesar 39,94%. Hal ini menunjukkan bahwa peternak memberikan ransum lebih banyak pada siang hari dan belum terdapat suatu perbandingan ideal pembagian persentase pemberian ransum antara siang dan malam hari. Pemberian ransum yang lebih banyak pada siang hari ini, merupakan praktek pemberian ransum yang kurang efisien karena unggas akan mengalami stres akibat suhu yang tinggi di siang hari dan stres tambahan karena panas metabolisme didalam tubuhnya setelah mengkonsumsi ransum yang diberikan. Rao et al. (2002) menyatakan bahwa selama cuaca panas, unggas harus dijauhkan dari ransum sementara karena suhu meningkat dan mencapai puncaknya. Pemberian ransum pada jamjam awal dan akhir dari hari terang akan membantu mengurangi kematian pada broiler. Penelitian ini bertujuan untuk mengkaji pengaruh pembagian persentase pemberian ransum pada siang dan malam hari terhadap penampilan broiler, dan mengetahui level pembagian persentase pemberian ransum pada siang dan malam hari yang terbaik terhadap penampilan broiler.
Metode Penelitian
Penelitian ini dilaksanakan di kandang ayam Jurusan Produksi Ternak, Fakultas Pertanian, Universitas Lampung yang dimulai pada bulan Oktober sampai November 2003 dengan menggunakan DOC broiler galur CP 707 unsexed sebanyak 100 ekor dengan bobot awal rata-rata 41,21 2,53 g/ekor. Brolier dipelihara selama 6 minggu. Kandang yang digunakan sebanyak 20 petak. Setiap petak kandang berukuran 60 x 80 x 60cm yang dilengkapi dengan 1 buah tempat ransum, tempat minum, dan lampu pijar 40 watt yang berfungsi sebagai pemanas selama 15 hari dan sebagai penerang di malam hari. Ransum yang digunakan adalah ransum komersil 511 dan 512 produk PT Charoen Pokphand Jaya Farm. Ransum 511 diberikan saat DOC sampai umur 4 minggu dan ransum 512 diberikan pada umur 5 6 minggu. Ransum diberikan dengan frekuensi pemberian 8 kali sehari yaitu siang hari diberikan pada pukul 6.00 WIB, 9.00 WIB, 12.00 WIB, dan pukul 15.00 WIB. Malam hari diberikan pukul 18.00 WIB, 21.00 WIB, 24.00 WIB, dan pukul 3.00 WIB. Persentase ransum diberikan berdasarkan kebutuhan ransum broiler setiap hari sesuai yang direkomendasikan oleh PT Charoen Pokhpand Jaya Farm. Kandungan nutrisi
dari ransum penelitian tertera pada Tabel 1. Digunakan timbangan kapasitas 10 kg, timbangan 600 g, gelas ukur, dan termohigrometer. Penelitian dilakukan secara eksperimental menggunakan rancangan acak lengkap (RAL) terdiri dari 5 perlakuan, yaitu : R1 (pemberian ransum 30% siang dan 70% malam hari),R2 (pemberian ransum 40% siang dan 60% malam hari), R3 (pemberian ransum 50% siang dan 50% malam hari), R4 (pemberian ransum 60% siang dan 40% malam hari), R5 (pemberian ransum 70% siang dan 30% malam hari). Masing-masing perlakuan diulang 4 kali dan setiap ulangan terdiri dari 5 ekor ayam. Peubah yang diukur adalah (1) Konsumsi ransum (g/ekor/minggu) diperoleh dari data pengukuran konsumsi ransum setiap hari selama 7 hari untuk mendapatkan data per minggu. (2) Pertambahan berat tubuh (g/ekor/minggu) dihitung setiap unggas berdasarkan selisih antara berat tubuh akhir minggu (g) dengan berat tubuh awal minggu (g). (3) Konversi ransum dihitung berdasarkan jumlah yang dikonsumsi setiap minggu (g) dibagi dengan pertambahan berat tubuh (g) pada unggas yang sama. Data yang diperoleh dianalisis ragam pada taraf nyata 0,05 dan atau 0,01 dan apabila terdapat perbedaan nyata antar perlakuan dilanjutkan dengan uji Jarak Berganda Duncan (Steel dan Torrie, 1991).
Tabel 1. Kandungan nutrisi ransum broiler 511 dan 512 produksi PT Charoen Popkhand Jaya Farm Zat nutrisi Air (%) Protein (%) Lemak (%) Serat kasar (%) Abu (%) Energi bruto (kkal/kg) Energi metabolis (kkal/kg)* Jenis ransum 511 512 12,60 8,90 19,60 18,20 6,67 10,43 4,00 5,80 7,47 5,10 3.835,86 4.018,02 2.685,10 2.812,61
Hasil analisis di Laboratorium Makanan Ternak, Fakultas Pertanian, Universitas Lampung (2004). Hasil perhitungan 70% dari energi bruto (Schaibel, 1976).

Konsumsi Ransum
Data yang diperoleh selama penelitian terhadap semua peubah yang diukur dapat dilihat pada Tabel 2. Hasil analisis ragam data konsumsi ransum menunjukkan bahwa pembagian persentase pemberian ransum siang dan malam hari berbeda tidak nyata (P>0,05). Jika dilihat dari rata-rata
120
konsumsi ransum pada R1 (658,98 g/ekor/minggu), menunjukkan hasil yang lebih tinggi dibandingkan dengan perlakuan R2 (618,06 g/ekor/minggu), R3 (620,95 g/ekor/ minggu), R4 (618,41 g/ekor/minggu), dan R5 (608,55 g/ekor/minggu). Hal ini disebabkan oleh perlakuan pembagian persentase pemberian ransum yang lebih banyak pada malam hari (70%) pada R1. Rendahnya suhu lingkungan kandang di malam hari (25,4 27,6C), maka ayam akan meningkatkan konsumsi ransumnya, dan sebaliknya persentase pemberian ransum (R5) sebesar 70% dari siang hari menyebabkan konsumsi ransum ayam rendah karena tingginya suhu kandang di siang hari ( 29,9 C). Suhu lingkungan kandang yang lebih tinggi menyebabkan ayam mengurangi konsumsi ransumnya agar produksi panas dalam tubuhnya tidak berlebih dan akan meningkatkan konsumsi air minum sebagai upaya dalam mengurangi tekanan panas. Marjuman (1995) menyatakan bahwa terjadi penurunan konsumsi ransum sebesar 1,7% pada setiap kenaikan suhu sebesar 1C. Fati (1991) mengatakan bahwa bila suhu tinggi, ayam akan mengkonsumsi air lebih banyak, akibatnya nafsu makan menurun. Akan tetapi, hal ini berakibat pada penurunan konsumsi energi. Disamping terjadinya penurunan konsumsi energi sebagai akibat dari penurunan konsumsi ransum, penggunaan energi sudah tidak efisien lagi. Hal ini disebabkan oleh sejumlah energi yang seharusnya digunakan untuk pertumbuhan, terpaksa digunakan untuk aktifitas fisiologis tubuh karena suhu yang tinggi. Sebaliknya pada suhu rendah (sejuk hari) ayam akan makan dengan frekuensi lebih banyak sehingga konversi ransum akan lebih baik (Amrullah, 2003).
tubuh. Hal ini karena konsumsi ransum dengan jumlah sedikit pada siang hari akan menekan panas yang terbuang sia-sia karena proses metabolisme sehingga ayam tidak mengalami tekanan panas yang tinggi. Dengan demikian, pertambahan berat tubuh pada R1 lebih besar daripada R4 dan R5. Selain itu, ransum pada R1 yang lebih banyak dikonsumsi saat malam hari (saat suhu rendah) merupakan waktu yang sangat baik untuk proses pencernaan dan penyerapan zat-zat nutrisi dari ransum yang dikonsumsi. Oleh karena proses pencernaan dan penyerapannya baik, menyebabkan pertambahan berat badannya yang lebih baik. Anggorodi (1994) menyatakan bahwa pertumbuhan dipengaruhi oleh konsumsi ransum serta lingkungan kandang tempat produksi, lingkungan kandang harus memberikan kenyamanan pada ayam. Hal serupa juga dilaporkan oleh (Jin et al., 1998; Jin et al., 2000; Simon et al., 2001). Menurut Rao et al. (2002), suhu tubuh unggas meningkat setelah mengkonsumsi ransum disebabkan oleh proses thermogenik dari pencernaan dan metabolisme. Pada pemberian ransum pagi, pengaruh thermogenik bersamaan dengan peningkatan suhu lingkungan akan memperparah unggas akibat stres panas. Pengaruh thermogenik berakhir setelah 8-10 jam pada suhu 35C, dibandingkan hanya 2 jam pada suhu 20C. Produksi panas metabolik 20-70% lebih rendah pada ayam yang lapar dibandingkan dengan ayam setelah diberi makan.
Konversi Ransum
Rata-rata konversi ransum pada masing-masing perlakuan dapat dilihat pada Tabel 2. Hasil analisis ragam menunjukkan bahwa persentase pemberian ransum siang dan malam hari berpengaruh nyata (P<0,05) terhadap konversi ransum. Hasil uji jarak berganda Duncan menunjukkan bahwa perlakuan R1 berbeda tidak nyata dengan R2 dan R3 (P>0,05) tetapi berbeda nyata dengan R4 dan R5 (P<0,05). Perlakuan R1 (persentase ransum 30% siang dan 70% malam hari) merupakan perlakuan yang memberikan ransum kepada ayam sedikit pada saat suhu panas dan jumlah yang banyak saat sejuk hari. Ketersediaan ransum yang lebih banyak di malam hari dan suhu yang terendah terjadi di malam hari, ayam akan mengkonsumsi ransum lebih banyak dan akan membantu pertumbuhan sehingga ayam dapat mengefisienkan ransum yang diberikan. Hal ini terbukti dengan lebih rendahnya angka konversi
Pertambahan Berat Tubuh

Hasil analisis ragam dari perlakuan berbeda sangat nyata (P<0,01) terhadap pertambahan berat tubuh broiler (Tabel 2). Hasil uji jarak berganda Duncan menunjukkan bahwa perlakuan R1 berbeda sangat nyata dengan R4 dan R5 (P<0,01) dan berbeda tidak nyata (P>0,05) dengan perlakuan R2 dan R3. Perlakuan R1 yakni (30% siang dan 70% malam) menunjukkan hasil yang jauh lebih bagus terhadap pertambahan berat tubuh. Pemberian ransum yang lebih banyak di malam hari yakni pada saat suhu yang rendah menyebabkan ayam mengkonsumsi ransum lebih banyak dari pada R4 dan R5. Ransum yang dikonsumsi banyak pada malam hari sangat efisien dan dialokasikan untuk pembentukan jaringan
119
Tabel 2 : Rata-rata konsumsi ransum, pertambahan berat tubuh, dan konversi ransum broiler selama penelitian Perubah Konsumsi ransum (g/ekor/minggu) Pertambahan berat tubuh (g/ekor/minggu) Konversi ransum R1 658,98a 376,99a 1,75a R2 618,06a 338,56a 1,83a Perlakuan R3 620,95a 350,33a 1,78a R4 618,41a 310,54b 1,96b R5 608,55a 317,37b 1,93b
Huruf yang sama pada baris yang sama menunjukkan berbeda tidak nyata (P> 0,05) R1 : Persentase pemberian ransum 30% siang : 70% malam R2 : Persentase pemberian ransum 40% siang : 60% malam R3: Persentase pemberian ransum 50% siang : 50% malam R4: Persentase pemberian ransum 60% siang : 40% malam R5: Persentase pemberian ransum 70% siang : 30% malam
ransum pada perlakuan R1 dibandingkan dengan R4 dan R5. Hal ini sesuai dengan pendapat Amrullah (2003) yang menyatakan bahwa pemberian ransum pada jam-jam sejuk akan membantu mengefisienkan ransum sehingga konversi ransum akan lebih baik. Menurut Rao et al. (2002), konsumsi ransum yang rendah merupakan penyebab utama dari rendahnya penampilan broiler selama suhu tinggi.
Ingram, D.R., L.F. Hatten, and B.N. Mc.Pherson, 2000. Effects of light restriction on Broiler performance and specific body structure measurements. Journal of Applied Poultry Research 9: 501504. Jun, L.Z., Y.W. Ho, N. Abdullah, and S. Jalaludin, 1998. Effects of adherent Lactobacillus cultures on growth, weight of organs and intestinal microflora and volatile fatty acids in broilers. Animal Feed science and Technology 70: 197-209. Jun, L.Z., Y.W. Ho, N. Abdullah, and S. Jalaludin, 2000. Digestive and bacterial enzymes activities in broilers fed diets supplemented with Lactobacillus cultures; Poultry science 78: 886-891. Olanrewaju, H.A., J.P. Thaxton , W.A. Dozier III , J. Purswell , W.B. Roush and S.L. Branton. 2006. A Review of Lighting Programs for Broiler Production. International Journal of Poultry Science 5(4): 301-308 Marjuman, E., 1995. Pengaruh Suhu Kandang dan Imbangan Kalori-Protein Ransum terhadap Laju Metabolisme Basal, Pertumbuhan, Efisiensi Penggunaan Ransum, dan Deposisi Lemak pada Ayam Broiler. [Disertasi] Fakultas Peternakan. Universitas Padjadjaran. Bandung. North, M.O and D.D. Bell., 1990. Commercial Chicken Production Manual. 4 th Ed. Avi Publishing Company Inc. Van Norstrand Reinhold. New York. Pasha, T.N. A. Mahmood, F.M. Khattak, M.A. Jabbar, and A.d. Khan, 2008. The Effect of Feed Supplemented with Different Sodium Bentonite Treatments on Broiler Performance. Turkey Journal of Veterinary Animal Science 32(4): 245-248 Rahimi, G., M. Rezaei, H. Hafezian and H. Saiyahzadeh, 2005. The Effect of Intermittent Lighting Schedule on Broiler Performance. International Journal of Poultry Science 4 (6): 396-398. Rao, R,S.V., D. Nagalashmi, and V.R. Redy, 2002. Feeding to Minimize Heat Stress. Poultry International 41: 7. June 2002.
Kesimpulan
Pembagian persentase pemberian ransum siang dan malam hari secara nyata dapat memperbaiki pertambahan berat tubuh dan konversi ransum broiler serta belum mampu memperbaiki konsumsi ransum . Pembagian persentase pemberian ransum siang dan malam hari yang terbaik adalah pemberian siang hari 30% dan malam hari 70%.
Daftar Pustaka
Amrullah, I.K., 2003. Nutrisi Ayam Broiler. Cetakan ke1. Lembaga Satu Gunung Budi. Bogor. Anggorodi, R., 1985. Kemajuan Mutakhir Ilmu Makanan Ternak Unggas. Cetakan ke-1. Universitas Indonesia Press. Jakarta. Berry, J., 2008. Poultry for the Small Producer. Oklahoma Cooperative Extension Fact Sheets. http://www.osuextra.com [20 Pebruari 2008]. Fati, N., 1991. Pengaruh beda Ketinggian Tenpat dan Luas Kandang terhadap Laju Pertumbuhan Ayam Broiler. [Skripsi]. Fakultas Peternakan. Universitas Andalas. Padang. Griffin, A.M., R.A. Renemar, F.E. Robinson, M.J. Zuidhof, 2005. The influence of rearing light period and the use of broiler or broiler breeder diets on forty-two-day body weight, fleshing, and flock uniformity inbroiler stocks. Journal of Applied Poultry Research. 14(2): 204-216.
119
Rozenboim, I., I. Biran, Z. Uni, B. Robinzon, and O. Halevy, 1999. The Effect of Monochromatic Light on Broiler Growth and Development. Poultry Science 78: 135138. Schaibel. P.J., 1976. Poultry Feed and Nutrition. 1 st Ed. Department Lansing. Michigan.
Simon, O., A. Jadamus and W. Vahjen, 2001. Probiotic feed additiveseffectiveness and expected modes of action; Journal of Animal and Feed Sciences 10: 5167. Steel, R.G.D and J.H.Torrie, 1991. Prinsip dan Prosedur Statistika. Edisi ke-2. Alihbahasa oleh B. Sumantri. Gramedia Pustaka Utama. Jakarta.
Vol.10 No.2
Kajian Deteksi Produksi Telur Itik Tegal Melalui Polimorfisme Protein Darah
(Detection of Egg Production of Tegal Duck by Blood Protein Polymorphism)
Ismoyowati
ABSTRACT: The aim of this research was to study the effect of transfferine, albumine, and haemoglobine loci to egg production characteristic of Tegal duck. 100 lying of Tegal ducks keeping by batteray-pen were used in this study. Individual egg production was recorded until period of 120 days. Blood protein polymorphism analysed by electrophoresis method, and blood sample taken from each ducks.. Egg production and transfferine albumine, and haemoglobine phenotipe on electrophoresis gel were observed in this study. Genotipe and gene frequencies and genetic variant were applied in data analysis. The result showed that (1) in the transferine locus were identified 3 aleles forming 4 genotipes (TfAA,TfAB, TfBB, and TfBC), (2) in albumine were identified 3 aleles forming 5 genotipes (AlbAA, AlbAB, AlbAC, AlbBB and AlbBC) and (3) haemoglobine locus were identified 6 aleles forming 4 genotipes ((HbAA, HbAB, HbAC, HbBB, HbBC dan HbCC). This study demostrated that B gene frequenci in transfferine, albumine and haemoglonine loci was highest than A and C gene frequency. Tegal Duck with AA genotipe on all loci had higher egg production than BB and CC homozigote. This research revealed that the most efective of selection method by haemoglobine protein polymorphism. Key Words: Tegal duck, egg production, selection, blood protein polymorphism
Pendahuluan
Itik lokal merupakan salahsatu plasma nutfah ternak Indonesia. Upaya pelestarian dan pengembangan itik lokal harus diupayakan guna mempertahankan keberadaan plasma nutfah ternak Indonesia yang telah beradaptasi dengan lingkungan setempat. Itik merupakan penghasil daging, telur dan juga bulu, itik dapat hidup dan berkembang biak dengan pakan yang sederhana sesuai dengan potensi wilayah. Li et al. (2006). Perkembangbiakan itik tergantung pada kemampuan reproduksinya. Upaya untuk meningkatkan produksi telur, mutu bibit merupakan salah satu komponen yang sangat menentukan bagi keberhasilan usaha peternakan itik. Ketersediaan bibit itik berkualitas sampai saat ini masih merupakan kendala utama dalam pengembangan itik petelur di Indonesia. Pendekatan genetis merupakan salah satu alternatif yang dapat dilakukan dalam memperbaiki mutu bibit itik petelur yang ada di lapangan, karena perbaikan secara genetis cenderung memberikan dampak yang lebih permanen. Sistem pembibitan, terutama di daerahdaerah sentra produksi perlu dikembangkan untuk pengadaan bibit yang berkualitas. Berbagai pengamatan menunjukkan bahwa pembibitan yang
122
ada saat ini masih sangat tradisional dan tanpa kontrol terhadap kualitas bibit yang dihasilkan. Salah satu pendekatan genetis untuk peningkatan mutu genetik itik yaitu melalui seleksi dan sistem perkawinan. Seleksi bibit yang berkualitas dan sistem perkawinan yang tepat akan menghasilkan keturunan yang dapat ditingkatkan produktivitasnya. Program seleksi berdasarkan genetik kuantitatif telah banyak dilakukan, namun masalah yang belum terpecahkan adalah memperpendek waktu yang relatif lama mengingat untuk memperoleh tetua yang berproduksi tinggi dibutuhkan generasi keturunan. Untuk itu, diperlukan metode seleksi dengan pendekatan biomolekuler yaitu melalui deteksi berdasarkan pola protein darah yang polimorfik dan fisiologi yaitu melalui hematologis darah. Hal ini dapat dilakukan karena protein yang terdapat dalam darah merupakan protein fungsional produk ekspresi gen-gen yang tersusun dari DNA (Kimbal, 1994). Suyadi et al. (2006) menyatakan bahwa untuk peningkatan beberapa sifat dapat dilakukan berdasarkan genetik kuantitatif atau molekuler. Seleksi secara konvensional berdasarkan data fenotipik kuantitatif membutuhkan catatan individu dalam jumlah yang besar dari generasi ke generasi. Disamping itu, program ini sering tidak menghitung keragaman genetik dalam populasi. Teknologi
Kajian Deteksi Produksi (Ismoyowati)
127
marker genetik, seperti marker-assisted selection (MAS), identifikasi asal-usul, dan pemasukan gen dapat diaplikasikan pada program seleksi ternak. Protein darah dihasilkan melalui proses transkripsi DNA (asam dioksiribonukleat) dan translasi RNA (asam ribonukleat). Susunan asam amino dan jumlah protein dalam darah sangat ditentukan oleh gen-gen yang mengkodenya (Frandson, 1993). Secara umum diantara jenis protein darah yang sudah diketahui bersifat polimorfisme adalah hemoglobin, albumin dan transferin. Identifikasi protein tersebut dapat digunakan untuk mempelajari susunan gen yang berkaitan erat dengan karakteristik produksi itik lokal. Protein telur terdapat dalam kuning telur (yolk) maupun dalam putih telur (albumen). Protein kuning telur antara lain terdiri dari albumin, transferin dan imunoglobulin yang disintesa dihati kemudian melalui plasma darah dideposisikan ke folikel yang berkembang. Protein putih telur terdiri dari ovalbumin, ovotransferin dan ovoglobulin yang dihasilkan dalam sel-sel sekretorik magnum oleh retikulum endoplasma. Sintesa protein untuk pembentukan telur ini dikode oleh gen. Pada itik Kamang di Sumatera Barat ditemukan lima lokus protein bersifat polimorfik yaitu albumin, post albumin, post transferin1, post transferin-2, dan hemoglobin, sedangkan untuk lokus transferin adalah monomorphik (Yellita, 2000). Pada ayam kampung ditemukan empat macam lokus protein yang polimorfik yaitu hemoglobin, albumin, postalbumin,dan transferin (Senojohari et al., 1999). Pemunculan ekspresi gen melalui polimorfisme protein tergantung pada genotipe dari protein. Ekspresi gen dapat dipelajari pada tingkat mRNA, yang merupakan produk dari transkripsi gen atau pada tingkat protein yang merupakan produk akhir dari ekpresi (Brodacki and Wojcik, 2001). Kajian penelitian ini ditujukan kepada deteksi produksi telur itik Tegal berdasarkan polimorfisme protein darah.
Metode Penelitian
Materi penelitian yang digunakan adalah itik Tegal betina periode produksi sebanyak 100 ekor. Ransum itik petelur terdiri dari campuran jagung kuning giling 35%, dedak padi 40%, dan konsentrat itik 25% dengan kandungan nutrien pakan: PK 17,40%, ME 2.800 kcal/kg, Ca=3,035% dan P 1,604%. Kandungan nutrien ini sesuai dengan saran Scott dan Dean (1992). Bahan kimia yang digunakan
untuk analisis elektroforesis protein darah terdiri dari protein standar, akrilamid, bisakrilamid, TEMED, ammonium persulfat, gliserin, HCL, bromophenol blue, metanol, asam asetik glasial, Coomasie briliant blue R-250, tris, dan glisin. Peralatan yang digunakan terdiri dari: Kandang batere sebanyak 100 petak dengan ukuran 50 cm x 50 cm x 50 cm, perlengkapan kandang, meliputi: tempat pakan, tempat minum, penampung air dan alat kebersihan. Seperangkat alat elektroforesis dan sentrifus digunakan untuk analisis pola protein darah. Penelitian menggunakan metode eksperimental yang dilakukan di Experimental Farm Fakultas peternakan Unsoed Purwokerto untuk pemeliharaan itik dan rekording produksi telur. Itik dipelihara pada kandang batere secara individual untuk memudahkan pencatatan produksi telur secara individu yang dilakukan selama 120 hari. Pakan diberikan sebanyak 160 gram per ekor per hari dan air minum diberikan secara adlibitum. Analisis protein darah dengan teknik elektroforesis menggunakan SDS (Sodium Dedocyl Sulfate) Polikrilamid Gel Elektroforesis menurut metode Deutcher (1990) dilakukan di laboratorium penelitian dan pengujian terpadu (LPPT) UGM Yogyakarta. Penentuan lokus protein didasarkan pada kecepatan mobilitas relatif terhadap sampel yang dipakai sebagai standar. Lokus protein transferin terletak sedikit dibawah protein standar dengan berat molekul (BM) 84.000 Da, protein albumin sejajar dengan protein standar dengan BM 52.000 Da dan protein hemoglobin terletak sejajar antara protein standar dengan BM 84.000 Da dan 52.000 Da . Macam genotipe dan gen berdasarkan lokus protein yang diamati digunakan untuk menghitung frekuensi genotipe dan frekuensi gennya. Peubah yang diamati adalah produksi telur dan fenotipe protein transferin, albumin dan hemoglobin. Data dianalisis dengan frekuensi gen atau alel dan frekuensi genotipe menurut Warwick et al. (1995), dengan rumus: lokus An FAn = lokus A1 + lokus A2 + lokus An FAn = Frekuensi gen A pada lokus ke-n. Pengaruh masing-masing gen terhadap sifat produksi telur dihitung menurut petunujuk Pirchner (1981) dan Christensen (2002) dengan persamaan: (p + q + r)2= 1, p = frekuensi gen A1, q = frekuensi gen A2 dan r = frekuensi gen A3.
128

Hasil analisa plasma darah secara elektroforesis dalam medium gel poliakrilamid menghasilkan pola pita yang spesifik untuk lokus protein transferin dan albumin, sedangkananalisa terhadap hemolisat menghasilkan pola pita hemoglobin. Protein transferin, albumin maupun hemoglobin ditentukan berdasarkan protein standard dari Biorad yaitu Prestained SDS-PAGE standard. Lokus transferin terletak sedikit di bawah protein standar dengan berat molekul (BM) 84.000 Da, protein albumin sejajar dengan protein standard dengan BM 52.000 Da dan protein hemoglobin terletak sejajar antara protein standard dengan BM 84.000 Da dan 52.000 Da. Hasil identifikasi fenotip atau genotip lokus transferin diperoleh tiga alel atau gen yang kombinasinya membentuk empat macam genotip, yaitu TfAA, TfAB, TfBB , dan TfBC, frekuensi masingmasing alel terdapat pada Tabel 1. Genotip homosigot TfAA memiliki potensi produksi telur paling tinggi dibanding genotip lainnya. Genotip heterosigot TfAB, dengan alel atau gen TfB dominan terhadap alel TfA, sehingga kombinasi antara keduanya menyebabkan menurunnya potensi produksi telur. Genotip homosigot TfBB memiliki potensi produksi telur paling rendah. Genotip heterosigot TfBC, dengan alel atau gen TfC dominan terhadap alel TfB, sehingga kombinasi antara keduanya menyebabkan potensi produksi telur yang lebih tinggi dibanding genotip TfBB.
Identifikasi lokus albumin diperoleh tiga alel atau gen yang kombinasinya membentuk lima macam genotip, yaitu AlbAA, AlbAB, AlbAC, AlbBB dan AlbBC. Genotip homosigot AlbAA memiliki potensi telur tinggi (97 butir). Genotip heterosigot AlbAB, dengan alel atau gen AlbB dominan terhadap alel AlbA, sehingga kombinasi antara keduanya menyebabkan menurunnya potensi produksi telur. Genotipe heterosigot AlbAC, dimana alel atau gen AlbC dominan terhadap alel AlbA, sehingga kombinasi antara keduanya menyebabkan potensi produksi telur yang lebih rendah dibanding genotipe AlbAA. Genotip homosigot AlbBB memiliki potensi produksi telur paling rendah. Genotip heterosigot AlbBC, dengan alel atau gen AlbC dominan terhadap alel AlbB, sehingga kombinasi antara keduanya menyebabkan potensi produksi telur yang lebih tinggi dibanding genotip AlbBB. Identifikasi lokus protein hemoglobin diperoleh tiga alel atau gen yang kombinasinya membentuk enam macam genotip, yaitu HbAA, HbAB, HbAC, HbBB, HbBC dan HbCC. Genotipe homosigot HbAA memiliki potensi telur paling tinggi dibanding genotip lainnya. Genotipe heterosigot HbAB, dengan alel atau gen HbB dominan terhadap alel HbA, sehingga kombinasi antara keduanya menyebabkan menurunnya potensi produksi telur. Genotip heterosigot HbAC, dengan alel atau gen HbC dominan terhadap HbA, sehingga kombinasi antara keduanya menyebabkan potensi produksi telur yang lebih rendah dibanding genotip HbAA, sedangkan homosigot HbBB memiliki potensi
Tf Alb
84.000 Da 52.000 Da
Tf Alb Individu
AA AB AB AB BB BB BB BC M AB AB AC AC AB AB AB AB 1 2 3 4 5 6 7 8
Gambar 1. Ragam genotipe lokus transferin dan albumin hasil elektroforesis protein darah itik Tegal
127
84.000 Da Hb 52.000 Da
Hb CC AC BC CC AC Individu 1 2 3 4 5
BB 6
CC M 7
Gambar 2. Ragam genotipe lokus hemoglobin hasil elektroforesis protein darah itik Tegal
produksi telur paling rendah. Genotip heterosigot HbBC, dengan alel atau gen HbC dominan terhadap alel HbB, sehingga kombinasi antara keduanya menyebabkan potensi produksi telur yang lebih tinggi dibanding genotip HbBB, sedangkan homosigot HbCC yang memiliki potensi produksi telur diantara homosigot HbAA dan HbBB. Genotip heterosigot AlbBC memiliki produksi telur paling tinggi dibandingkan dengan genotip lainnya, padahal genotipe homosigot AlbAA paling tinggi dan AlbBB paling rendah, keadaan ini dapat dijelaskan karena efek gen C (3) lebih tinggi dibanding dengan efek gen A (1) sehingga memunculkan sifat produksi telur yang lebih tinggi. Satu sifat yang dipengaruhi oleh lebih dari satu gen dapat menyebabkan terjadinya epistasis (Smalec and Brodacki, 1995). Pirchner (1981) menyatakan sifat kuantitatif dipengaruhi oleh banyak gen (poligenik), interaksi gen satu dengan yang lainnya ada yang bersifat over dominan sehingga pemunculannya menekan pengaruh gen yang lain. Hasil penelitian diperoleh empat macam genotip berdasarkan lokus protein transferin, lima macam genotip berdasarkan lokus albumin dan enam macam genotip berdasarkan lokus hemoglobin. Tabel 1 menunjukkan bahwa itik dengan genotip homosigot AA pada lokus protein transferin, albumin dan hemoglobin mempunyai produksi telur yang lebih tinggi dibanding itik dengan genotip homosigot BB dan CC. Ketiga lokus protein yang diamati
menunjukkan bahwa frekuensi gen C paling rendah dibanding gen A dan gen B. Brodacki dan Woljcik (2001) melaporkan bahwa polimorfisme protein preaktin pada otot paha burung puyuh berhubungan dengan konsentrasi protein preaktin, genotipe homosigot BB memiliki konsentrasi preaktin yang lebih tinggi dibanding homosigot AA dan level preaktin tertinggi terdapat pada genotipe heterosigot dibandingkan homosigot. Hasil penghitungan efek atau pengaruh rata-rata gen diperoleh gen A (1) dan gen C (3) yang berpengaruh secara genetik meningkatkan produksi telur, sedangkan gen B (2) berpengaruh terhadap penurunan produksi telur, apabila dalam populasi terjadi peningkatan atau bertambahnya gen A dan gen C maka nilai tengah genotip populasi akan berubah sebesar 1 dan 3, sedangkan bila terjadi penambahan gen B maka nilai tengah genotip populasi akan berubah sebesar 2. Pichner (1981) dan Christensen (2002), menyatakan bahwa fenotip dapat dilihat atau diukur akan tetapi genotipe tidak dapat diukur. Pada sifat kuantitatif secara normal dipengaruhi oleh beberapa pasangan gen dan juga faktor lingkungan, dan mempunyai distribusi normal pada populasi. Nilai fenotip (P) dapat diukur dan dievaluasi sebagai deviasi dari nilai tengah populasi. Nilai genotip (G) adalah sama dengan nilai tengah fenotip dari individu dengan genotip yang sama.
128
Tabel 1. Produksi telur berdasarkan genotip lokus transferin, albumin dan hemoglobin serta efek gen terhadap produksi telur Lokus protein Produksi telur (butir) AA AB AC BB BC CC Point of origint (O) Nilai tengah genotip (m) Nilai tengah nyata (M) Frekuensi alel atau gen A B C Efek gen 1 (A) 2 (B) 3 (C) Transferin 104 87 84 94 94 -5,81081 88,18919 0,25676 0,64865 0,09459 3,8378 -2,4730 5,8108 Albumin 97 85,50 88 80,50 96 88,75 3,35248 92,10248 0,20186 0,47205 0,32609 3,4658 -5,5388 0,0815 Hemoglobin 103,50 86,50 100 80 81,50 89,50 91 -2,86885 88,13115 0,40164 0,45082 0,14754 7,1885 -5,2992 1,9795
Tabel 2. Nilai pemuliaan dan pengaruh ragam genetik aditif serta dominan berdasarkan lokus transferin, albumin dan hemoglobin terhadap produksi telur itik Tegal Lokus protein Nilai pemuliaan AA AB AC BB BC CC Total ragam aditif Total ragam dominan Total ragam genetik transferin 7,67569 1,36486 -4,94595 3,33784 14,64254 7,58007 22,22261 albumin 6,88095 0,14286 10,60714 -6,59524 3,86905 48,00866 60,03629 108,04495 hemoglobin 18,18182 3,48485 12,42424 -11,21212 -2,27273 6,66667 45,46419 9,56010 55,02429
Nilai pemuliaan adalah nilai yang berhubungan dengan gen-gen yang dibawa oleh individu dan diturunkan pada keturunannya. Pengaruh gen tidak dapat diukur secara sendiri-sendiri, sehingga nilai pemuliaan selalu dinyatakan sebagai jumlah pengaruh rata-rata semua gen yang dimiliki, yang mempengaruhi sifat yang diamati. Variasi nilai pemuliaan dianggap akibat pengaruh aditif dari gen. Konsep dari gen aditif adalah gen-gen pada lokus yang berbeda menghasilkan pengaruh bersama pada suatu sifat. Kombinasi gen yang berpengaruh pada sifat kuantitatif bersifat penambahan (aditif) (Pirchner, 1981). Nilai pemuliaan pada masing-masing genotipe lokus protein transferin, albumin dan hemoglobin tersaji pada Tabel 2. Nilai pemuliaan merupakan nilai yang berhubungan dengan gen-gen yang dibawa oleh individu dan diturunkan kepada keturunannya. Nilai
pemuliaan individu dapat diukur dan sama dengan dua kali rata-rata deviasi keturunan terhadap rata-rata populasi. Hasil penghitungan nilai pemuliaan diperoleh bahwa itik dengan genotip homosigot AA pada lokus protein hemoglobin memiliki nilai pemuliaan yang lebih tinggi dibanding genotip lain dan lokus yang lain. Nilai pemuliaan yang diperoleh menunjukkan bahwa genotip homosigot AA pada lokus hemoglobin memiliki potensi genetik yang lebih tinggi untuk diwariskan kepada keturunannya. Ragam genetik terdiri dari ragam aditif dan ragam dominan (Var G = Var A + Var D). Hasil penghitungan ragam genetik diperoleh ragam genetik berdasarkan lokus protein hemoglobin paling tinggi dibanding lokus protein transferin dan albumin. Nilai ragam genetik yang diperoleh mengindikasikan bahwa pada sifat produksi telur 55,024 % dipengaruhi oleh faktor genetik. Ragam
127
genetik aditif menunjukkan potensi pewarisan gen yang relative lebih tinggi pada gen yang berasal dari lokus protein hemoglobin dibanding lokus protein transferin dan albumin. Alel atau gen pada lokus hemoglobin, transferin dan albumin berpengaruh terhadap sifat produksi telur. Gen tersebut berkaitan erat dengan proses fisiologi pembentukan telur pada unggas. Protein telur yang terdapat di dalam yolk (kuning telur) maupun di albumen (putih telur) antara lain terdiri dari albumin dan transferin yang pembentukannya dikode oleh gen. Protein transferin dan albumin yang dideposisikan dalam yolk disintesa oleh hati, kemudian oleh plasma darah dideposisikan pada folikel yang sedang berkembang. Protein transferin dan albumin yang ada di dalam albumen disintesa dalam sel-sel sekretorik magnum oleh retikulum endoplasma (Etches, 1996; Panheleux, 2000). Menurut Kimura et al. (1978) yang disitasi oleh Miwa et al. (2005) polimorfisme protein albumin dan transferin pada telur dan serum darah burung puyuh dikontrol oleh gen pada lokus yang sama. Polimorfisme protein hemoglobin berkaitan dengan perbedaan asam amino yang menyusun protein globin, yang terletak pada jumlah asam amino residu (Stevens, 1991). Mekanisme sintesa protein hemoglobin diturunkan dari tetua kepada keturunannya yang diatur secara genetis dan berhubungan dengan penggolongan jenis hemoglobin seperti halnya pada manusia (Harper, 1984). Hemoglobin berhubungan dengan golongan darah karena penggolongan darah dilakukan berdasarkan pada perbedaan antigen pada sel darah merah atau eritrosit dan eritrosit berhubungan dengan hemoglobin (Stevens, 1991). Pirchner (1981) menyatakan bahwa gen-gen yang mengontrol golongan darah pada ternak unggas berpengaruh terhadap performans sifat tertentu. Gilmour dan Allen (1962) yang disitasi oleh Pirchner (1981) melaporkan bahwa perkawinan antara pejantan homosigot dengan alel B21 denngan betina dengan alel B13 dan B14 menghasilkan keturunan dengan genotipe B21 B13 dan B21 B14, dimana genotipe B21 B14 memiliki performans yang paling baik.
aditif. Polimorfisme protein hemoglobin dapat digunakan untuk pendekatan seleksi secara biomolekuler dalam pemilihan itik yang berproduksi tinggi karena pengaruhnya yang tinggi terhadap sifat produksi telur yaitu sebesar 55,024%.
Ucapan Terimakasih
Ucapan terimakasih disampaikan kepada Proyek Peningkatan Penelitian Pendidikan Tinggi, Direktorat Jenderal Pendidikan Tinggi, Departemen Pendidikan Nasional sesuai dengan surat perjanjian pelaksanaan Penelitian Hibah Bersaing XIII Nomor: 033/SP2H/DP2M/III/2007 atas dana yang diberikan untuk penelitian ini.
Daftar Pustaka
Brodacki, A. and A., Wojcik, 2001. Polymorphism VS. Expression of Protein Coding Genes in Japanese Quail. Electronik Journal of Polish Agriculture Universities. Animal Husbandry 4 (2). Christensen, K., 2002. Population Genetics. kursus.kvl.dk/shares/vetgen/_Popgen/genetics/geneti c.htm. Deutcher, M.P., 1994. Guide to Protein Purification. Methode in Enzymology. Academic Press INC. San Diego, New York. Etches, R.J., 1996. Reproduction in Poultry. Cab International. University Press. Cambridge. Frandson. R.D., 1993. Anatomi dan Fisiologi Ternak. Edisi keempat. Gadjah Mada University Press. Yogyakarta. Harper, H.A., V.W. Rodwell and P.A. Mays, 1984. Biochemistry. Large Medical Publication Drawer L, Los Altas, California. Kimbal, J.W., 1994. Biology. Third Edition. Wesly. Publishing Company, INC. New York. USA. Li, H., N. Yang, K. Chen, G.Chen, Q. Tang, Y. Yu, Y. Tu and Y. Ma, 2006. Study on Moleculer Genetic Diversityof Native Duck Breeds in China. Poultry Science 62: 603-611. Miwa, M., M.. Inoue-Murayama, B.B. Kayang, A. Vignal, F. Minvielle, J.L. Monvoisin, H. Takahashi and S. Ito, 2005. Mapping of Plumage Colour and blood Protein Loci on the microsatellite Lingkage map pf the Japanese Quail. Animal Genetics 36: 396-400.
Kesimpulan
Polimorfisme protein darah transferin, albumin dan hemoglobin berhubungan erat dengan produksi telur pada itik Tegal. Alel atau gen pada lokus protein transferin, albumin dan hemoglobin bersifat
128
Panheleux, M., Y. Nys, J. Williams, J. Gautron, T. Boldicte and M.T. Hincket, 2000. Extraction and quantification by ELISA of Egg Shell Organic Matrix proteins (Ovocleidin-17, Ovalbumin, Ovotransferin) in Shell from Young and Old Hens. Poultry Science 79: 580-588. Pirchner, F., 1981. Population Genetics in Animal Breeding. W.H. Freeman and Co. San Fransisco. Scott, M.L. and W.F. Dean, 1992. Nutrition and Management of Ducks. M.L. Scott of Ithaca, Ithaca, New York. Smalec. E, and A. Brodacki, 1995. The Goose Meat Traits affected by Single Loci. Proceedings 10th Europens Symposium on Waterfowl. March. 26-31, 1995. Halle (Saale). Germany. pp: 452-454. Senojohari, I.Sumeidiana dan P. Utomo, 1999. Studi Polimorphisme Protein Darah Ayam Kampung di Jawa Tengah. Pengembangan Peternakan Tropis P: 1828.
Suyadi, N. Isnaini dan S. Rahayu, 2006. Characterization of Genetic Marker for Candidate Gene of Growth Hormone in madura Cattle. Proceeding of The 4th ISTAP Animal Production and Sustainable Agriculture in the Tropic. Faculty of Animal Science, Gadjah Mada University, pp: 7-13. Stevens, L., 1991. Genetics and Evolution of the Domestic Fowl. Cambridge University Press. Cambridge. Warwick, E.J., J.M. Astuti dan W. Hardjosubroto, 1995. Pemuliaan Ternak. Cetakan 5. Gadjah Mada University Press. Yogyakarta. Yellita, Y., 2000. Pola Polimorfisme Protein Darah Itik Kamang di Sumatera Barat. Peternakan dan Lingkungan 6 (01): 15.
Vol.10 No.2
Effects of Decontamination Using Organic Acids on Total Microbial Number and Qualities of Poultry Carcasses
(Pengaruh Dekontaminasi menggunakan Asam Organik terhadap Jumlah Mikroba dan Kualitas Karkas Ayam)
Juni Sumarmono* dan Agustinus Hantoro Djoko Rahardjo
Fakultas Peternakan Universitas Jenderal Soedrman, Purwokerto
RINGKASAN: Tujuan Penelitian adalah mempelajari pengaruh dekontaminasi menggunakan asam terhadap jumlah mikroorganisme dan kualitas pada karkas ayam selama penyimpanan sehingga dapat digunakan untuk menentukan metode dekontaminasi karkas yang dapat diterapkan pada rumah potong ayam skala kecil atau rumah tangga. Penelitian dilaksanakan dengan Rancangan Acak Lengkap dengan 5 perlakuan dekontaminasi yang terdiri atas perendaman karkas selama 5 menit dalam air dingin (A), asam laktat (B), asam sitrat (C), dan asam asetat (D), masing masing dengan konsentrasi 2%. Karkas kemudian disimpan pada kondisi kamar dengan cara digantung. Masing masing perlakuan diulang 4 kali. Peubah yang diamati terdiri atas (1) peubah kualitas mikrobiologis karkas, yaitu jumlah total bakteri, (2) peubah kualitas fisik daging (pH dan WHC), dan (3) peubah kualits organoleptis (warna, bau dan lendir). Peubah diukur sebelum perlakuan, pada 0 jam setelah perlakuan, kemudian setelah 2,4,6 dan 8 jam setelah perlakuan. Hasil menunjukkan dekontaminasi menyebabkan penurunan jumlah mikroba secara drastis dari 104 menjadi 101 cfu/g. Namun demikian, tidak terdapat perbedaan pengaruh yang signifikan antar masing masing metode terhadap penurunan jumlah mikroba. Jumlah mikroba kembali meningkat seiring dengan lamanya masa simpan. Penggunaan asam organik meyebabkan penurunan jumlah mikroba. Jumlah mikroba kembali meningkat seiring dengan lamanya masa simpan. Penggunaan asam organik menyebabkan penurunan pH karkas. Sampai penyimpanan 8 jam pada kondisi ruang, kualitas fisik karkas (pH dan WHC) tidak ada perubahan yang berarti dan munculnya lendir pada permukaan karkas belum terdeteksi oleh panelis. Dapat disimpulkan bahwa untukmemperpanjang masa simpan dan meningkatkan kemanan, maka perlu dilakukan dekontaminasi pada karkas ayam, yaitu dengan perendaman pada larutan asam (laktat, sitrat atau asetat) 2% selama 5 menit. Karkas yang telah didekontaminasi dapat disimpan sampai dengan 8 jam pada kondisi ruang. Kata Kunci: Karkas ayam, dekontaminasi, kualitas, asam organik, masa simpan
Introduction
Poultry carcasses can be a reservoir for pathogenic bacteria, such as Salmonella spp., Campylobacter spp., Eschericha coli 0157: H7, Listeria monocytogenes, and spoilage microorganisms (Borch and Arinder, 2002; Deumier, 2006). Thus, microorganisms in poultry carcasses cause not only quality deterioration during storage, but also present dangerous threats to hhuman health. Contamination occurs at every step of slaughtering, transporation and storagr. Satin (2002) reviewed the source of contamination, including feather, feces, dirt, slaughter tools, and cross contamination during carcass fabrication, transports and displays. The degree of contamination is positively correlated with
Contact Person: masjuni@gmail.com; Telp/Fax.: 0281-638792
the shelf-life of carcasses, i.e. carcasses with high degree of contamination (high microbial load) have short shel-life. Zumrotin (1995) reported that broiler carcasses sold in the traditional markets showed sliminess and exhibit color changes only after 6 hours post-slaughter. Decontamination techniques for carcasses are targeted at reducing or eliminating bacteria that may be human pathogens as well as those that may cause meat spoilage (Huffman, 2002). Decontamination is needed because the current hygiene and sanitation standards during carcass production are inadequate to ensure that carcasses are free from pathogen and spoilage microorganisms (bolder, 1997). To date, however, there is no stict regulation applied especially in the smale-scale or home poultry slaughterhouses regarding the application of decontamination of carcasses. Several meat surface decontamination treatments that have been reported to be effective in reducing surface microorganisms in the carcasses including
129
134
the use of hot steam (Pipek et al., 2005b), combination of hot steam and lactic acid 2% (Pipek et al., 2005a), and soaking carcases in hot water (James et al., 2000). However, these methods caused undesirable changes in carcass quality, which is discoloration, which may affect consumer preferences (Phebus et al., 1996; Whyte et al., 2003). Other decontamination method that has been proposed is the use of different acid solutions, including organic acids (Hinton and Corry, 1999). Soaking or spraying a meat surface with organic acid often achieves decontamination (Deumier, 2006). Decontamination of carcasses using acids solution is simple and cost-effective (Bolder, 1997) so that potentially applicable to small-scale or home broiler slaughterhouse. Therefore, the objective of the experiment is to investigate the effects of decontamination of broiler carcasses using organic acids on the total microbial number and quality characteristics of broiler carcasses during storage.
Research Methods
Material
Raw materials used were 30 heads of newly slaughtered broiler chicken obtained from a local small-scale poultry slaughterhouse. The average carcass weight was 1.5 kg. They were placed in clean plastic bags and transported in a chilled storage box to the laboratory. The acids solutions (2%) were prepared by dilution of 80% acid with aquades.
Experimental Design
The research was carried out using a Completely Randomized Design (CRD) with 5 decontamination treatments, which included dipping poultry carcasses for 5 minutes in (A) cold water, (B) 2% lactic acid, (C) 2% citric acid, and (D) 2% acetic acid. After dipped, carcasses were hanged under room condition. Each treatment has 4 replicates. Each carcass was measured for (1) total microbial number (total plate count), (2) physical quality (degree of acidity/pH and water holding capacity/WHC), and (3) organoleptic quality (color, off-odor, and sliminess). Variables were determined before decontamination and then 0, 2, 4, 6, and 8 hours after decontamination.
microorganisms were removed by washing and rinsing carcasses using aquades (1:2 w/v). Rinsed water was then sampled for total microbe determination by dilution up to 10-4 and planted in Nutrient Agar (NA). Incubation was done at 36oC for 2 x 24 hours. Colonies of microbes were counted using a colony counter and the result was expressed in colony forming unit (cfu). All measurement was done in duplicate. Degree of acidity (pH) of the carcass was measured by taking 5 g of breast meat (M. Pectoralis major), then blended in 10 ml aquades for 30 sec. The blend was transferred in a clean beker glass and the pH was determined using Hanna pH meter. The electrodes were calibrated using buffer solution standard pH 7.0. Water Holding Capacity (WHC) was measured using Filter Paper Press Method (Honikel and Hamm, 1994). Briefly, 300 g breast meat was taken and placed in the Whatman filter paper no 41. Then, filter papers with meat sample was placed in between two glass-plates and loaded with 35 kg weight for 5 minutes. Wet area and meat area in the filter paper were measured to calculate free water content. Total water content of the meat was also determined using drying method (105oC for 12 hours). WHC was the difference between total water and free water content of the meat and expressed in %. Organoleptic charateristics of the carcass were assessed by 6 trained panelists for its color, odor and sliminess. Carcasses were scored 1-7 for color (1: extremely pale, 4: normal, 7: extremely red), 1-4 for off-odor (1: not detected, 4: very strong) and 0-1 for sliminess (0: not slimmy, 1: slimmy) with fresh carcass (30 minutes after slaughter) were used as a reference. For odor, fresh/reference carcas was scored 4, and for off-odor scored 1. During scoring, each panelist worked independently.
Data Analysis
Data were analised using Analisis of Variance employing statistical software package of SAS (SAS Institute Inc., 2001).

Decontamination of broiler carcasses caused changes in total microbial number, degree of acidity, water holding capacity and organoleptic characteristics (Table 1). Total microbial number. The average initial total microbial number of broiler carcases was 3.9 x
Measurement
Total microbial number was determined using Standard Plate Count (SPC) as described by Fardiaz (1993). Samples were collected following the method described by Budiarti (2002). Briefly, surface
Effects of Decontamination (Sumarmono dan Rahardjo)
133
104 cfu/g. After decontamination, total microbial number decreased significantly (P<0.01) from level 104 cfu/g to 101 cfu/g (Table 1). However, the effects of organic acids on the reduction of total microbial number (in percent) were not significant (P>0.05). Under room temperature, total microbial number increased significantly (P<0.01) with the advance of storage, started from initial level of 101 to102 cfu/g after 2 hours, 103 cfu/g after 4 hours, and 104 cfu/g after 6 hours (Figure 1). After 8 hours of storage at room temperature, total microbial number reached five-fold of the initial population, which was 105 cfu/g. Degree of acidity (pH). Initially, the average pH of carcasses was 5.97. Decontamination using organic acids caused the pH to decrease (Figure 2), thus organic acids-treated carcasses have significantly higher pH (P<0.05) than cold watertreated carcasses. In general, no marked changes in term of pH during storage for all treatments Water Holding Capacity. The average water holding capacity (WHC) of carcasses before decontamination was 30.23%, which then sub sequentially increased (P<0.05) during storage (Figure 3). However, treatments with organic acids resulted in no significant changes (P>0.05) in WHC of broiler carcasses. On average, all carcasses have average WHC of 31.37%. Organoleptic characteristics. In general, organic acids-treated carcasses were paler than cold water-
treated carcasses (Table 2). After 8 hours of storage under room temperature, there was no indication of sliminess at the surface of carcasses indicating no marked growth of molds. Compared to fresh carcasses, the surface of carcasses after 8 hours storage was drier as a result of evaporation of moisture.
Table 1. Changes in total microbial number after decontamination using organic acids (%)1) Treatment2) A B C D 0 -99.95 -99.94 -99.96 -99.98 2 -99.53 -99.53 -99.40 -99.54 Storage (hour) 4 6 -97.56 -65.89 -95.97 -57.72 -97.37 -52.54 -96.34 -69.17 8 +370.70 +295.87 +430.81 +230.07
1) Sign (-) indicate reduction/lower and (+) indicate increament/ higher compared than initial population (3.9 x 104 cfu/g) 2) ; 2) A: Cold water, B: lactic acid, C: citric acid, D: acetic acid.
Table 2. Scores of organoleptic characteristics of Carcasses1)
Treatment A B C D
Color 5.2 3.5 3.0 3.2
Off-odor 1,2 1,8 2,3 1,8
Sliminess Negative Negative Negative Negative
1) A: Cold water, B: lactic acid, C: citric acid, D: acetic acid. Carcasses were scored 1-7 for color (1: extremely pale, 4: normal, 7: extremely red), 1-4 for off-odor (1: not detected, 4: very strong) and 0-1 for sliminess (0: not slimmy, 1: slimmy) with fresh carcass (30 minutes after slaughter) were used as a reference. For color, fresh/reference carcas was scored 4, and for off-odor scored. 1. Sliminess was observed after 6 and 8 hours of storage
T0 T2 T4 T6 T8
Total microbial number (cfu/gr)
1000000 100000 10000 1000 100 10 1 Awal Cold water Lactic acid Citric acid Acetic acid
Decontamination
Figure 1. Total microbial number (cfu/g) at 0, 2, 4, 6, and 8 hours (T0,T2,T4,T6,T8) storage time after decontamination. Initial population: 3.9 x 104 cfu/g.
134
A 6,6 6,4 6,2 6,0
pH
5,8 5,6 5,4 5,2 5,0 Initial 0 2 4 6 8 Storage time (hour)
Figure 2. Degree of acidity (pH) of broiler carcasses during storage after decontamination. Initial pH was determined from fresh carcass (30 min after slaughter). A: Cold water, B: lactic acid, C: citric acid, D: acetic acid
A 45 40 B C D
WHC (%)
35 30 25 20 Initial 0 2 4 6 8 Storage time (hour)
Figure 3. Water holding capacity of broiler carcasses after decontamination using organic acids. Initial WHC was determined from fresh carcass (30 min after slaughter). A: Cold water, B: lactic acid, C: citric acid, D: acetic acid
In this experiment, broiler carcasses were obtained from small-scale poultry slaughterhouse and have initial microbial population of 3.9 x 104 cfu/g. Without proper handling and storage, such as refrigeration and proper packing, these microbes would multiply within an hour because of the availability of nutrients and favorable environments. Population increase can be caused by reproduction of the initial population and also speed up by cross contamination during storage, transportation and display by retailers. The net results would be spoilage within few hours after slaughter and economic losses due to quality deterioration. This condition is not uncommon as most small-scale and home poultry slaughterhouses have yet implement good processing practices or provide cold room to keep poultry carcasses. Furthermore, most meat retailers in traditional markets (wet markets) display their commodities in open spaces under humid and
hot environmental temperatures. Higher microbial contamination have been reported by Suryanto (2005). This researcher reported that poultry carcasses produced by traditional and semi-modern poultry slaughterhouses in Yogyakarta have microbial load of 124x106 dan 31x105 cfu/g, respectively. Consequently, the shelf-life of these carcasses would be very short as Zumrotin (1995) reported that broiler carcasses sold in the traditional markets showed sliminess and exhibit color changes only after 6 hours post-slaughter. Poultry carcasses showed initial sliminess and un-fit for human consumption when bacterial loads reached 107 cfu/cm2 or 108 cfu/g (Simonsen et al., 1988). These facts indicate that decontamination is very important step to prolong shelf-life and prevent quality deterioration of poultry carcasses. The results showed that total microbial number of the carcass drastically decreased after
Effects of Decontamination (Sumarmono dan Rahardjo)
133
decontamination with organis acids. The use of organic acids for decontamination in this experiment because organic acids were recognised as effective antimicrobial agents and safe for food application (Generally regarded as safe, GRAS) (Bilgili et al., 1998; Muller, 1999). The reduction in total microbial number could be attributed to the low pH of the surface of the carcasses upon dipping in lactic, citric and acetic acids. Bolder (1997) stated that the antimicrobial properties of organic acids is due to their low degree of acidity. However, results also indicated that washing poultry carcasses during decontamination provided physical removal to microorganisms. This was supported by the fact that total microbial numbers of cold water treated carcasses and organic acid treated carcasses were not substantially different at 0 and 2 hours postdecontamination. Then, the organic acids retard further growth of microorganism in acid-treated carcasses resulted in lower total number of microorganism with the advance of storage time. Based on the physical characteristics of the carcass (pH and WHC), the quality of organic acidtreated carcass showed no substantial reduction after 8 hours of storage (Figure 2 and 3). This can be attributed to the delay of microbial growth as a result of decontamination. Woods and Church (1999) stated that microorganism is the predominant facto in determining quality deterioration of poultry carcasses. Under normal condition, pH of meat decreases as a result of accumulation of lactic acid produced from post mortem anaerobic glycolisis (Puolanne et al., 2002). Warris et al. (1999) stated that pH of live animal is approximately 7.2 and decreases to 6 or less during rigor mortis. The addition of organic acids speeds up the decrease of pH. Reduction speed and ultimate pH determine the color and WHC, as well as growth of microorganisms of meat. WHC is an important carcass quality characteristics because its determine purge and cooking losses. In this experiment, WHC of carcasses tended to increase during storage. This could be due to the evaporation of moisture from the surface of carcasses which resulted in drier carcasses. Moisture that evaporated from carcasses was free water and because WHC was calculated as the difference between total water and free water contents, the escape of free water contributed to the increase of WHC. Drier carcass surface during storage was also detected by panelists; hence until 8 hours of storage, initial indication of sliminess was
not present. This results showed that decontamination was able to prolong the shelf-life of poultry carcasses as Zumrotin (1995) reported that broiler carcasses sold in the traditional market showed sliminess only after 6 hours post-slaughter. Organoleptically, organic acid-treated carcasses were only slightly different from cold water-treated carcasses. In general, decontamination resulted on slightly paler carcasses and still within acceptable level. Muller (1999) reported that the use of lactic acid caused color changes and swelling in the carcass. In pork, treatment with 2 and 5% lactic acid for 120 sec dipping reduced organoleptic quality (van Netten et al., 1995). Organoleptic changes of carcass could be a serious problem because any color changes may results in consumers rejection. Thus, further research is needed to alleviate this problem.
Conclusions
Decontamination of poultry carcasses using organic acids (lactic, citric and acetic acids) substantially reduced total microbial number from 104 level to 101 cfu/g. After 8 hours of storage, organic acids-treated carcasses showed little changes in physical (pH and WHC) and organoleptic (offodor and sliminess) characteristics, indicating prolonged shelf-life. Decontaminated carcasses were slightly paler than fresh poultry carcasses. Therefore, decontamination with 2% organic acids, especially citric and acetic acid, can be recommended to reduce microbial number and prolong shelf-life of poultry carcasses produced by small-scale and home poultry slaughterhouse because of its effectiveness, ease of use and affordable.
References
Bilgili, S.F., D.E. Conner, J.L. Pinion, and K.C. Tamblin, 1998. Broiler skin color as affected by organic acids: Influence of concentration and method of application. Poultry Science 77: 751-757. Bolder, N. M., 1997. Decontamination of meat and poultry carcasses. Trends in Food Science & Technology 8: 221-227. Borch, E., and P. Arinder, 2002. Bacteriological safety issues in red meat and ready-to-eat meat products, as well as control measures. Meat Science 62: 381-390. Budiarti, S., 2002. Teknik pengambilan sampel. In: Makalah Pelatihan Mikrobiologi Dosen Perguruan Tinggi Negeri dan Swasta se Jawa, 29 Juli - 9
134
Agustus. Penyelenggara: Jurusan Biologi MIPA IPB dan Bagian Proyek Peningkatan Kualitas Sumberdaya Manusia Dirjen DIKTI Depdiknas, Bogor. Deumier, F., 2006. Decontamination of deboned chicken legs by vacuum-tumbling in lactic acid solution. International Journal of Food Science and Tehnology 41: 23-32. Fardiaz, S., 1993. Analisis mikrobiologi pangan. Raja Grafindo Perkasa, Jakarta. Hinton, M.H., and J.E.L. Corry, 1999. The decontamination of carcass meat. In: R.I. Richardson and G. C. Mead (eds.) Poultry meat science. p 285295. CABI Publishing, New York. Honikel, K.O., and R. Hamm, 1994. Measurement of water holding capacity and juiceness. In: A. M. Pearson and T. R. Dutson (eds.) Quality attributes and their measurement in meat, poultry and fish products. p 139-140. Blackie Academic & Professional, Glasgow, UK. Huffman, R.D., 2002. Current and future technologies for the decontamination of carcasses and fresh meat. Meat Science 62: 285-294. James, C., J.A. Thornton, L. Ketteringham, and S.J. James, 2000. Effect of steam condensation, hot water or chlorinated hot water immersion on bacterial numbers and quality of lamb. Journal of Food Engineering 43: 219-225. Muller, R., 1999. Safety of poultry meat: From farm to table. International Consultative Group on Food Irradiation (ICGFI), Rome. Phebus, R.K., A.L. Nutsch, and D.E. Schafer, 1996. Laboratory and commercial evaluation of a steam pasteurization process for reduction of bacterial populations on beef carcass surfaces. In: Proceedings of 49th Annual Reciprocal Meats Conference, Provo, Utah, Chicago IL. p 121-124. Pipek, P. et al., 2005a. Microbial decontamination of beef carcasses by combination of steaming and lactic acid spray. Journal of Food Engineering 67: 309-315. Pipek, P., M. Sikulova, J. Jelenikova, and M. Izumimoto, 2005b. Colour changes after carcasses decontamination by steam and lactic acid. Meat Science 69: 673-680. Puolanne, E.J., A.R. Poso, M.H. Ruusunen, K.V. Sepponen, and M.S. Kyla-Puhju, 2002. Lactic acid
in muscle and its effects on meat quality. 55th Annual Reciprocal Meat Conference, Americal Meat Science Association, July 28-31, 2002 Michigan State University, Michigan USA: 57-62. SAS Institute Inc., 2001. Sas/stat software version 8.2. SAS Institute Inc., Cary, NC. Satin, M., 2002. Use of irradiation for microbial decontamination of meat: Situation and perspectives. Meat Science 62: 277-283. Simonsen, B., R. Hamm, and B. Rogowski, 1988. Meat as food. In: H. R. Cross and A. J. Overby (eds.) Meat science, milk science and technology. p 115. Elsevier Applied Science, Amsterdam. Suryanto, E., 2005. Evaluasi mikrobiologis karkas dan tingkat sanitasi pada usaha pemotongan ayam tradisional dan moderen di yogyakarta. Makalah Seminar Nasional Keamanan Pangan Produk Peternakan, Fakultas Peternakan UGM, 14 November 2005. Yogyakarta. van Netten, P., D.A.A. Mossel, and J. Huis In t Veld, 1995. Lactic acid decontamination of fresh pork carcasses: A pilot plant study. International Journal of Food Microbiology 25: 1-9. Warris, P. D., L. J. Wilkins, and T. G. Knowles, 1999. The influence of antemortem handling on poultry meat quality. In: R. I. Richardson and G. C. Mead (eds.) Poultry meat science. p 217-229. CABI Publishing, New York. Whyte, P., K. McGill, and J.D. Collins, 2003. An assessment of steam pasteurization and hot water immersion treatments for the microbiological decontamination of broiler carcasses. Food Microbiology 20: 111-117. Woods, L. F. J., and P. N. Church, 1999. Strategies for extending the self-life of poultry meat and products. In: R. I. Richardson and G. C. Mead (eds.) Poultry meat science. p 297-311. CABI Publishing, New York. Zumrotin, K.S., 1995. Upaya pengamanan konsumen untuk memperoleh daging yang aman dan berkualitas. In: Seminar Nasional Kesehatan Masyarakat Tentang Keamanan dan Kualitas Daging, Universitas Gadjah Mada, Yogyakarta.

Journal of Animal Production (JAP) Vol. 10 (2) Mei 2008

Cargado por

Información del documento

Derechos de autor

Formatos disponibles

Compartir este documento

Compartir o incrustar documentos

Opciones para compartir

¿Le pareció útil este documento?

¿Este contenido es inapropiado?

Copyright:

Formatos disponibles

Journal of Animal Production (JAP) Vol. 10 (2) Mei 2008

Cargado por

Copyright:

Formatos disponibles

ANIMAL PRODUCTION, Mei 2008, hlm.67-72 ISSN 1411 2027 Terakreditasi No.

*Contact Person: akhmad_sodiq@yahoo.com

ANIMAL PRODUCTION, Vol. 10, No. 2, 2008 : 67 - 72

Data Collection and Analysis

Results and Discussion

Animals and Production System

Reproductive Performance and Preweaning Mortality (Sodiq dan Sudewo)

138 (24.70) 388 (68.90) 36 ( 6.40)

134 (97.10) 365 (94.10) 30 (83.30)

4 (2.90) 23 (5.90) 6(16.70)

215 (38.30) 170 (30.20) 81 (14.40) 42 (7.50) 26 (4.60) 11 (2.00) 17 (3.00)

200 (93.00) 159 (93.50) 76 (93.80) 40 (95.20) 26 (0) 11 (0) 17 (0)

15 (7.00) 11 (6.50) 5 (6.20) 2 (4.80) 0 (0) 0 (0) 0 (0)

Reproductive Traits Litter Sizes at Birth

ANIMAL PRODUCTION, Vol. 10, No. 2, 2008 : 67 - 72

Reproductive Performance and Preweaning Mortality (Sodiq dan Sudewo)

ANIMAL PRODUCTION, Vol. 10, No. 2, 2008 : 67 - 72

*Korespondensi Penulis: prabowopp@yahoo.co.id

ANIMAL PRODUCTION, Vol. 10, No. 2, 2008 : 73 - 77

Pemeriksaan Ultrasonografi Ovaria

Hasil dan Pembahasan

Pengambilan Plasma Darah dan Determinasi Progesteron Plasma

folikel dominan pertama

folikel dominan kedua

Dinamika Perkembangan Folikel (Putro et al.)

hari siklus estrus

ANIMAL PRODUCTION, Vol. 10, No. 2, 2008 : 73 - 77

Dinamika Perkembangan Folikel (Putro et al.)

Bovine Embryo Transfer. Transfer Center, Japan.

Histologis Ovarium Domba Pascatransplantasi Intrauterin pada Kelinci Pseudopregnansi

*Koresponden Penulis: sumarmin68@yahoo.co.id . HP.081389958976

Histologis Ovarium Domba (Sumarmin et al.)

Materi Percobaan dan Tata Kerja

ANIMAL PRODUCTION, Vol. 10, No. 2, 2008 : 78 - 84

Hasil dan Pembahasan

Pengamatan Variabel Percobaan

Histologis Ovarium Domba (Sumarmin et al.)

ANIMAL PRODUCTION, Vol. 10, No. 2, 2008 : 78 - 84

Histologis Ovarium Domba (Sumarmin et al.)

ANIMAL PRODUCTION, Vol. 10, No. 2, 2008 : 78 - 84

ANIMAL PRODUCTION, Vol. 10, No. 2, 2008 : 85 - 89

Hasil dan Pembahasan

Pengaruh Jenis Kelamin (Haryoko dan Warsiti)

BP2 (1.674,88 26,55) 767,83 27,87b 54,70 0,33

BP3 (2.076,25 26,59) 997,00 25,42c 58,04 0,75

487,83 21,99a 48,37 1,00

750,33 29,17b 54,03 0,55

953,13 31,17c 56,74 0,61

BP1 (1.259,38 16,44)

BP4 (2.398,50 19,41)

Bobot dan Persentase Komponen Karkas

ANIMAL PRODUCTION, Vol. 10, No. 2, 2008 : 85 - 89

Pengaruh Jenis Kelamin (Haryoko dan Warsiti)

ANIMAL PRODUCTION, Vol. 10, No. 2, 2008 : 90 - 95

ANIMAL PRODUCTION, Vol. 10, No. 2, 2008 : 90 - 95

Results and Discussion

Feed Restriction Does Not (Yuwono dan Sodiq)

III 0.03 0.003a1

III 0.025 0.002b

3.50 0.18a 3.94 0.26

3.54 0.24a 3.64 0.41

4.47 0.15b 4.84 0.30

4.27 0.258 4.39 0.234

4.00 0.192 4.21 0.233