DETERMINACIÓN DE HEMOGLOBINA EN SANGRE

1. FUNDAMENTO DEL MÉTODO PARA LA DETERMINACION DE HB EN SANGRE

• Reacción de Oxidación (con el Rvo. de Trabajo)

Hb + Ferrocianuro de Potasio Meta hemoglobina

F+2 K4[ Fe+2(CN6)] Fe+3

• Reacción de Coloración

Meta hemoglobina + CNK Cianmetahemoglobina

Fe+3 HbFe+3

Se leen a λ = 540 nm

• Composición del Rvo. de Trabajo

- Ferricianuro de Potasio
- Cianuro de Potasio
- Agente Sterox: rompe la membrana del eritrocito liberando la hemoglobina.

2. PROCEDIMIENTO

Tubo Blanco Tubo Muestra Problema

Muestra Problema --- 10 μL
Rvo. de Trabajo 2.5 ml. 2.5 ml.

λ = 540 nm
Incubar por 3’ a temperatura ambiente.

3. ESTÁNDARES

ABS estándar = 0.517

FC = 18/ ABS estándar
ABS m.p. = 0.421

4. CÁLCULOS

[Hb] = FC x ABS m.p.

[Hb] = 14,65764

5. VALORES NORMALES

[Hb] /Varones = 14 g/dL – 18 g/dL

[Hb] /Mujeres = 12 g/dL – 16 g/dL