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Documento de Ingenieria Genetica

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UNIVERSIDAD TECNICA DE COTOPAXI U.A.

CAREN

M.Sc. PATRICIO CLAVIJO CEVALLOS

INGENIERIA GENETICA
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La Ingeniería Genética es la ciencia biológica que trata de la manipulación de los genes. La aplicación de los conocimientos de la Ingeniería Genética constituye la Biotecnología. El ADN puede cortarse en fragmentos por medio de las enzimas de restricción. Estos fragmentos quedan con unos extremos o bordes cohesivos, también llamados bordes pegajosos, que hacen que se puedan unir fragmentos de distinto origen, formando un ADN llamado recombinante. En Ingeniería Genética es necesario la obtención de muchas copias de fragmentos de ADN para su estudio y manipulación. Se consigue mediante la clonación, que puede ser "en vivo" utilizando células que actúan como agentes replicativos, o "in vitro", mediante la PCR, (Reacción en Cadena de la Polimerasa). Para introducir ADN recombinante en células hospedadoras, se recurre a elementos génicos llamados vectores génicos. Estos son los plásmidos, los bacteriófagos y los cósmidos. La localización de determinados segmentos de ADN se lleva a cabo mediante diversas técnicas, entre las que destacan las sondas de hibridación. La determinación de la secuencia de nucleótidos de un ADN se puede realizar por diversos métodos, como el de Sanger o de los didesoxinucleótidos. La Biotecnología es importante en medicina, agricultura y ganadería y reporta una serie de provechos, entre ellos está la síntesis de productos necesarios para la vida, diagnosis y remedio de muchas enfermedades, la prevención de enfermedades hereditarias y la consecución de plantas y animales transgénicos. El estudio del genoma humano, gracias a la tecnología de la ingeniería genética, completado en junio de 2000 abre un campo imposible de predecir y cuya finalidad es producir mejoras en la humanidad. Todas estas investigaciones y aplicaciones, deben ser realizadas teniendo en cuenta las normas universales de la ética, la dignidad humana y la conservación de la naturaleza, constituyendo un patrimonio común a todos los pueblos. Ingeniería genética en bacterias Son los seres vivos más utilizados en Ingeniería Genética. La más utilizada es la Escherichia coli. Se usa prácticamente en todos los procesos de I.G. Ingeniería genética en levaduras y hongos Son junto con las bacterias los sistemas más utilizados. El Saccharomyces cerevisiae fue el primer sistema eucariota secuenciado completamente. Otra levadura importante es P. pastoris, utilizada para conseguir proinsulina en cultivo discontinuo y quitinasa en cultivo continuo. En el campo de los hongos destaca por su labor médica el Penicillium.

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Ratones knockout. Ingeniería Genética en animales

Diagnóstico de enfermedades de origen genético Artículo principal: Diagnóstico genético preimplantacional. Un ejemplo típico es la producción de insulina que se obtiene a partir de la levadura Sacharomyces cerevisae. una de las revistas científicas más prestigiosas del mundo. La mejora de la calidad de las semillas es también un objetivo. Las técnicas de ingeniería genética también permiten el desarrollo de plantas que den frutos de maduración muy lenta. elaborar fármacos. tienen un interés médico y comercial muy grande. puede comportar un riesgo potencial. La biotecnología permite desarrollar plantas transgénicas que producen sustancias de interés farmacológico.Sc.A. Obtención de anticuerpos monoclonales Este proceso abre las puertas para luchar contra enfermedades como el cáncer y diagnosticarlo incluso antes de que aparezcan los primeros síntomas. en la cual se clona el gen de la insulina en los humanos. es posible recoger tomates maduros de la tomatera y que lleguen al consumidor conservando intactos su sabor. CAREN M. Obtención de vacunas recombinantes El sistema tradicional de obtención de vacunas a partir de microorganismos patógenos inactivos. Antes. mejorar las cualidades organolépticas de un producto o que ciertas plantas sean más resistentes a determinados factores ambientales. PATRICIO CLAVIJO CEVALLOS                  La manipulación genética de los animales persigue múltiples objetivos: aumentar el rendimiento del ganado. Como la mayoría de los factores antigénicos son proteínas lo que se hace es clonar el gen de la proteína correspondiente. Ingeniería Genética en plantas Actualmente se han desarrollado plantas transgénicas de más de cuarenta especies.UNIVERSIDAD TECNICA DE COTOPAXI U.. ciertas proteínas y hormonas. bacterias o insectos. olor. se obtienen actualmente por ingeniería genética. Las aplicaciones farmacéuticas son otro gran punto de interés. Muchas vacunas. gracias a la tecnología del ADN recombinante. Estas plantas son capaces de producir antibióticos. factores de coagulación. como la hormona del crecimiento. producir animales con enfermedades humanas para la investigación. se puede diagnosticar si este gen anómalo está presente en un determinado individuo. como la producción de distintas sustancias en los alimentos que aumentan su calidad nutricional. la hormona del crecimiento. etc. una investigación del cinvestav Irapuato en colaboración con científicos de Estados Unidos y Francia en la cual hallaron una proteína llamada argonauta 9 con la que se podría llegar a . como el frío. Conociendo la secuencia de nucleótidos de un gen responsable de una cierta anomalía. Mediante ingeniería genética se han conseguido plantas resistentes a enfermedades producidas por virus. toxinas y otras sustancias que atacan a los microorganismos. También se han conseguido otro tipo de mejoras. como anticuerpos. color y textura. etc. Aplicaciones de la Ingeniería Genética en medicina e industria farmacéutica Obtención de proteínas de mamíferos Una serie de hormonas como la insulina. la obtención de estas proteínas se realizaba mediante su extracción directa a partir de tejidos o fluidos corporales. como la de la hepatitis B. Logros El 7 de marzo de 2010 fue publicado en línea y rectificado el 25 de marzo del mismo año en la revista Nature. se clonan los genes de ciertas proteínas humanas en microorganismos adecuados para su fabricación comercial. Así. En la actualidad.

Las enzimas de restricción reconocen secuencias de 4. generados en diferentes moléculas de ADN. formadas por bacterias idénticas. por ejemplo: · · · · en · Vacunas. PATRICIO CLAVIJO CEVALLOS inducir la clonación natural de las plantas. un conjunto de metodologías que permite transferir genes de un organismo a otro. Para seleccionar las células (bacterias o células animales o vegetales) que recibieron el plásmido. y algunos dicen que podría revolucionar la producción agrícola internacional. Así. el gen de interés puede insertarse en el plásmido-vector e incorporarse a una nueva célula. el gen de la insulina humana). como la de la hepatitis B Fármacos. El plásmido recombinante puede aislarse de estas colonias y transferirse a otras células. analizarlos. es posible no sólo obtener las proteínas recombinantes de interés sino también mejorar cultivos y animales. pueden sellarse con la enzima ADN ligasa y generar así una molécula de ADN nueva.Sc. De esta manera. denominada recombinante. de eso se trata la ingeniería genética.. esto tendría un fuerte impacto en la industria de semillas. en este ejemplo). Hasta el momento se ha utilizado la ingeniería genética para producir. como la insulina y la hormona del crecimiento humano Enzimas para disolver manchas. modificarlos y hasta de transferirlos de un organismo a otro para conferirle una nueva característica. éste lleva. de resistencia a un antibiótico). Hay muchas enzimas de restricción obtenidas a partir de bacterias y que sirven como herramientas para la ingeniería genética. Las células que sobreviven se dividen y generan colonias. . El desarrollo de la ingeniería genética (también llamada metodología del ADN recombinante) fue posible gracias al descubrimiento de las enzimas de restricción y de los plásmidos. Estos extremos.. Justamente.A. como las que se usan en los detergentes en polvo Enzimas para la industria alimenticia. Los plásmidos son moléculas de ADN circulares. Las enzimas de restricción reconocen secuencias determinadas en el ADN. que le otorga a la célula que lo lleva la capacidad de sobrevivir en un medio de cultivo selectivo (medio con antibiótico. ej. además del gen de interés (por ej. Los plásmidos fueron modificados por los investigadores para ser empleados como “vectores”. Como consecuencia. Así. 6 o más bases y cortan generando extremos romos o extremos cohesivos. a través del proceso de transformación. Alcances de la ingeniería genética Cuando los científicos comprendieron la estructura de los genes y cómo la información que portaban se traducía en funciones o características. Estas bacterias se denominan recombinantes o genéticamente modificadas. como las empleadas en la elaboración del queso y la obtención de jugos de fruta. CAREN M. la ingeniería genética sirve para clonar fragmentos de ADN y para expresar genes (producir las proteínas para las cuales estos genes codifican) en organismos diferentes al de origen. originalmente aisladas de bacterias y que pueden extraerse de las mismas e incorporarse a otras. comenzaron a buscar la forma de aislarlos.UNIVERSIDAD TECNICA DE COTOPAXI U. un gen marcador de selección (por. conociendo la secuencia de un fragmento de ADN es posible aislarlo del genoma original para insertarlo en otra molécula de ADN. Plantas resistentes a enfermedades y herbicidas.

Encontrar al gen que lleva las instrucciones para esta característica. Combinar este gen con otros elementos genéticos para que sea funcional ahora en una planta (ligarlo a un vector). de eso se trata la ingeniería genética. Identificar la característica “resistencia a insectos” en el organismo de origen. A su vez. Identificar un carácter deseable en el organismo de origen. Podemos entonces generalizar los pasos de la ingeniería genética de la siguiente manera: 1. Transferir este gen a células de maíz (organismo receptor). una planta adulta. 4. el ambiente y la industria Etapas para la obtención de un organismo transgénico La siguiente tabla resume los pasos básicos de la ingeniería genética empleados para transformar un organismo. Crecer y reproducir el organismo receptor. Encontrar el gen responsable del carácter deseado (gen de interés). 3. PATRICIO CLAVIJO CEVALLOS Por esta metodología es posible introducir genes de interés en todo tipo de células.A. Identificar las células de maíz que recibieron el gen (células transformadas) y regenerar. 2. 5. CAREN M.UNIVERSIDAD TECNICA DE COTOPAXI U. las técnicas que emplea la ingeniería genética se denominan técnicas de ADN recombinante. empleando los vectores y las técnicas propias de cada sistema. Combinar dicho gen con otros elementos necesarios (vector) para que éste sea funcional en el organismo receptor. previamente introducido en el vector adecuado. es posible no sólo obtener proteínas recombinantes de interés sino también mejorar cultivos y animales. analizarlos. 2. modificarlos y hasta de transferirlos de un organismo a otro para conferirle una nueva característica. El ADN que combina fragmentos de organismos diferentes se denomina ADN recombinante. a partir de estas células. comenzaron a buscar la forma de aislarlos. la ingeniería genética es lo que caracteriza a la biotecnología moderna que implementa estas técnicas en la producción de bienes y servicios útiles para el ser humano. 5. 4. Así. En consecuencia. 3. Por ejemplo. y se ejemplifica con un caso concreto: . Los organismos que reciben un gen que les aporta una nueva característica se denominan organismos genéticamente modificados (OGM) o transgénicos. la bacteria del suelo Bacillus thuringiensis. Justamente. De los genes a la ingeniería genética Cuando los científicos comprendieron la estructura de los genes y cómo la información que portaban se traducía en funciones o características. Transferir el gen de interés. para el caso de la transferencia de un gen insecticida de una bacteria al maíz: 1. al organismo receptor.Sc. que se podría definir como un conjunto de metodologías que permite transferir genes de un organismo a otro y expresarlos (producir las proteínas para las cuales estos genes codifican) en organismos diferentes al de origen. ahora modificado genéticamente.

Identificar las células el organismo receptor. Transferir este gen a interés. la bacteria del suelo Bacillus thuringiensis (Bt) 2.Encontrar el gen 2. de maíz que recibieron ahora modificado el gen (células genéticamente. 3. caracterizarlo. Crecer y reproducir 5.Transferir el gen de 4. previamente células de maíz introducido en el (organismo receptor). Combinar este gen con otros elementos con otros elementos necesarios (vector) genéticos para que sea para que éste sea funcional en una planta: funcional en el especialmente una organismo receptor secuencia promotora (y ligarlo a un vector adecuado para transformar plantas) 4. Metodología Técnicas de Ingeniería Genética o del ADN Recombinante La obtención de un organismo transgénico mediante técnicas de ingeniería genética implica la . a partir de estas células. una planta adulta resistente a insectos.Combinar dicho gen 3. 5. Encontrar al gen que responsable del lleva las instrucciones carácter deseado (gen para esta característica. aislarlo y aislarlo y caracterizarlo.A. transformadas) y regenerar. al organismo receptor. de interés). PATRICIO CLAVIJO CEVALLOS Caso: obtención de maíz Bt que produce una proteína recombinante que le confiere resistencia a determinados insectos 1. CAREN M. vector adecuado.Identificar un 1.UNIVERSIDAD TECNICA DE COTOPAXI U. Identificar el carácter carácter deseable en el “resistencia a insectos” organismo de origen en el organismo de origen.Sc.

para el caso particular de la producción de una variedad de maíz que resista el ataque de insectos. será más sencillo transferir esa característica a un organismo que no la tiene. y el organismo receptor del gen es la planta de maíz. Se identifica el gen de interés por medio de cruzamientos a partir de una característica que se expresa. PATRICIO CLAVIJO CEVALLOS participación de un organismo que dona el gen de interés y un organismo receptor del gen que expresará la nueva característica deseada. Los plásmidos fueron modificados por los investigadores para ser empleados . Si la característica se atribuye a una proteína. iv) Construcción del vector recombinante. ii) Búsqueda de un gen entre la mezcla de genes del ADN.A. Por ejemplo.Sc. El ADN de interés se inserta en plásmidos-vectores que son moléculas de ADN lineales o circulares en las cuales se puede “guardar” (clonar) un fragmento de ADN. y se verifican las proporciones mendelianas (ver Cuadernos 40 y 41). La tarea de clonar un gen involucra varias técnicas i) Extracción de ADN. CAREN M.Clonar el gen de interés. el organismo dador es la bacteria del suelo denominada Bacillus thuringiensis (Bt) de la cual se extrae el gen que determina la síntesis de la proteína insecticida. Los más usados son los plásmidos de origen bacteriano. Las etapas y técnicas involucradas en este proceso serían: 1. a través del proceso de transformación.UNIVERSIDAD TECNICA DE COTOPAXI U.Corroborar que existe un gen que codifica para la característica de interés. 2. o mejor aún. Cuando se encuentra una característica en un organismo que resulta interesante para transferir a otro organismo debe verificarse que es producto de un gen. Clonar un gen significa tenerlo puro en el tubo de ensayos. iii) Secuenciación. Los plásmidos pueden extraerse de las bacterias e incorporarse a otras. que es producto directo de un gen. dentro de un vector (una molécula mayor de ADN que permite guardar fragmentos de ADN en forma estable y práctica por más tiempo).

Las enzimas de restricción reconocen secuencias determinadas en el ADN. Así. Para tener gran cantidad y fácil disponibilidad del ADN de interés. Estos extremos. el vector se inserta dentro de bacterias (E. El desarrollo de estas técnicas fue posible en gran medida por el descubrimiento de las enzimas de restricción. De esta manera. Las enzimas de restricción reconocen secuencias de 4. las cuales crecen fácil y rápidamente. generados en diferentes moléculas de ADN. Esta es una etapa de “amplificación” del ADN para poder tener gran cantidad para secuenciarlo. PATRICIO CLAVIJO CEVALLOS como vectores (vehículos). pueden sellarse con la enzima ADN ligasa y generar así una molécula de ADN nueva.Sc. el gen de interés puede insertarse en el plásmido-vector e incorporarse a una nueva célula. . denominada recombinante. es posible aislarlo del genoma original para insertarlo en otra molécula de ADN. 6 o más bases y cortan generando extremos romos o extremos cohesivos.A. y luego poder hacer con él ADN recombinante.UNIVERSIDAD TECNICA DE COTOPAXI U. O sea. CAREN M. y por ende del inserto de interés. Hay muchas enzimas de restricción obtenidas a partir de bacterias y que sirven como herramientas para la ingeniería genética. conociendo la secuencia de un fragmento de ADN. la bacteria se utiliza como “multiplicadora” del vector. coli). caracterizarlo.

UNIVERSIDAD TECNICA DE COTOPAXI U. se seleccionan por medio de antibióticos y por reacciones con indicadores de color. en el cual se pueda expresar el gen y medir su función. deletar o mutar secuencias dentro de la región codificante. se debe proceder a confirmar la función real in vivo. Si así se desea se puede agregar. Las bacterias transformadas. comparar esta secuencia con las de genes ya conocidos para determinar a qué gen se parece. terminador. Por ejemplo: si se clona un gen Bt de una bacteria para luego ponerlo en maíz. el gen Bt se puede transferir primero a las especies modelo Arabidopsis thaliana y Nicotiana tabacum 4. 3. Una vez predicha la función del gen clonado por medio de análisis informático. A partir de conocer la secuencia del gen se puede. CAREN M. Para ello se suele transferir el gen a un organismo modelo. que permita que las células vegetales expresen la proteína Bt. y se le asigna una posible función. En el ejemplo del maíz. intrones) para que se pueda expresar en el sistema de interés. y agregar secuencias (promotor. se debe agregar un promotor que funcione bien en plantas. mediante bioinformática.Caracterizar el gen de interés.A. Se originan colonias de bacterias iguales (clones). . PATRICIO CLAVIJO CEVALLOS En placas de Petri se cultivan las bacterias. o sea corroborar que en un sistema biológico funciona acorde a lo que se prevé. El promotor es una región fundamental del gen ya que determina cuándo y dónde se expresará el gen.Modificar el gen de interés. que incorporaron el plásmido y el gen de interés. es decir.Sc.

Repetir el filtrado y conservar nuevamente la pulpa. _ de cucharadita de sal y dos chorros de jugo de limón. . 2. PATRICIO CLAVIJO CEVALLOS 5. Una vez obtenido el OGM. entonces se deberá hacer el análisis de riesgo alimentario y ambiental. si tiene una (o más) copias del transgén. Para el análisis molecular se debe demostrar. CAREN M. mayormente por medio de microorganismos recombinantes (transgénicos) que crecen en biorreactores. tanto en células transformadas y crecidas in vitro como en bacterias recombinantes y animales transgénicos • Enzimas para disolver manchas. se elige el método de transformación más indicado para el organismo que se desea hacer transgénico. 6. como la insulina y la hormona del crecimiento humano. 4. como las empleadas en la elaboración del queso y en la obtención de jugos de fruta. Una vez hecha la construcción genética con el gen y promotor deseado. Para analizar en qué tejido. y cómo y en qué tejidos se expresa el gen. Transformación de un organismo con el gen de interés. Caracterización del OGM. • Enzimas para la industria alimenticia. • Plantas resistentes a enfermedades. momento y cantidad se expresa el gen se analiza la presencia del ARN mensajero y de la proteína recombinante codificados por el transgén. entre otras cosas. se lo analiza desde el punto de vista molecular y biológico. Pasar la mezcla por un colador de té y conservar la pulpa. entre otras características. por ejemplo contra la hepatitis B • Fármacos. entre otras. Para la caracterización biológica. Si será utilizado como alimento y se lo cultivará a campo. Agitar suavemente (para que se abran las paredes de las células). el OGM se analiza desde el punto de vista del objetivo (en este ejemplo. si el maíz resulta efectivamente resistente a los insectos) y desde el punto de vista que sea necesario acorde al OGM en cuestión. 3.A. como las que se usan en los detergentes en polvo. Mezclar media taza de levadura con 150 ml de agua fría.Sc. TRABAJOS PRACTICOS Extracción de ADN de levaduras Materiales · ½ taza de levadura (de la que se usa para hacer pan) · 300 ml de agua fría · 4 cucharaditas de sal fina · dos chorros de jugo de limón · colador de té · tres cucharaditas de alcohol · dos gotas de detergente Procedimiento 1.UNIVERSIDAD TECNICA DE COTOPAXI U. Hasta el momento se ha utilizado la ingeniería genética para producir. entre otras aplicaciones: • Vacunas.

como ser. rompiendo las uniones que mantienen la integridad de la misma. Dejar reposar hasta que se forma un precipitado sólido (se tira). 7. 8. A lo filtrado se le agrega alcohol frío y es éste el momento cuando el ADN de la solución de banana se precipita y se hace visible. Una parte de esta mezcla de banana. Preparar 150 ml de agua fría con _ cucharadita de sal. Así se libera el ADN. El detergente disuelve los lípidos (moléculas grasas) y las proteínas de la membrana celular. 11. PATRICIO CLAVIJO CEVALLOS 5. bananas o cebollas.A.UNIVERSIDAD TECNICA DE COTOPAXI U. Conservar el líquido. El ADN precipita en el fondo del vaso en forma de finas hebras blancas. permitiendo que los mismos sean separados del ADN por filtración. En este caso se hará extracción de ADN de banana. Agregar 3 cucharaditas de sal y agitar 10 minutos más. 6. se sugiere que no sea muy colorido (por ejemplo. Materiales: • 1 tazas o vaso de plástico • Licuadora • Una cuchara plástica para medir y mezclar • 2 filtros de papel de café Nº 2 (conos) • 20 ml de agua destilada • Shampoo de color claro • 1 banana • Sal de mesa. poroto de soja. etc). tres cucharaditas de alcohol y dos gotas de detergente. luego es tratada con shampoo y sal.Sc. Luego. 10. Sugerencia para el práctico: Si algún grupo quiere traer algún otro producto de la verdulería para extraer su ADN. Al final de la guía práctica se sugiere una serie de preguntas para analizar con los alumnos los resultados de la experiencia. porque se dificultara 2. y luego escurrida a través de un filtro de café. ají morrón) para que no opaque la visión del ADN ni muy duro (zanahoria cruda. La sal permite que el ADN precipite en una solución fría de alcohol y que las cadenas de ADN no se corten. De esta forma se libera el contenido celular. el detergente forma complejos con los lípidos y las proteínas. Extracción de ADN vegetal Los estudiantes extraerán ADN de bananas licuadas con agua. granos de trigo. Nota: se recomienda que el material vegetal utilizado sea con poca coloración para facilitar la observación de los resultados. mezclada durante 5-10 minutos. CAREN M. repollo colorado. Revolver suavemente durante 20 minutos. Agregar la pulpa y mezclar (el detergente disuelve el ADN). con o sin Iodo . Diluir el líquido con tres veces su volumen de alcohol. 9.

O usando una pipeta de Pasteur que haya sido calentada en la punta para formar un gancho. 7. cebollas. permanecen en la solución mientras el ADN precipita en la capa de alcohol. hasta que la solución se mezcle. excepto el ADN. 12. Tomar un tubo de ensayo con alcohol frío. Se puede observar el ADN blanco el cual precipita en la capa de alcohol. los componentes. 11. Disolver la sal y el shampoo revolviendo lentamente con la cuchara de plástico evitando formar espuma. . Material de trabajo · Plantas: Begonia. Filtrar la mezcla vertiéndola dentro del filtro y dejar que la solución drene por algunos minutos hasta que sean 5 ml aproximadamente de filtrado para testear. Dejar la solución reposar por 2 a 3 minutos sin mover. El ADN no es soluble en alcohol. 3. 4. 2. Clonación de plantas en la escuela En esta actividad se propone realizar con los alumnos algunos ensayos de propagación de plantas. habrá suficiente ADN para levantar con una varilla de vidrio (el ADN se enrolla a la varilla). PATRICIO CLAVIJO CEVALLOS • 1 pipeta de transferencia plástica o un gotero médico • 1 tubo de ensayo sellado que contenga 95% de etanol o 91% de alcohol isopropílico • 1 conservadora con hielo para enfriar los tubos con alcohol • 1 varilla de vidrio o 1 pipeta Pasteur Procedimiento para la extracción del ADN Preparar una solución de banana procesada con sal. Mientras uno de los miembros del grupo mezcla la solución de banana. Agregar 20 ml (4 cucharaditas) de agua destilada 5. 3.Sc. Es importante no batir el tubo de ensayo. se puede recuperar (tomar) algo de ADN. agregar tres cucharaditas de té de la mezcla de banana del paso 1. otro miembro pondrá el filtro Nº 2 de café dentro de otra taza de plástico. Para mejores resultados el alcohol debe estar tan frío como sea posible. preparar una solución consistente en una cucharadita de té de shampoo y dos pizcas de sal. El ADN tiene la apariencia de mucus blanco y fibroso. Cuando el alcohol se agrega a la mezcla. mezclar una banana por taza de agua destilada (250ml). Llenar la pipeta plástica con la solución de banana y agregarla al alcohol. 9. Cuando se obtienen buenos resultados. CAREN M. Mezclar la solución con la cuchara por 5-10 minutos. Licuar por 15-20 segundos. A la solución preparada en el paso 3. 8. 10. agua destilada y shampoo (detergente) mediante los siguientes pasos: 1. En una licuadora. Doblar el borde del filtro alrededor de la taza para que el filtro no toque el fondo de la taza. 6. Bulbos y Tubérculos (tulipanes. En una taza.A. 13.UNIVERSIDAD TECNICA DE COTOPAXI U. Hiedra.

1.terra. ·· Sustrato (turba. Las papas y cebollas también echan raíces y tallos al colocarlas semisumergidas en un recipiente con agua. Siempre es recomendable realizar varias réplicas del experimento para prever posibles dificultades que surjan. . macetas) · Hormona enraizante (se consigue en viveros) · Agua · Horquilla de alambre o estaca de madera · Herramientas de jardinería · Termómetro Procedimiento: Se recomienda dividir al curso en pequeños grupos y que cada unos de ellos realice la multiplicación de algún vegetal a elección (pueden ser los aquí sugeridos u otros). Cortar trozos de hojas (cada trozo debe llevar como mínimo un nervio principal) o emplear hojas enteras a las cuales se les da unos pequeños cortes en los nervios principales. Cuando aparecen raíces pasar la planta a maceta o a tierra directamente.A. Cortar el segmento terminal de una rama (de entre 7 y 15 cm. 3. perlita) o tierra con nutrientes · Recipientes (vasos. Fuente: http://www. Multiplicación de Begonia: se puede realizar fácilmente por esquejes de hoja. Después de haber hecho un hoyo con una palita se pueden plantar los bulbos a la profundidad debida (que la base del bulbo quede a una profundidad que sea el doble del tamaño del bulbo) con el punto de crecimiento hacia arriba.Sc. batatas). 3. 3. 2. pero no la insolación directa. cebollas (bulbos). y enraízan a 25 ºC en unas semanas. A continuación se echa tierra encima y se presiona ligeramente.cl/ Multiplicación de la Hiedra: Para la propagación de esta planta 1. Multiplicación de Bulbos y Tubérculos: Los tulipanes. Colocar encima de un sustrato compuesto por turba y perlita. 2. luz o temperatura). papas y batatas (tubérculos) pueden reproducirse a partir de estas estructuras de reserva.UNIVERSIDAD TECNICA DE COTOPAXI U. 4. Para el enraizamiento la temperatura debe ser de 25-28 ºC. y para comparar resultados o probar diferentes variables (por ejemplo. Antes de plantar los bulbos lo mejor es colocarlos en el sitio deseado según la separación de plantación que se quiera. CAREN M. 4. Un esqueje puede dar de 1 a 4 brotes adventicios.) por debajo de un nudo. para luego poder transplantarlas a tierra. Retirar las hojas de la rama excepto una o dos en el ápice. 1. 2. Requiere abundante luz. PATRICIO CLAVIJO CEVALLOS papas. Colocar en un recipiente con agua.

¿cómo se explica la respuesta a la pregunta anterior? Se sugiere que cada grupo presente un Informe de Laboratorio para explicar la experiencia realizada. cuántas plantas sobrevivieron b.) Día 1 – Día 2 . los resultados y las conclusiones a las que llegaron.Día 3 – Día 4 . en qué casos se logró la multiplicación de la planta.Día 6 Conclusiones Realizar una puesta en común de los diferentes grupos y analizar: a. cambios observados. cuáles son las condiciones más adecuadas para el crecimiento de cada tipo de planta (comparar entre los diferentes tipos de plantas) e. cómo fue el proceso de desarrollo de la nueva planta (estructuras que se desarrollaron) c. .) Observaciones (Fecha. luz.Sc. etc. cuáles fueron las dificultades en la realización de la experiencia d. temperatura.UNIVERSIDAD TECNICA DE COTOPAXI U. PATRICIO CLAVIJO CEVALLOS Resultados Se propone realizar un cuadro como el que sigue para el registro ordenado de los resultados: Tipo de planta Características de la planta Mecanismo de reproducción asexual Órgano vegetativo de origen Condiciones (medio de cultivo.Día 5 . CAREN M. plantas sobrevivientes. etc. mostrar los registros de datos. qué características presenta la nueva planta respecto de la planta original f.A.

Realizar un ensayo de 3 hojas de cada tema propuesto.UNIVERSIDAD TECNICA DE COTOPAXI U. NOTA: EL TRABAJO SE ENTREGARA EL SABADO 07 DE JULIO DEL 2012 CON SU CORRESPONDIENTE EVALUACION ESCRITA. PATRICIO CLAVIJO CEVALLOS TRABAJO 1. . para ello utilizar la información que se le envía como base: a. Enzimas de restricción c.Sc. Aplicaciones prácticas de la ingeniería genética 2. CAREN M. Realizar las practicas en el laboratorio de las tres practicas propuestas y entregar un informe con sus resultados. Clonación b.A. ADN recombinante d.

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