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REPÚBLICA BOLIVARIANA DE VENEZUELA

UNIVERSIDAD DEL ZULIA


ESCUELA DE BIOANÁLISIS
CÁTEDRA: MICOLOGÍA
VI SEMESTRE

MARACAIBO, 17 DE FEBRERO DE 2010


ESQUEMA

1. ¿Qué técnicas se aplican para realizar microcultivos?


2. ¿Cómo se diferencia un Rhizopus de una Absidia?
3. Diferencie el género Sincephalastrum del género Mucor
4. Diferencie Acostroma de Peritecio
5. ¿Cómo se da la reproducción asexual de los Ascomycetes?
6. Diferencie un Espermogonio de un Teliosporo
7. ¿Cómo está constituido el Basidiocarpo?
8. Dibuje una conidia de origen Tálico y una de origen Blástico.
9. Diferencie el Coremio del Esporodoquio
10. Dibuje la filamentización Micotórula con Clamidoconias
11.Mencione las pruebas a realizar para llegar a identificar una
levadura
12. ¿Qué observa en un examen directo de una Piritiasis Versicolor?
13. Diferencie un ataque Ectothrix de un ataque Endothrix
14. Diferencie Microsporum canis de Epidermophyton floccosum
15. Diferencie Cladophyalophora carrionii de Phialophora verrucosa
16. ¿Qué observa en un directo de una Esporotricosis?
17. Dibuje la forma parasitaria de una Hitoplasmosis
18. Dibuje el cultivo a 28ºC de una Coccidioidomicosis y la forma
parasitaria de Paracoccidioidomicosis
19. Dibuje la forma parasitaria de una Candidiasis, Zigomicosis y una
Criptococcosis
20. Diferencia Aspergillus flavus de Aspergilus fumigatus
1. ¿Qué técnicas se aplican para realizar microcultivos?

Cuando el examen directo no es suficiente para conocer la identidad del


hongo, se necesitan de otras técnicas adicionales, como el cultivo en
lámina o Microcultivo, ya que permite determinar el modo de desarrollo
de las conidias o esporos con respecto a las estructuras que los
originaron.

Existen dos métodos: El de Riddel y el de Rivalier y Seydel (modificado


por Borolli)

• Método de Riddel (1950)

El equipo estéril está conformado por:


Placa de Petri
Varilla de vidrio
en forma de U

Lámina portaobjetos
Laminilla

Muestra

 Con la ayuda de un bisturí haga cuadritos de 1 cm


aproximadamente en una placa de petri conteniendo
Saboraud Dextrosa Agar, para ello coloque previamente un
papel cuadriculado debajo de la placa.
 Coloque con el bisturí, un cuadrito del medio de cultivo,
sobre la lámina portabobjetos del equipo estéril.
 Inocule en los cuatro lados del cuadradito del medio de
cultivo, el hongo en estudio.
 Tome con la ayuda de una pinza una laminilla, previamente
esterilizada con alcohol y flameada, y colóquela sobre el
bloque sembrado.
 Abra cuidadosamente la tapa de la placa y agregue 8 cc de
agua estéril aproximadamente.
 Incube a 28ºC hasta que ocurra la esporulación (1 semana
aproximadamente)
 Retire la laminilla que cubre el cuadradito y monte con
lactofenol sobre una lámina portaobjetos.
 Retire el bloque del medio de cultivo y descarte. Coloque
una gota de lactofenol sobre la lámina en el sitio donde
estaba el bloque y cubra con una laminilla.
 Saque el exceso del líquido de montaje de las dos
preparaciones.
 Observe al microscopio y anote las características de las
estructuras (forma y color de las conidias, tipo de micelio,
etc.)
• Método de Rivalier y Seydel (modificado por Borolli)

 En un equipo estéril (igual al descrito en el método de


Riddel) coloque, con la ayuda de una pipeta serológica o asa
de platino una capa delgada del medio de cultivo,
previamente licuado, sobre la lámina portaobjeto; deje
solidificar.
 Sembrar un pequeño fragmento de la colonia, cuando
solidifique la capa del medio de cultivo. Invierta la lámina.
Colocar agua estéril.
 Incube a 28ºC hasta que ocurra la esporulación (una semana
aproximadamente)
 Coloque la lámina en la estufa para secar. Retire
cuidadosamente la parte levantada del centro de la
preparación y agregue una gota de lactofenol. Cubra con
una laminilla.
 Observe al microscopio y anote las características de las
estructuras.

1. ¿Cómo se diferencia un Rhyzopus de una Absidia?

En el género Rhyzopus, los esporangióforos parten de unas hifas


diferenciadas en forma de raíz llamadas rizoides. En cambio, en el
género Absidia, los esporangióforos parten de unas hifas especializadas
que conectan dos grupos de rizoides llamadas estolones.

2. Diferencie el género Sincephalastrum del género Mucor

La diferencia recae en el tipo de esporangio. En el género


Sincephalastrum, el esporangio está conformado por esporangiolos de
forma elongada o cilíndrica que contiene de 10 a 15 esporangiosporos
arreglado en hilera (merosporangio); en cambio, en el género Mucor, el
esporangio es globoso y contiene millones de esporangiosporos en su
interior.

3. Diferencie Ascotroma de Peritecio


Ambos son tipos de ascocarpos. El Peritecio tiene forma de botella,
presenta una boca u ostiolo para la salida de las ascosporas, además,
presenta unos pelitos (perífisis) que ayudan a salir a las ascosporas y
son elementos de protección, y al exterior presenta unas hifas estériles
(paráfisis). Los ascos se encuentran en una capa basal llamada himenio.

El Ascotroma tiene forma de masa o plectoprosenquimatoso,


presentando una capa externa dura (preténquima) y una capa interna
laxa (prosénquima) en donde los ascos se producen dentro de lóculos o
cavernas, sin que se desarrolle una pared que delimite cada lóculo.

4. ¿Cómo se da la reproducción asexual de los Ascomycetes?

La reproducción asexual se da a través de la formación de conidias


(término generales que se aplica para todas las esporas asexuales). Su
origen es de tipo blástico, es decir, que la espora deriva de una célula
madre conidiógena, la cual después de un proceso de división celular da
origen a las conidias, quienes pueden estar libres, en racimo o en
cadenas.

5. Diferencie un Espermogonio de un Teliosporo

El Espermogonio corresponde al estadío 0 del ciclo de la vida del orden


Uredinales (royas), en el que se forman los espermatóforos, que
producen los espermacios (masculinos), e hifas receptoras y flexuosas
(femenino)

Por otro lado, el Teliosporo de los Uredinales, corresponde al estadío III


del ciclo de la vida, y corresponden a esporas sexuales binucleadas que
se producen en los telios.

6. ¿Cómo está constituido el Basidiocarpo?

Es un cuerpo fructificante que está constituido por una zona interna o


himenio, dentro de ella se encuentran los basidios (conteniendo los
basidiosporos), los cistidios (estructuras estériles de mayor tamaño) y
paráfisis (estructuras estériles de igual tamaño). También presenta un
subhimenio y trama.

7. Dibuje una conidia de origen Tálico y una de origen


Blástico
Origen Tálico Origen Blástico
Clamidoconidia Fialoconidias
Género Fusarium Género Penicillum

Conidias producidas por la Conidias de origen enteroblástico


transformación de un célula que se forman en cadenas
vegetativa intercalar o terminal basipètas en el interior de una
con engrosamiento y célula conidiógena llamada
redondeamiento de la pared. fiálide. Son unicelulares,
globosas, elipsoidales

8. Diferencie el Coremio del Esporodoquio

De los cuerpos fructificantes, el Coremio es un grupo de conidióforos que


se unen en la base y en parte de su recorrido a modo de cuerda; a
menudo el extremo del coremio es muy ramificado. Las conidias son
unicelulares, subglobosas u ovales y se forman en los extremos de los
conidióforos.

El Esporodoquio, en cambio, es una masa compacta de conidióforos que


constituyen un estroma prosenquimatoso en forma de cohete; en los
extremos de los conidióforos se forman las conidias.

9. Dibuje la filamentización Micotórula con Clamidoconias

Filamentización
Prueba Diagnóstica
Cándida albicans

Acúmulos de blastoconidias en las


uniones de la pseudohifa
(micotórula) y clamidoconidias
terminales.
10.Mencione las pruebas a realizar para llegar a identificar
una levadura

• EXAMEN DIRECTO: Blastoconidias o pseudomicelios.


• CULTIVO: En Sabouraud con Antibiótico, Extracto de Malta, Malta
agar. Las cepas aisladas deben ser sometidas a lo siguiente:
 Estudio macroscópico: color, consistencia y aspectos.
 Características de cultivo:
 Malta Agar a 28ºC y 37ºC
 Agua de Malta a 28ºC: Se evidencian características
macroscópicas (velo o película, anillo y tapón o
depósito) y microscópicas que caracterizan a los
diferentes géneros.
 Características Morfológicas: Diferencia los géneros.
 Prueba de los tubos terminales: presuntiva para C.
albicans.
 Filamentización o técnica de Darmouth: Tipo cándica,
micocándida, blastodendrium, artroconidias,
micotórula con clamidoconidias y negativa.
 Características Fisiológicas: Diferencia las especies.
 Auxonograma: Prueba de Asimilación de azúcares.
 Zimograma: Prueba de fermentación de azúcares.
 Utilización de compuestos nitrogenados.
 Crecimiento de medios libres de vitaminas.
 Producción de compuesto amiloides extracelulares.
 Otras pruebas:
∗ Producción de Ureasa.
∗ Crecimiento a elevadas temperaturas.
∗ Resistencia al cicloheximide.
∗ Producción de esporos sexuales.
∗ Inoculación en animales.

1. ¿Qué observa en un examen directo de una Piritiasis


Versicolor?

Blastoconidias redondas e hifas cortas, septadas, ocasionalmente


ramificadas.

2. Diferencie un ataque Ectothrix de un ataque Endothrix

En el ataque Ectothrix las artroconidias están dispuestas alrededor del


tallo piloso, en cambio en el ataque Endothrix, las artroconidias están en
el interior del tallo piloso.

3. Diferencie Microsporum canis de Epidermophyton


floccosum
La diferencia radica en las formas de las macroconidias y la presencia o
ausencia de microconidias.

Microsporum canis es un hongo compuesto de hifas septadas, hialinas,


abundantes macroconidias de pared gruesa, espinosa, fusiforme, de
extremo puntiaguados y que tienen de 7 a 15 septos. También pueden
observarse microconidias en forma de pera, hifas en raqueta, cuerpos
nodulares y clamidoconidias.

Por otro lado, Epidermophyton floccosum está compuestos de hifas


septadas, hialinas; las macroconidias son en forma de masa, a menudo
en grupos como los dedos de una mano, tiene la pared delgada y lisa
con 2 a 4 septos. No presentan microconidias, abundantes
clamidoconidias. Pueden estar presentes hifas en raqueta, en espiral y
cuerpos nodulares.

4. Diferencie Cladophyalophora carrionii de Phialophora


verrucosa

En Cladophyalophora carrionii se observan hifas septadas pardas,


encima de ellas se forman elongados conidióforos macronematosos, que
producen largas, flexuosas cadenas de blastoconidias.

El hongo de la especie Phialophora verrucosa está formado por hifas


septadas, fiálides en forma de botella, dilatadas en la base y afinadas en
la cima, terminadas en collarete donde las fialoconidias permanecen
unidas en masa.
5. ¿Qué observa en un directo de una Esporotricosis?

Células de levadura ovalada, alargada, globosa monogemantes y


cuerpos asteroides.

6. Dibuje la forma parasitaria de una Hitoplasmosis

Forma parasitaria
Histoplasmosis
Histoplasma capsulatum

Células ovales o de levadura de 2 a


4 µ de diámetro, monogemantes.
7. Dibuje el cultivo a 28ºC de una Coccidioidomicosis y la
forma parasitaria de Paracoccidioidomicosis

Cultivo a 28ºC Forma parasitaria


Coccidioidomicosis Paracoccidioidomicosis
Coccidioides immitis Paracoccidioides brasilensis

Hifas hialinas, sepatadas que se Células esféricas u ovales, de pared


transforman en artroconidias gruesa de 10 a 60 µ de diámetro,
(partícula infectante) que presentan una o múltiples
gemaciones o brotaciones
anisométricas (de diferente tamaño)

8. Dibuje la forma parasitaria de una Candidiasis, Zigomicosis


y una Criptococcosis

Forma parasitaria Forma parasitaria


Candidiasis Zigomicosis
Género Cándida Mucorales y Entomophorales

Blastoconidias y pseudohifas, puede Hifas anchas de 10 a 15 µ de


observarse también pseudomicelios. diámetro, cenocíticas de pared
gruesa, ramificadas; puede también
observarse pseudomicelio
Forma parasitaria
Criptococcosis
Cryptococcus neoformans

Células redondas u ovales, de pared


gruesa gemantes, de 5 a 20 µ de
diámetro rodeadas de una cápsula
refringente que duplica o triplica el
tamaño de la célula.

9. Diferencia Aspergillus flavus de Aspergilus fumigatus

Aspergillus fumigatus produce conidióforos cortos, lisos que se


expanden para formar la vesícula (uniseriado), la cual produce
únicamente en la mitad superior fiálides (sólo es la mitad fértil), de
donde emergen en cadena basipeta fialoconidias globosas en masa. En
cambio, Aspergillus flavus produce conidióforos largos, de pared gruesa,
que se expanden para formar la vesícula globosa, fértil en casi toda su
área, puede producir las fiálides directamente (uniseriada) o a través de
la métula (biseriada). Las fialoconidias son elípticas al principio y luego
mayormente globosas.

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