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Tarea # 4

Tinción
Los procedimientos que ponen de manifiesto diferencias entre las células bacterianas o
en partes una célula se conoce como técnica de coloración diferencial. Son algo mas
que elaboradas que la técnica simple en la que las células se someten a una sola
solución colorante o reactivo colorante.
Las tinciones se combinan químicamente con el protoplasma bacteriano; si la célula no
ha muerto el proceso termina de hacerlo. El método, por consiguiente, es bastante
drástico y puede producir artificios.
Las tinciones mas frecuente son sales. Las tinciones básicas consisten en un catión
coloreado unido a un anión incoloro, mientras las ácidas constituyen exactamente lo
contrario, unido a dos cationes. Las células bacterianas son abundantes en ácidos
nucleicos, los cuales portan cargas negativas en formas de fosfatos.
Los colorantes ácidos no tiñen a las células bacterias, y por tanto, pueden utilizarse
para teñir al fondo con un color de contraste.
Las tinciones básicas tiñen uniformemente en las células bacterianas, a menos que
antes de destruyan el ARN del citoplasma. También se pueden usar técnicas de tinción
especiales para flagelos, membranas celulares, paredes celulares, gránulos,
nucleótidos y esporas.
Tinción Gram.
Una característica taxonómica importante de las bacteria es su respuesta a la tinción a
de Gram esta característica parece ser fundamental, reacción a la tinción se
correlaciona a con muchas otras propiedades morfológicas en maneras relacionadas
filogenéticamente. Microorganismo potencialmente gran positivo puede verse como tal
cuando concurre un conjunto de particular de condiciones ambientales en un cultivo
joven. El procedimiento para tinción de Gram se inicia con la aplicación de un colorante
básico el cristal de violeta. Luego se aplica una solución de yodo en este momento
todas las bacterias de tiñen de azul. Continuación las células se tratan con alcohol las
células grampósitiva contienen el cristal violeta-yodo y permanecen de color azul; en
cambio las gramnegativa se descoloran completamente por el alcohol. Por ultimo se
aplican un colorante de contraste safranina, que es un colorante rojo. De esta manera,
las células gramnegativas, previamente descoloradas, toman el colorante de contraste
y las células gran positivas ahora aparecen púrpura.
La base de la reacción diferencial de Gram es la estructura de la pared celular. Esta
técnica diferencial es una de las de uso más común en microbiología. El frote
bacteriano teñido se somete a las soluciones siguientes en el orden en que se indica:
cristal violeta, alcohol y safranina o alguna otra solución de contraste conveniente.
Las bacterias gramnegativas contienen un gran porcentaje mas alto de lípidos que de
las bacterias grampositivas. Las paredes celulares de la bacterias gramnegativas son
también mas delgadas que las grampositivas con alcohol extrae lípidos con lo cual se
aumenta la porosidad o permeabilidad de la pared celular gramnegativa. Así el
complejo cristal violeta-yodo (CV-I) puede extraerse en los organismos gramnegativos y
de esta manera se destiñen las paredes celulares de las bacterias gran positivas, por
su composición diferente (bajo contenido lípido) se deshidratan alcohol y se logra
extraer el complejo (CV-I).
En las bacterias (CV-I) queda retenido en la pared después del tratamiento con etanol,
la cual se supone se supone causa una disminución de en el diámetro de los poros
glucopéptido o péptidoglicano de la pared celular. Las bacterias gran negativas tienen
una cantidad mucho menor de pépidoglicano con ligaduras cruzadas menos extensas
que en las paredes de las bacterias grampositivas.
Tinción azul de metileno
Se utiliza para observar morfología, agrupación, elementos, celulares, leucocitos,
células epiteliales etc.
ZILHL- NEELSEN
Se denominan gérmenes alcohol ácido-resistente a un grupo de organismos que, una
vez teñidos con solución colorante-mordientes, tienen la propiedad de resistir la
decoloración por ácidos minerales (ácido sulfúrico o nítrico) y alcohol.
Este carácter de ácido alcohol resistencia se debe a las sustancias serosas y lipídícas
que contiene la membrana de envoltura de éstos gérmenes y que varía en las
diferentes especies.
Entre los gérmenes ácido-resistentes se encuentran especies saprofitas y patógenas.
Saprofitas son: por ejemplo M. phlei, M. Smegmatis, Representantes patógenos son el
M. tuberculosis, M. leprae, M. kansaii.

- TINCION DIRECTA
En una tinción directa el colorante interacciona directamente con el sustrato, se utiliza
colorantes en materiales biológicos como indicadores de cambio de PH
- TINCION INDIRECTA
En una tinción indirecta se hace interaccionar en primer lugar a una sustancia química
denominada "mordiente" con el sustrato la cual permite la posterior interacción del
colorante. Usualmente los mordientes son sales, hidróxidos o alumbres de metales
bivalentes o trivalentes.

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